miRCURY LNA miRNA Power Target Site Blockers

Les miRCURY LNA miRNA Power Target Site Blockers sont des oligonucléotides antisens qui se lient au site cible miARN d’un ARNm, empêchant les miARN d’accéder à ce site. Cela vous permet d’étudier les effets d’un miARN sur une seule cible. Les miRCURY LNA miRNA Power Target Site Blockers sont efficaces à de très faibles concentrations et, en raison de leur forte affinité pour l’amélioration par des LNA, les bloqueurs de sites cibles surpassent les miARN pour leurs sites cibles.

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Découvrez la fonction des miARN avec des bloqueurs de sites cibles

Les miARN régulent généralement l’expression génétique de plusieurs cibles, et l’inhibition d’un miARN entraîne la dérépression de toutes ces cibles. Par conséquent, un phénotype observé lors de l’inhibition d’un miARN est le résultat composite de la dérépression de plusieurs cibles (voir la figure  Inhibiteurs de miARN vs bloqueurs de sites cibles). Cependant, la dérégulation de quelques-unes de ces cibles contribue souvent de manière significative au phénotype. L’identification de ces cibles est importante pour comprendre la fonction du miARN.
Les miRCURY LNA miRNA Power Target Site Blockers sont utilisés pour :

• Déterminer quelle voie est impliquée dans un phénotype observé lors de l’inhibition d’un miARN
• Déterminer quelles interactions miARN/ARNm sont les plus importantes dans une voie contenant plusieurs cibles prédites

Des exemples d’applications de bloqueurs de sites cibles sont décrits dans les figures  Exemples d’applications de bloqueurs de sites cibles - voies X et Y et  Exemples d’applications de bloqueurs de sites cibles - voie Z.
La figure  Le bloqueur du site cible CAV1 phénocopie l’inhibiteur miR-199a-5p sous de nombreux aspects importants montre un exemple d’utilisation d’un bloqueur de site cible pour démontrer comment miR-199a-5p fonctionne comme un effecteur clé de la signalisation TGFβ dans les fibroblastes pulmonaires.

Que sont les bloqueurs de sites cibles ?

Les miRCURY LNA miRNA Target Site Blockers sont des oligonucléotides antisens  améliorés par des LNA qui se lient au site cible miARN d’un ARNm, empêchant ainsi les miARN d’accéder à ce site. Cela permet aux chercheurs d’étudier les effets d’un miARN sur une seule cible. En revanche, le phénotype observé lors de l’inhibition d’un miARN reflète les effets combinés de ce miARN sur toutes les cibles.

Bloqueurs de sites cibles améliorés par des LNA

L’incorporation de LNA dans le miRCURY LNA miRNA Power Target Site Blocker signifie qu’ils entreront en compétition plus efficacement avec le complexe miARN/RISC pour le site cible du miARN. De plus, la distribution des LNA dans l’ensemble du mélange LNA/ADN garantit que l’oligonucléotide antisens ne catalyse pas la dégradation de l’ARNm dépendante de la RNase H. Par conséquent, le TSB entraînera une expression accrue de la protéine codée par l’ARNm ciblé en empêchant l’atténuation traductionnelle médiée par les miARN (voir la figure  Les bloqueurs de sites cibles améliorés par des LNA entrent en compétition efficacement avec le RISC pour le site de liaison des miARN).

Après la remise en suspension, les miCURY LNA miRNA Target Site Blockers sont transfectés dans des cellules avec un réactif de transfection ou par électroporation. Les effets phénotypiques du bloqueur de site cible sont normalement évalués 24 à 72 heures après la transfection. Pour certaines applications, comme les dosages de différenciation cellulaire, la lecture phénotypique peut avoir lieu 7 à 10 jours après la transfection.

Les miRCURY LNA miRNA Target Site Blockers peuvent être utilisés pour :

• Déterminer quelle voie est impliquée dans un phénotype observé lors de l’inhibition d’un miARN
• Déterminer quelles interactions miARN/ARNm sont les plus importantes dans une voie contenant plusieurs cibles prédites