QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit

QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit 包含一份针对在 QIAcuity Nanoplate 中的微流体使用优化的 4 倍浓缩即用型预混液。该试剂盒提高了基于探针法的数字 PCR 的特异性和效率，可提供准确的单重或最多 12 重的定量分析结果。您可以使用六个 QIAcuity 通道（一个检测/通道）外加两个长斯托克斯位移 (LSS) 染料来构建 8 重反应。对于多达 12 个靶标的分析，您可以通过在每个通道中混合两种不同的检测来执行振幅多重检测。 

QIAcuity High Multiplex Probe Master Mix 进行了优化，以提高特异性，从而可在 QIAcuity dPCR 仪器上准确定量 gDNA 或 cDNA。

该试剂盒应与 QIAcuity Digital PCR System 和 QIAcuity Nanoplate结合使用。

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QIAcuity 数字 PCR 平台克服了高多重 PCR 的挑战，这部分归功于 QIAcuity Software 3.0 中的定制串扰矩阵。这一新增的软件功能可补偿相邻通道之间的光学串扰或信号重叠。配合 QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit 的专用化学试剂，用户可以检测多达八个通道中的靶标：六个标准光学通道和两个杂合体通道，后者使用了带长斯托克斯位移 (Long Stokes-Shift, LSS) 染料的水解探针（ 图 1）。 

QIAcuity Software 3.1 和 QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit 允许用户检测六个通道中的多达 12 个靶标（ 图 2 和 图 3）。

得益于抗体介导的新型热启动机制，QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit 可确保 cDNA 或 gDNA 单重或多重分析时的高特异性。在低温下，QuantiNova DNA 聚合酶在 QuantiNova 抗体和 QuantiNova Guard（一款具有复合物稳定化作用的新型添加剂）的作用下保持在失活状态。这提高了热启动的严格性并防止非特异性退火引物的延伸及引物二聚体的形成。在温度升高到 95°C 的 2 分钟内，QuantiNova Antibody 和 QuantiNova Guard 将发生变性，QuantiNova DNA Polymerase 将被激活，从而启动 PCR 扩增。

有关纳米微孔板中 dPCR 反应的原理说明，请参见此处。

QIAcuity High Multiplex Probe Kit 包含一份即用型 4 倍浓度 PCR 预混液，无需优化反应及循环条件。仅需将模板 DNA 和引物探针组添加到预混液中并执行快速启动方案中列出的程序，就能在 QIAcuity 上快速获得可靠的结果。

该系统将微分化、热循环和成像集成到单一全自动化的仪器上，使用户可在 2 小时内获得结果。在 Software Suite 中分析结果，您可以在其中找到靶标序列的浓度（单位：每微升拷贝数），并获得阳性样本或 NTC 的数据，用于质量控制。方便起见，该分析还可在同一局域网 (local area network, LAN) 内的远程计算机上执行。

QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit 与 QIAcuity Digital PCR System 和 QIAcuity Nanoplate 的结合使用可让您在各种应用中进行 cDNA 靶标和 gDNA 定量分析，这些应用包括：

• 罕见突变检测
• 拷贝数变异分析
• 微生物研究，包括废水监测
• 病原体检测
• 基因分型
• 基因表达分析
• miRNA 研究