QuickLyse Miniprep Kit

15 µgまでのシークエンシンググレードのプラスミドDNAを迅速に精製

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QuickLyse Miniprep Kit (250)

Cat. No. / ID:  27406

250 QuickLyse Spin Columns, Reagents, Buffers, Lysis and Collection Tubes (2 ml)
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¥60,500
QuickLyse Miniprep Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。

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Features

  • 迅速な1ステップの溶解操作
  • 実験操作ステップが少なく、マニュアルでの作業時間が最小限
  • 1.5~3 mlの培養液から最高15 µgのDNA
  • わずか9分で即使用可能なプラスミドDNA調製

Product Details

QuickLyse Miniprep KitはシークエンシンググレードのプラスミドDNAを迅速に精製するためにスピンカラムベースの方法を利用しています。バクテリア細胞の再懸濁、溶解、DNA結合が1種類のバッファー中で行なえるので、最小限のマニュアルでの作業時間で迅速にDNAを精製します。

Performance

QIAGEN QuickLyse Miniprep Kitは1ステップ溶解テクノロジーを用いて最高15 µgまでのプラスミドDNAを超高速で調製します。シークエンシング、制限酵素解析、クローニングのようなアプリケーションに適応する品質のDNA精製を実現します(図" 再現性ある収量")。

QuickLyse Miniprep Kitは、シークエンシング(図" 自動化シークエンシングで長い読み取り")を含む幅広いダウンストリームアプリケーションにも十分なプラスミドDNA収量を実現します。1.5 mlのバクテリア培養液から最高15 µgの高コピープラスミドDNAが得られます(図" 高品質プラスミドDNAを高収量で分離")。分離したプラスミドDNAのOD260/280比は1.7~1.9で、高感度な全てのアプリケーションに最適な品質と純度です。シークエンシングでは700塩基以上は簡単に読み取ることができます。

See figures

Principle

溶解法に3ステップを必要とする多くのプロトコールと異なり、QuickLyse Miniprep Kitは酵素処理および低浸透圧処理を組み合わせた1ステップにより、バクテリア細胞をわずか3分で溶解します。さらに、QuickLyseテクノロジーはより少ない種類のバッファーを用いて、操作を簡素化し、時間を節約します。24個のプラスミドDNAミニプレップを22分以内に調製できます。

Procedure

1種類のバッファーでバクテリア細胞の再懸濁、溶解、DNAの結合を行なえるため、最小限の作業時間で迅速なDNA精製が可能になります。3分間の溶解ステップの後、透明なライセートをQuickLyse Spin Columnに直接アプライします。カラムメンブレンに結合したプラスミドDNAを1回洗浄し、その後溶出します(フローチャート" QuickLyse操作手順")。精製したDNAは自動化シークエンシング、PCR、制限酵素解析、クローニングを含む一般的なアプリケーションに直接使用できます。
See figures

Applications

QuickLyse Miniprep Kitは、自動化シークエンシングを含む幅広いダウンストリームアプリケーションにも十分なプラスミドDNA収量を実現します。

Supporting data and figures

Specifications

FeaturesSpecifications
ApplicationsAutomated sequencing, PCR, restriction analysis, cloning etc.
Time per run or prep per run9 min
Culture volume/starting material1.5 ml culture volume
Plasmid typeHigh-copy, cosmid DNA
Elution volume50 µl
Samples per run (throughput)1–24 samples per run
TechnologyQuickLyse technology
Yieldup to 15 µg
ProcessingManual (centrifugation)

Resources

キットハンドブック (2)
MSDS (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)
Kit Handbooks (2)

FAQ

What is the largest plasmid size that can be purified using the QuickLyse Miniprep Kit?

The QuickLyse Miniprep Kit can be used for plasmids up to 9 kb in size. It is not recommended for Large-Construct purifications.

Please find an overview of additional kit options for small-scale Plasmid Purification on the QIAGEN website, or use our ProductFinder to select the right kit for your needs.

 

 

FAQ ID -1752
3311 - Can QuickLyse miniprep kits be used with QIAVac 24 Plus?
No, this is not possible since the columns do not fit properly on the QIAVac 24 Plus manifold and the vacuum is not strong enough.
What volume of bacterial culture can be processed using the QuickLyse Miniprep Kit?

Normally, 1.5 ml bacterial culture is used with the QuickLyse Miniprep Kit. Only if the OD600 is < 2.0, up to 3 ml culture may be used. Growth in LB medium is strongly recommended. Growth in nutrient-rich media, such as 2xYT, is not recommended.

 

FAQ ID -1357
How can I increase the DNA yield from low-copy plasmids using the QuickLyse Miniprep Kit?

When using the QuickLyse Miniprep Kit, the addition of 125 µl isopropanol to the lysate, prior to transferring it to the QuickLyse Spin Column, may increase plasmid DNA yield in some cases.

 

FAQ ID -1354
Can the bacterial pellet in the QuickLyse Miniprep procedure be resuspended by pipetting up and down or shortening the vortexing time?

No. Vortexing for 30 seconds as described in the QuickLyse Miniprep Handbook is absolutely critical to resuspend and lyse the bacterial cells. Failure to follow this step will result in greatly reduced DNA yields.

 

FAQ ID -1352
What is the composition of elution buffer QLE in the QuickLyse Miniprep Kit?

Elution Buffer QLE of the QuickLyse Miniprep Kit contains 10 mM Tris-Cl and 0.1 mM EDTA (pH 8.5). Due to the very low concentration of EDTA, enzymatic downstream reactions such as PCR and cycle sequencing are not inhibited.

 

FAQ ID -1356
Is it possible to elute plasmid DNA obtained with the QuickLyse Miniprep Kit in nuclease-free water?

Yes, nuclease-free water may be used for the elution of plasmid DNA purified with the QuickLyse Miniprep Kit. However, for higher DNA stability and optimal yields, it is recommend to elute using the provided elution buffer (Buffer QLE).

 

FAQ ID -1355