HotStarTaq Plus DNA Polymerase

• 最小限の至適化で高いPCR特異性
• わずか5分で迅速に酵素活性化
• 直接ゲルにロード可能なPCR バッファーでより迅速かつ容易な操作

このPolymeraseはHotStarTaq DNA Polymeraseの持つ特異性、感度、最小限の至適化と、5分の迅速な活性化時間を組み合わせています。PCRセットアップは室温で行なうことができ、2種類のマーカー色素が入った画期的なCoralLoad PCR Bufferにより、反応液を直接アガロースゲルにロードできます。スタンダードのQIAGEN PCR Bufferも入っているので簡便な操作を実現します。さらに増幅困難なテンプレート（例；GCリッチ）用に画期的なQ-Solutionも入っています。ユニークなキット構成品ならびに至適化済みのプロトコールによりPCR操作が能率的になりました。

HotStarTaq Plus DNA Polymeraseｓ詳細データ

濃度：5 units/µl
組み換え酵素：Yes
基質アナログ：dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、 fluorescent-dNTP/ddNTP
エクステンション速度：72℃ で2～4 kb/min　
半減期：97℃で10分、94℃で60分　
増幅効率：≥10⁵ 倍
5'–>3' エキソヌクレアーゼ活性：Yes
余分なA付加：Yes
3'–>5' エキソヌクレアーゼ活性：No
ヌクレアーゼの混入：No
RNasesの混入：No
プロテアーゼの混入：No
自己プライマー活性：なし

HotStarTaq Plus DNA Polymerase は、わずか5分間の迅速な活性化時間で、従来のHotStarTaq DNA Polymeraseの優れた性能を保持しています。

QIAGEN Taq DNA Polymerase を改良したHotStarTaq Plus Plus DNA Polymerase は、常温では不活性状態でポリメラーゼ活性はありません。この特性により、PCR セットアップや最初のPCR サイクル中の低温での非特異的なプライマーのアニーリングやプライマーダイマーの形成を回避できます（図“ 最高の特異性”および“ 異なるプライマー／テンプレートシステムにおける高特異性”）。HotStarTaq Plus DNA Polymeraseは、95℃、5 分間のインキュベーションステップで活性化され、このステップは既存のサーマルサイクリングのプログラムに容易に導入できます。

QIAGEN PCR Buffer

QIAGEN PCR Buffer は、各PCRサイクルでアニーリングステップ中にプライマー特異的な結合の割合を非特異的な結合に対して高めることにより、各PCRサイクルの特異的な増幅を維持します（図“ プライマーのアニーリングにおける特異性が増加”）。このバッファーはユニークな配合比のKClと (NH₄)₂SO₄を含み、従来のPCRバッファーに比べ、幅広いアニーリング温度やMg²⁺濃度の範囲で厳密で特異的なプライマー・アニーリングを実現します。従って、異なるアニーリング温度あるいはMg²⁺ 濃度を用いて行なうPCRの至適化は最小限ですみ、または不要なこともあります。 

CoralLoad PCR Buffer

HotStarTaq Plus DNA Polymeraseに付属のCoralLoad PCR BufferはQIAGEN PCR Bufferの特長をすべて備え、さらにPCR反応液を直接アガロースゲルにロードできます。 ゲルローディング用バッファーを前もって添加する必要がありません。CoralLoad PCR Bufferは従来のQIAGEN PCR Bufferと同様の高いPCR特異性をもち、反応の至適化は最小限に抑えられます。さらに、これに入っている2種類のマーカー色素（オレンジ色の色素と赤色の色素）により、DNAの移動距離の予測とアガロースゲルの泳動時間の至適化を容易に行なえます（図“ CoralLoad PCR Buffer”）。本バッファーはピペッティングの目視化を改良し、PCR産物をゲルに直接ロードすることが可能なので、簡便性が増加します。  

Q-Solution

HotStarTaq Plus DNA Polymeraseに添付されている画期的なPCR添加剤であるQ-Solution は、DNA の変性環境を改善し、増幅困難なテンプレートの増幅を可能にします。このユニークな試薬により、高度な二次構造をもつテンプレートやGC リッチなテンプレートなどにより生じる不適切なPCR 条件が改善されることがあります（図“ 増幅困難なテンプレートの増幅”）。DMSOのような汎用されているPCR添加物と異なり、Q-Solutionは一定の濃度で作用し、毒性もなく、PCR純度は保証されています。Q-Solution の添加により、PCR の信頼性は損なわれません。

HotStarTaq Plus DNA Polymeraseは以下のような増幅を含めた高度なアプリケーションをはじめ様々なアプリケーションに最適です。

• 複雑なゲノムテンプレート
• 複雑なcDNAテンプレート（例；RT-PCR）
• 低コピーのターゲット（例；シングルセルPCR）
• マルチプレックスPCR