DNeasy Blood and Tissue Kits for DNA Isolation

Pour l’extraction de l’ADN total sur colonne de centrifugation ou plaque de 96 puits à partir de tissus ou de sang d’animaux et de cellules, levures, bactéries ou virus

La durabilité des produits est importante pour vous ?
Pour une alternative plus écologique à ce produit, ne cherchez pas plus loin.

DNeasy Blood & Tissue Kit (50) icon_0368_ls_gen_eco_friendly-s

N° de réf. / ID.   69504

50 DNeasy Mini Spin Columns, protéinase K, tampons, Collection Tubes (2 ml)
240,00 €
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Kit
DNeasy Blood & Tissue Kit
DNeasy Blood & Tissue QIAcube Kit
Eco-friendlier kit
Type de colonneType de plaque
Mini
96-well
Préparations
50
250
Les DNeasy Blood & Tissue Kits sont destinés aux applications de biologie moléculaire. Ces produits ne sont pas conçus pour le diagnostic, la prévention ou le traitement des maladies.
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Caractéristiques

  • Une méthode standardisée pour divers types d’échantillons
  • Des rendements élevés même à partir d’échantillons spécifiques
  • ADN de haute qualité
  • Des protocoles optimisés pour des matériels de départ très variés
  • Formats de colonne de centrifugation et de 96 puits haut débit
  • Flux de travail automatisés sur le QIAcube Connect

Détails produit

Les DNeasy Blood & Tissue Kits permettent une extraction rapide de l’ADN à l’aide d’un processus à base de silice, sans phénol ni chloroforme dans les formats de colonne de centrifugation et de plaque de 96 puits. Pour la plupart des échantillons, une lyse directe avec la protéinase K élimine le besoin d’une désagrégation mécanique, réduisant le temps de manipulation. Des protocoles sur mesure pour des échantillons spécifiques assurent une extraction constante d’ADN de haute qualité, idéal pour les sciences de la vie, le génotypage et la recherche d’agents pathogènes vétérinaires. Les kits peuvent être automatisés sur le QIAcube Connect.

Pour une alternative plus durable, le QIAwave DNA Blood & Tissue Kit réduit l’utilisation de plastique et de carton jusqu’à 62 % et 58 % respectivement. Des tubes de décharge réutilisables constitués à 100 % de plastique recyclé sont inclus dans le kit et peuvent être réutilisés pendant la procédure. Les tampons QIAwave sont concentrés, diminuant l’utilisation de plastique dans chaque flacon jusqu’à 90 %. Malgré les différences visuelles, le QIAwave Kit est tout aussi accessible que le kit standard, avec une chimie et des performances identiques. Remarque : Des flacons en verre stériles sont nécessaires pour la reconstitution de tampon.

En partenariat avec My Green Lab, nous avons évalué l’impact environnemental du DNeasy Blood & Tissue Kit (50/250) et du QIAwave DNA Blood & Tissue Kit (50/250). Les labels My Green Lab ACT du facteur d’impact environnemental visent à évaluer et noter les produits selon plusieurs critères de durabilité, parmi lesquels :

  • La fabrication
  • La gestion responsable des produits chimiques
  • Le contenu durable dans les produits et les matériaux d’emballage
  • L’élimination de l’emballage en fin de vie utile

Les produits sont notés de 1 à 10, à l’exception des produits de consommation d’eau et d’énergie à qui l’on attribue 1 point par kWh ou gallon, respectivement. Un score bas indique un impact faible (voir les figures « Labels du facteur d’impact environnemental ACT du DNeasy Blood & Tissue Kit et du QIAwave DNA Blood & Tissue Kit É.-U. [ 50/  250], UE [ 50/  250] et R.-U. [ 50/  250]). ». 

 

Performances

La procédure efficace des DNeasy et QIAwave DNA Blood & Tissue Kits permet de hauts rendements d’ADN total à partir d’échantillons sanguins et tissulaires animaux (voir le tableau Rendements typiques d’ADN à partir de tissus animaux et la figure  Rendements d’ADN). Des protocoles optimisés assurent de hauts rendements à partir d’échantillons non standard, comme les poils d’animaux (voir  Génotypage de chevaux), ainsi que les cellules de culture, les tissus fixés ou les bactéries à Gram positif ou négatif. Des protocoles spécialisés en ligne sont disponibles pour la purification de l’ADN à partir de levures, d’insectes, de poils ou d’autres types d’échantillons.

Puisque la chimie du QIAwave DNA Blood & Tissue Kit et des DNeasy Blood & Tissue Kits sont identiques, ils montrent les mêmes performances. Les deux kits ont montré des performances supérieures à celles des kits concurrents (voir la figure « Performances du QIAwave DNA Blood & Tissue Kit »).

En suivant le protocole standard du QIAwave DNA Blood & Tissue Kit, de hauts rendements d’ADN total peuvent être isolés à partir d’échantillons sanguins et tissulaires animaux (voir le tableau « Rendements d’ADN typiques à partir de tissus animaux à l’aide du QIAwave DNA Blood & Tissue- » et la figure «  Rendements d’ADN »). De plus, nous proposons des protocoles optimisés pour assurer de hauts rendements à partir d’échantillons non standard, tels que :

  • Poils d’animaux
  • Cellules de culture
  • Bactéries à Gram positif et à Gram négatif
  • Levures
  • Insectes
  • Autres types d’échantillons

 

Rendement typique à partir de tissus animaux à l’aide des DNeasy et QIAwave Kits
Source Quantité ADN (µg)
Sang de mammifère 100 µl 3 à 6
Sang d’oiseau 5 µl 9 à 40
Cellules HeLa 2 x 106 15 à 25
Foie 25 mg 10 à 30
Cerveau 25 mg 15 à 30
Rein 25 mg 15 à 30
Rate 10 mg 5 à 30
Queue de souris 1,2 cm (bout) 10 à 25
Queue de rat 0,6 cm (bout) 20 à 40
Oreille de porc 25 mg 10 à 30
Crin de cheval 10 crins 2 à 4
Nageoire de poisson 20 mg 10 à 20
Alevins (maquereau) 10 mg 5 à 10

Les DNeasy Blood & Tissue Kits simplifient la purification d’ADN à partir d’une large gamme de types d’échantillons, y compris provenant d’espèces animales rencontrées fréquemment en sciences de la vie, en sciences vétérinaires et pour des applications de génotypage (voir «  ADN de haute qualité »). L’ADN purifié est exempt d’inhibiteurs de PCR, ce qui permet une détection sensible en PCR standard, multiplex (voir  PCR 16plex efficace) et real-time (voir  real-time PCR). Les DNeasy Blood & Tissue Kits fournissent des résultats fiables, des analyses en laboratoire de souris transgéniques (voir Purification à haut débit) aux programmes d’élevage de bétail (voir  Génotypage de porcs) ainsi que le génotypage de pédigrée. Les applications de tests de routine peuvent être facilement adaptées à l’aide du DNeasy 96 Blood & Tissue Kit (voir Purification à haut débit).

 

Principe

Les DNeasy et les QIAwave DNA Blood & Tissue Kits sont conçus pour la purification rapide de l’ADN total (p. ex. génomique, mitochondrial et pathogène) à partir de différentes sources d’échantillons, y compris les cellules et tissus animaux, le sang ou les bactéries, frais ou congelés.

La membrane DNeasy combine les propriétés de liaison d’une membrane à base de silice et la technologie simple d’une microcentrifugeuse ou du 96-Well-Plate Centrifugation System de QIAGEN. L’ADN est adsorbé par la membrane DNeasy en présence de hautes concentrations de sel chaotropique, qui élimine l’eau des molécules hydratées dans la solution. Les conditions du tampon des procédures DNeasy Blood & Tissue sont pensées pour permettre l’adsorption spécifique de l’ADN par la membrane de silice, en plus d’optimiser l’élimination des contaminants et inhibiteurs enzymatiques.

La purification ne requiert pas d’extraction ni au phénol ni au chloroforme ni aucune précipitation à l’alcool et demande une manipulation minime. Cela fait des DNeasy Blood & Tissue Kits une procédure particulièrement adaptée au traitement simultané de plusieurs échantillons. Pour des applications à plus haut débit, le DNeasy 96 Blood & Tissue Kit permet le traitement en simultané de 96 ou 192 échantillons.

 

Procédure

Une technologie fiable de membrane de silice, dans les formats pratiques de colonne de centrifugation ou de 96 puits, assure une purification de l’ADN rapide et reproductible, ce qui rend l’extraction organique et la précipitation à l’alcool inutiles (voir  Procédures DNeasy Mini et 96). Tout d’abord, les échantillons sont lysés à la protéinase K. Les conditions de tamponnage sont ajustées pour offrir des conditions de liaison de l’ADN optimales, puis le lysat est chargé sur la colonne de centrifugation DNeasy Mini ou la plaque DNeasy 96. Lors de la centrifugation, l’ADN se lie de manière sélective sur la membrane DNeasy, tandis que les contaminants s’écoulent. Les contaminants et inhibiteurs enzymatiques restants sont éliminés par deux étapes de lavage efficaces, et l’ADN est enfin élué dans l’eau ou le tampon, prêt à être utilisé.

Les colonnes de centrifugation DNeasy Mini du DNeasy Blood & Tissue Kit sont préemballées dans des tubes de prélèvement et scellées individuellement, offrant confort et sécurité. La procédure de purification à l’aide des colonnes de centrifugation DNeasy Mini peut être automatisée sur le QIAcube Connect. Le DNeasy 96 Blood & Tissue Kit fournit un traitement haut débit dans un format de 96 puits grâce au 96-Well-Plate Centrifugation System de QIAGEN.

Les protocoles standard pour les DNeasy Blood & Tissue Kits peuvent être exécutés de manière homogène via le système TRACKMAN Connected.

Applications

Les DNeasy Blood & Tissue Kits et les QIAwave DNA Blood & Tissue Kits permettent d’obtenir un ADN de haute qualité prêt à l’emploi dans tous les dosages en aval, notamment les applications dPCR et NGS suivantes :

  • Recherche dans le domaine des sciences de la vie
  • Élevage de bétail
  • Génotypage de pédigrée
  • Recherche d’agents pathogènes vétérinaires
  • Tests appliqués de routine

 

Données et illustrations utiles

Spécifications

CaractéristiquesSpécifications
ApplicationsPCR, real-time PCR, génotypage
Elution volume100 à 200 µl
Time per run or per prep20 minutes à 1 heure
Main sample typeSang, tissus
FormatPlaque de 96 puits, colonne de centrifugation
Sample amount100 µl/25 mg
ProcessingManuel
Yield6 µg/30 µg
TechnologyTechnologie à base de silice
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or proteinADN

Ressources

Documents d’application/de protocole (1)
Step up your sustainability by recycling your labware. This handy guide will show you how to quickly and easily recycle kit components and reduce plastic waste in your lab.
Protocoles complémentaires (4)
This protocol is designed for purification of DNA from up to 5 x 107 yeast cells.
This protocol is designed for purification of DNA from a 200 μl crude lysate.
This protocol is designed for purification of DNA from up to 50 mg of insects, such as drosophila.
Fiches de données de sécurité (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
Brochures et guides (6)
This fact sheet explains the inclusion of DNeasy Blood & Tissue Kits and DNeasy Plant Mini Kits in our Go Greener program.
This fact sheet explains the inclusion of QIAwave Kits in our Go Greener program.
Affiches scientifiques (1)
Manuels de kit (3)
For purification of total DNA from animal blood, animal tissue, rodent tails, ear punches, cultured cells, fixed tissue, bacteria, insects

June 2023
For use on QIAcube Connect
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)

Publications

The unique 16S rRNA genes of piezophiles reflect both phylogeny and adaptation.
Lauro FM; Chastain RA; Blankenship LE; Yayanos AA; Bartlett DH;
Appl Environ Microbiol; 2006; 73 (3):838-45 2006 Dec 8 PMID:17158629
Assays to detect beta-tubulin codon 200 polymorphism in Trichuris trichiura and Ascaris lumbricoides.
Diawara A; Drake LJ; Suswillo RR; Kihara J; Bundy DA; Scott ME; Halpenny C; Stothard JR; Prichard RK;
PLoS Negl Trop Dis; 2009; 3 (3):e397 2009 Mar 24 PMID:19308251
Whole genome amplification for array comparative genomic hybridization using DNA extracted from formalin-fixed, paraffin-embedded histological sections.
Huang J; Pang J; Watanabe T; Ng HK; Ohgaki H;
J Mol Diagn; 2009; 11 (2):109-16 2009 Feb 5 PMID:19197000
Real-time PCR detection of pathogenic microorganisms in roof-harvested rainwater in Southeast Queensland, Australia.
Ahmed W; Huygens F; Goonetilleke A; Gardner T;
Appl Environ Microbiol; 2008; 74 (17):5490-6 2008 Jul 11 PMID:18621865
MicroRNA-137 targets microphthalmia-associated transcription factor in melanoma cell lines.
Bemis LT; Chen R; Amato CM; Classen EH; Robinson SE; Coffey DG; Erickson PF; Shellman YG; Robinson WA;
Cancer Res; 2008; 68 (5):1362-8 2008 Mar 1 PMID:18316599

FAQ

When should carrier be used with the QIAamp DNA Mini or the DNeasy Blood & Tissue Kit?

For DNA isolation using the QIAamp DNA Mini, or the DNeasy Blood & Tissue Kit, we recommend using carrier DNA when expected yields are below 10 ng. If possible, carrier DNAs such as poly-dA, poly-dT or poly-dA:dT should be used. Other carrier DNAs such as herring sperm DNA may interfere with subsequent PCR by binding primers nonspecifically.

Please note that poly-dA may interfere with oligo-dT primers, and, in this case, a different carrier DNA should be used. The concentration of carrier DNA should be at least 10 µg/ml. Optimal amounts need to be determined empirically for each application. The size distribution of carrier DNAs is typically in the range of 100 bp to 10 kb.

FAQ-100
How do I safely inactivate biohazardous flow-through material?

Always dispose of potentially biohazardous solutions according to your institution’s waste-disposal guidelines. Although the lysis and binding buffers in QIAamp, DNeasy, and RNeasy kits contain chaotropic agents that can inactivate some biohazardous material, local regulations dictate the proper way to dispose of biohazards. DO NOT add bleach or acidic solutions directly to the sample-preparation waste. Guanidine hydrochloride in the sample-preparation waste can form highly reactive compounds when combined with bleach.
Please access our Material Safety Data Sheets (MSDS) online for detailed information on the reagents for each respective kit.

FAQ-12
Do you have a protocol for purification of total DNA from yeast?

Yes, please follow the Supplementary Protocol 'Purification of total DNA from yeast using the DNeasy Blood & Tissue Kit' (DY13).

 

FAQ-1253
Do you have a protocol for purification of total DNA from insects?

Yes, please follow the Supplementary Protocol 'Purification of total DNA from insects using the DNeasy Blood & Tissue Kit' (DY14).

 

FAQ-1254
Do you have a protocol for purification of total DNA from crude lysates?

Yes, please follow the Supplementary Protocol 'Purification of total DNA from crude lysates using the DNeasy Blood & Tissue Kit' (DY15).

 

FAQ-1255
Do you have data showing effects of sample size on DNA yield and purity using the DNeasy 96 Blood & Tissue kit?
What dedicated QIAcube Kits are available?
How can I precipitate genomic DNA using isopropanol?

Alcohol precipitation is commonly used for concentrating, desalting, and recovering nucleic acids. Since less alcohol is required for isopropanol precipitation, this is the preferred method for precipitation of DNA from large volumes. In addition, isopropanol precipitation can be performed at room temperature, which minimizes co-precipitation of salt that interferes with downstream applications.

 

Procedure

  1. Adjust the salt concentration, for example, with sodium acetate (0.3 M, pH 5.2, final concentration) or ammonium acetate (2.0–2.5 M, final concentration).
  2. Add 0.6–0.7 volumes of room-temperature isopropanol to the DNA solution and mix well.
  3. Centrifuge the sample immediately at 10,000–15,000 x g for 15–30 min at 4°C
  4. Carefully decant the supernatant without disturbing the pellet.
  5. Wash the DNA pellet by adding 1–10 ml (depending on the size of the preparation) of room-temperature 70% ethanol. This removes co-precipitated salt and replaces the isopropanol with the more volatile ethanol, making the DNA easier to redissolve.
  6. Centrifuge at 10,000–15,000 x g for 5–15 min at 4°C.
  7. Carefully decant the supernatant without disturbing the pellet.
  8. Air-dry the pellet for 5–20 min (depending on the size of the pellet).
  9. Redissolve the DNA in a suitable buffer.

Tip: Use a buffer with a pH of 7.5–8.0, as DNA does not dissolve easily in acidic buffers. Often distilled water can have an acidic pH. The addition of EDTA protects the DNA from DNase digestion.

Tip: High-molecular-weight DNA, such as genomic DNA, should be redissolved very gently to avoid shearing. If the DNA pellet does not dissolve easily, heat at 55°C for 1–2 h with gentle shaking.

FAQ-2953
303 - Can I use my own lysis buffer with the DNeasy Blood & Tissue or QIAamp DNA Mini Kit?

If you have optimized the lysis conditions for a specific sample type, you can lyse the sample in your lysis buffer, and follow the Supplementary Protocol 'Purification of total DNA from crude lysates using the DNeasy Blood & Tissue Kit' (DY15), or the corresponding protocol in the Appendix of the QIAamp DNA Mini Kit and QIAamp DNA Blood Mini Kit Handbook.

 

FAQ-303
3192 - Is QIAGEN Protease compatible with Buffer ATL?
No, QIAGEN Protease is not compatible with Buffer ATL.
FAQ-3192
Is it possible to stop the DNeasy tissue protocol and store the tissue lysates after digesting in buffer ATL and Proteinase K?
After proteinase K digestion, tissue samples can be stored in Buffer ATL for up 6 months at ambient temperature without any reduction in DNA quality.
FAQ-3362
What is the shelf-life for QIAGEN Proteinase K (cat. no. 19131, 19133)?

QIAGEN Proteinase K is stable for up to 1 year after delivery when stored at room temperature. To prolong the shelf-life of Proteinase K, storage at 2–8°C is recommended.

FAQ-3447
Is the quality and size of DNA extracted with the DNeasy Blood & Tissue kit good enough to generate DNA-libraries for next generation sequencing?
The size of DNA obtained with DNeasy Blood & Tissue kit ranges between 100 bp and 50 kb, with 30 kb fragments predominating. The 30 kb fragments are a good starting point for most of the library preparations. Furthermore, the purified DNA is free of protein, nucleases, and other contaminants and inhibitors, and therefore is suitable for NGS.
FAQ-3517
What QIAGEN kit can I use to isolate DNA from food products to test for genetically modified organisms (GMOs)?

For plant-based foods, such as soy, tofu, and cookies, DNA isolation has been successfully carried out using the DNeasy Plant Mini Kit. The QIAamp DNA Stool Mini Kit has been used for isolation of genomic DNA from highly processed foods, and foods that contain high levels of PCR inhibitors, such as chocolate. For meat and processed meats, such as sausage, we suggest the DNeasy Blood & Tissue Kit.

See also the QIAGEN News article "Detection of genetically modified soybean and maize in raw and processed foodstuffs", and the accompanying editorial "Detecting genetically modified organisms in food."

FAQ-371
How can I improve DNA yields from very tough tissues using the DNeasy Blood & Tissue Kit or the QIAamp DNA Mini Kit?

Efficient DNA isolation requires thorough sample disruption and digestion.

Although the QIAamp and DNeasy procedures requires no mechanical disruption of the tissue sample, the lysis time will be reduced if the sample is ground in liquid nitrogen or mechanically homogenized in advance. For mechanical homogenization, a rotor–stator homogenizer, such as the QIAGEN TissueRuptor, or a bead mill, such as the QIAGEN TissueLyser, can be used.

To improve digestion of tough tissue samples, Proteinase K incubation at 56°C can be performed overnight. DNA yields may be improved by increasing the amount of Proteinase K or by adding additional proteinase K after several hours of digestion.  

FAQ-374
What is the expected yield of genomic DNA isolated from bacteria with the DNeasy Blood & Tissue or QIAamp DNA Mini Kit?

The expected yield of genomic DNA isolated from bacteria with the DNeasy Blood & Tissue Kit or the QIAamp DNA Mini Kit is approximately 10 ug of DNA per 2x 109 bacterial cells. Note that yields of genomic DNA will vary depending on bacterial strain, quality of the starting material, growing conditions, and the amount of material processed.

 

FAQ-632
What can be used as an alternative to the A260 measurement for quantification of small amounts of RNA and DNA?

Small amounts of RNA and DNA may be difficult to measure spectrophotometrically. Fluorometric measurements, or quantitative RT-PCR and PCR are more sensitive and accurate methods to quantify low amounts of RNA or DNA.

Fluorometric measurements are carried out using nucleic acid binding dyes, such as RiboGreen® RNA Quantitation Reagent for RNA, and PicoGreen® DNA Quantitation Reagent for DNA (Molecular Probes, Inc.).

FAQ-728
What is the composition of buffer AE?

The composition of Buffer AE is:

  • 10 mM Tris-Cl
  • 0.5 mM EDTA; pH 9.0.
FAQ-730
Do you have a protocol for isolation of genomic DNA from insects?

Yes, we have the following protocols:

  • Isolation of genomic DNA from mosquitoes or other insects using the QIAGEN Genomic tip (QG06).
  • Purification of total DNA from insects using the DNeasy Blood & Tissue Kit (DY14).
FAQ-904
Do you have a protocol for the isolation of genomic DNA from bone?

Yes, we have the following protocols:

  • Isolation of genomic DNA from compact bone using the QIAamp DNA Mini Kit (QA02)
  • Isolation of genomic DNA from compact bone using the DNeasy Blood & Tissue Kit (DY01)
  • Purification of genomic DNA from bones using the QIAamp DNA Micro Kit (QA39)
  • Purification of archive-quality DNA from bone fragments using the Gentra Puregene Tissue Kit (PG38).
FAQ-908
Do you have a protocol for the isolation of genomic DNA from sperm?

Yes, we have the following protocols:

  • Isolation of genomic DNA from sperm using the QIAamp DNA Mini Kit; protocol 1 (QA03), long procedure
  • Isolation of genomic DNA from sperm using the QIAamp DNA Mini Kit; protocol 2 (QA04), short procedure
  • Purification of total DNA from animal sperm using the DNeasy Blood and Tissue kit; protocol 1 (DY02), long procedure
  • Purification of total DNA from animal sperm using the DNeasy Blood and Tissue kit; protocol 2 (DY03), short procedure
  • Purification of DNA from epithelial cells mixed with sperm cells using the QIAamp DNA Micro Kit (QA40).
FAQ-909
Do you have a protocol for Acetyl Cysteine (NALC) treatment of viscous samples?

Yes, please follow either of the User-Developed Protocols:

FAQ-913
Do you have a protocol for isolation of genomic DNA from saliva and mouthwash?

Yes, we have the following protocols:

  • Isolation of genomic DNA from saliva and mouthwash using the QIAamp DNA Mini Kit; vacuum procedure (QA19v)
  • Isolation of genomic DNA from saliva and mouthwash using the QIAamp DNA Mini Kit; spin procedure (QA19s)
  • Isolation of genomic DNA from saliva using the DNeasy Blood & Tissue Kit; spin procedure (DY07)
FAQ-917
Do you have a protocol for the isolation of DNA from soft tissues using the TissueLyser?
Do you have a protocol for the isolation of viral DNA from stool?
Yes, please follow the User-Developed Protocol 'Isolation of viral DNA from stool using the DNeasy Blood & Tissue Kit' (DY05).
FAQ-929
Do you have a protocol for isolation of genomic DNA from saliva using the DNeasy Blood & Tissue Kit?

Yes, please follow the User-Developed Protocol 'Isolation of genomic DNA from saliva using the DNeasy Blood & Tissue Kit; spin procedure' (DY07).

 

FAQ-931
Do you have a protocol for purification of DNA from cultured animal cells using the DNeasy 96 Blood & Tissue Kit?

Yes, please follow the Supplementary Protocol 'Purification of DNA from cultured animal cells using the DNeasy 96 Blood & Tissue Kit' (DY12).

 

FAQ-934