Anti·His HRP Conjugate Kits

Hisタグタンパク質の高感度で直接的な検出のために

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Penta·His HRP Conjugate Kit

Cat. No. / ID:  34460

125 μl Penta·His HRP Conjugate、5 gブロッキング試薬、50 mlブロッキング試薬バッファー(10x濃縮液)
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$675.00
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Kit
Penta·His HRP
RGS·His HRP
Anti·His HRP Conjugate Kitsは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。

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Features

  • Hisタグタンパク質およびRGS·Hisエピトープの高感度で高速な検出
  • 二次抗体は不要
  • 最適化されたブロッキング試薬が同梱

Product Details

RGS·His HRP Conjugate Kit(Hisタグコンジュゲート)およびPenta·His HRP Conjugate Kit(6xHisタグコンジュゲート)を含むAnti·His HRP Conjugate Kitは、二次抗体を必要とせずに、Hisタグのある遺伝子組み換えタンパク質を高感度で検出することを目的としています。それらは、西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)結合抗·His抗体から構成されています。検出手順では、抗·His抗体はタンパク質のHisタグに結合し、複合体はHRPと反応する発色性基質または化学発光基質を使用して局在化されます。

Performance

特徴RGS·His HRP Conjugate KitPenta·His HRP Conjugate Kit
検出N末端、C末端および内在性Hisタグ(エピトープRGSHHHHを含む)N末端、C末端および内在性6xHisタグ
ドットブロットでの感度*10 pg10 pg
ウェスタンブロットでの感度*50 pg50 pg
抗体のアイソタイプマウスIgG1マウスIgG1
交差反応E. coli、酵母、哺乳類または昆虫の粗細胞溶解物では無視できるほどわずかE. coli、酵母、哺乳類または昆虫の粗細胞溶解物では無視できるほどわずか
形式安定化したストック溶液安定化したストック溶液
ワーキングソリューション125–250 ml125–250 ml

Principle

Anti·His HRP Conjugate Kitは、リポーター酵素の西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)に化学結合したQIAexpress Anti·His Antibodiesから構成されます。アクセス可能なHisタグのある遺伝子組み換えタンパク質の特異性が高く高感度の直接的検出のために使用できます。二次抗体の必要がなくなり、免疫検出方法の時間を節約します。Anti·His HRP Conjugate Kitsは、化学発光検出用基質または発色性検出用基質と共に使用できます。

Procedure

QIAexpress、検出およびアッセイハンドブックは、すべてのQIAexpress検出およびアッセイ製品に付属しており、アッセイの設計および実行のための詳細なプロトコール例およびガイドラインが含まれます。

Applications

RGS·His HRP Conjugate Kit(Hisタグコンジュゲート)やPenta·His HRP Conjugate Kit(6x Hisタグコンジュゲート)を含むAnti·His HRP Conjugate Kitは、それらの対応する抗体と同じエピトープを認識するため、以下の方法でのHisタグタンパク質の直接的な化学発光検出または発色検出に使用できます。

  • ウェスタン、ドット、コロニーブロッティング法
  • ELISAおよびその他の免疫アッセイ方法

RGS·His HRP Conjugate Kitと Penta·His HRP Conjugate Kitの比較

機能 RGS·His HRP Conjugate Kit Penta·His HRP Conjugate Kit
コンジュゲート酵素 HRP HRP
検出 二次抗体必要 二次抗体必要
検出されるエピトープ RGSHHHH HHHHH
ブロット検出用基質 Biotech ECL 4C1N
アッセイ用の基質 OPD OPD
Tag Hisタグ His tag

Anti·His HRP Conjugate Kitは、分子生物学のアプリケ-ション向けであり、病気の診断、予防、治療を目的としてはいません。

Resources

MSDS (2)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
キットハンドブック (1)
For Anti·His Antibodies, Anti·His HRP Conjugates, Penta·His™ Alexa Fluor® Conjugates, Penta·His Biotin Conjugate, Ni-NTA Conjugates, Tag·100™ Antibody, Streptavidin–R-PE, 6xHis Protein Ladder, Ni-NTA HisSorb™ Strips and Plates 
Supplementary Protocols (1)
Certificates of Analysis (1)
Kit Handbooks (1)
For Anti·His Antibodies, Anti·His HRP Conjugates, Penta·His™ Alexa Fluor® Conjugates, Penta·His Biotin Conjugate, Ni-NTA Conjugates, Tag·100™ Antibody, Streptavidin–R-PE, 6xHis Protein Ladder, Ni-NTA HisSorb™ Strips and Plates 

FAQ

What epitopes do the Anti-His Conjugates and Anti-His Antibodies recognize?

The table below lists the epitopes recognized by the Anti-His Conjugates and Anti-His Antibodies. 'H' designates a histidine residue, while 'X' designates any amino acid other than histidine. Note that individual 6xHis-tagged proteins are often recognized better by one Anti-His Antibody than by the others, possibly because of subtle differences in the exact conformation of the 6xHis tag and other parts of the protein in the vicinity of the tag. To choose the optimal antibody for your specific 6xHis-tagged protein and application, QIAGEN offers the Anti-His Antibody Selector Kit. The kit includes 3 µg of each of the three antibodies for direct comparison and economical selection of the one that gives the best results.

Epitopes recognized by QIAexpress Anti-His HRP Conjugates and Anti-His Antibodies


Peptide Penta-His Tetra-His RGS-His
XHHHHHHX
+ +
XXHHHHHX
+ +
XHXHHHHX
+
XHHHHXHX
+
XRGSHHHHX
+ +
XRGSHHHHHHX
+ + +
XHXHHXHX

Note that the presence of specific residues N- or C-terminal to the epitope is not required.

FAQ ID -170
Which Anti-His Antibody is the most sensitive for my protein of interest?

Penta-His and Tetra-His Antibody bind to proteins that have 6xHis tags regardless of the surrounding amino-acids, even when the tag is partially hidden. Subtle differences in the antigen recognition sites of these antibodies mean that some 6xHis-tagged proteins are detected with higher sensitivity by one Anti-His Antibody than by the others (see figure below). Therefore, to achieve optimum results, we recommend comparison of these antibodies in parallel for new applications and proteins. QIAGEN offers the Anti-His Antibody Selector Kit for this purpose.


 

Sensitivity of QIAexpress Anti·His Antibodies



 

Note:  RGS His Antibody regonizes the RGS(His)4 epitope that is found on proteins endcoded by most pQE vectors as well as several pRSETan pBlue BacHis -vectors from Invitrogen.

FAQ ID -172
How can I avoid poor immunolocalization morphology with Anti-His Antibodies?
Insufficient fixation of samples leads to poor morphological preservation. If using methanol or acetone try fixation with paraformaldehyde. If 2% paraformaldehyde is insufficient, increase fixative concentration to 4% and increase incubation time. Keep in mind that too harsh fixation can lead to functional alteration of the 6xHis epitope and loss of recognition by the Anti·His Antibodies.immunofluorescence
FAQ ID -200
Can the Blocking Reagent supplied with the Penta-His HRP Conjugate be used with other antibodies?
Yes, the Blocking Reagent supplied with our Penta-His HRP Conjugate can also be used with other antibodies.
FAQ ID -1073