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카탈로그 번호 / ID. 250133
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QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit에는 QIAcuity Nanoplate에서의 미세 유체(microfluidic) 사용에 최적화된 4배 농축된 즉시 사용 가능한 마스터 믹스가 포함되어 있습니다. 이 키트는 프로브 기반 디지털 PCR의 특이성과 효율성을 향상시켜 정확한 싱글플렉스 또는 최대 12-plex 분석을 제공합니다. QIAcuity 채널 6개(채널당 분석 1개)와 롱 스토크스-시프트(Long Stokes-Shift, LSS) 염료 두 개를 사용하여 8-plex 반응을 구성할 수 있습니다. 최대 12개의 표적을 분석하기 위해 채널당 두 가지 분석을 혼합하여 진폭 멀티플렉싱을 수행할 수 있습니다.
QIAcuity High Multiplex Probe 마스터 믹스는 QIAcuity dPCR 기기에서 gDNA 또는 cDNA의 정확한 정량화를 위한 특이성을 높이도록 최적화되었습니다.
이 키트는 QIAcuity Digital PCR System 및 QIAcuity Nanoplate와 함께 사용할 수 있습니다.
당사의 dPCR 전문가로부터 제품에 대한 자세한 내용을 들어 보시겠습니까? 여기에 정보를 기입하시면 곧 연락드리겠습니다.
QIAcuity 디지털 PCR 플랫폼은 QIAcuity Software 3.0의 맞춤형 크로스토크 매트릭스를 활용하여 하이 멀티플렉싱되는 PCR의 문제를 부분적으로 극복합니다. 이 새로운 소프트웨어 기능은 인접 채널 간의 광학적 크로스토크 또는 신호 중첩을 보상합니다. QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit의 특수 화학 반응을 통해 최대 8개 채널(표준 광학 채널 6개 및 롱 스토크스-시프트(Long Stokes-Shift, LSS) 염료가 포함된 가수 분해 프로브를 사용하는 하이브리드 채널 2개)에서 표적을 검출할 수 있습니다( 그림 1).
QIAcuity Software 3.1과 QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit를 사용하면 6개 채널에서 최대 12개의 표적을 검출할 수 있습니다( 그림 2 및 그림 3).
QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit는 새로운 항체 매개 hot-start 작용기전으로 인해 싱글플렉스 또는 멀티플렉스 cDNA 또는 gDNA 분석에 높은 특이성을 제공합니다. 저온에서 QuantiNova DNA 중합효소는 QuantiNova Antibody 그리고 복합체를 안정화하는 새로운 첨가제인 QuantiNova Guard에 의해 비활성 상태로 유지됩니다. 이는 hot-start의 엄격도를 향상시키고 비특이적으로 어닐링된 프라이머 및 프라이머 다이머의 연장을 방지합니다. 95°C까지 온도를 올린 후 2분 이내에 QuantiNova Antibody와 QuantiNova Guard가 변성되고 QuantiNova DNA Polymerase가 활성화되어 PCR 증폭이 가능합니다.
나노플레이트에서의 dPCR 반응 원리는 여기에 설명되어 있습니다.
QIAcuity High Multiplex Probe Kit에는 즉시 사용 가능한 4배 농축된 PCR 마스터 믹스가 포함되어 있어 반응 및 사이클링 조건을 최적화할 필요가 없습니다. 템플릿 DNA 및 프라이머-프로브 세트를 마스터 믹스에 추가하고 Quick-Start 프로토콜에 설명된 절차에 따라 진행하면, QIAcuity에서 빠르고 안정적인 결과를 얻을 수 있습니다.
이 시스템은 분획, 열순환, 이미징 기능을 완전 자동화된 하나의 기기에 통합하여 사용자가 2시간 이내에 샘플에서 결과를 얻을 수 있도록 합니다. Software Suite에서 결과를 분석하면 마이크로리터당 복제 수로 표적 서열의 농도를 확인하고, 품질 관리를 위해 양성 샘플 또는 NTC에 대한 데이터를 얻을 수 있습니다. 편의성을 높이기 위해 이 분석은 동일한 근거리 통신망(Local Area Network, LAN) 내의 원격 컴퓨터로 확장될 수 있습니다.
QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit는 QIAcuity Digital PCR System 및 QIAcuity Nanoplate와 함께 다음과 같은 응용 분야에서 사용하는 경우 cDNA 표적 및 gDNA의 정량 분석이 가능합니다.
건강한 인간 기증자와 U-2 OS 육종 세포주 사이의 6가지 관심 유전자(Genes Of Interest, GOI)(FLT3, VEGFA, MYCN, ERBB2, EGFR, MAPK1)의 복제 수를 비교하기 위해 8-plex 반응을 구성했습니다. 정규화(normalization)를 위해 참조 유전자 AGO1 및 AP3B1의 평균 복제 수를 사용했습니다. 비교를 위해 유전자 표적 8개 모두 싱글플렉스에서 정량화했습니다. 싱글플렉스와 8-plex 반응 모두에서 건강한 기증자의 GOI 6개와 참조 유전자 2개의 복제 수는 예상대로 약 2였습니다. 반면, 싱글플렉스와 8-plex 반응의 결과는 모두 육종 세포주에서 게놈 불안정성을 드러냈으며, GOI 복제 수는 1.25에서 3.3까지 다양했습니다. 참조 유전자에서도 약간의 불안정성이 나타났습니다.
