DNA抽出用QuickLyse Miniprep Kit

最大15 µgのシークエンシンググレードのプラスミドを迅速に精製

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✓ オンライン注文による24時間年中無休の自動処理システム

✓ 知識豊富で専門的な製品&テクニカルサポート

✓ 迅速で信頼性の高い(再)注文

QuickLyse Miniprep Kit (250)

カタログ番号 / ID.   27406

250 x QuickLyse Spin Columns、試薬、バッファー、Lysis and Collection Tubes (2 ml)
¥62,000
QuickLyse Miniprep Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。

✓ オンライン注文による24時間年中無休の自動処理システム

✓ 知識豊富で専門的な製品&テクニカルサポート

✓ 迅速で信頼性の高い(再)注文

特徴

  • 迅速な1ステップの溶解操作
  • プロトコールのステップが少なく、直接の作業時間が最小限
  • 1.5 mlの培養液から最大15 µgのDNA
  • わずか9分ですぐに使用できるプラスミドDNAを調製

製品詳細

QuickLyse Miniprep Kit は、シークエンシンググレードのプラスミドDNAを迅速に精製するために、スピンカラムベースの方法を利用しています。バクテリア細胞の再懸濁、溶解、DNA結合を単一のバッファー中で行なえるため、最小限の直接作業時間で迅速にDNAを精製します。

パフォーマンス

QuickLyse Miniprep Kitは、1ステップ溶解テクノロジーを用いて最大15 µgのプラスミドDNAを超高速で調製します。シークエンシング、制限酵素解析、クローニングのようなアプリケーションで安定した品質のDNA精製を実現します(図「 再現性ある収量」を参照)。

QuickLyse Miniprep Kitは、シークエンシング(図「 自動化シークエンシングで長い読み取り」を参照)を含む幅広いダウンストリームアプリケーションにも十分なプラスミドDNA収量を実現します。1.5 mlのバクテリア培養液から最高15 µgの高コピープラスミドDNAが得られます(図「 高品質プラスミドDNAを高収量で分離」を参照)。分離したプラスミドDNAのOD260/280比は1.7~1.9で、高感度な全てのアプリケーションに最適な品質と純度です。シークエンシングでは700塩基以上を簡単に読み取ることができます。

原理

溶解法に3ステップを必要とする多くのプロトコールと異なり、QuickLyse Miniprep Kitは、酵素処理および低浸透圧処理を組み合わせた1ステップにより、バクテリア細胞をわずか3分で溶解します。さらに、QuickLyseテクノロジーは使用するバッファー数が少なく、操作を簡素化し、時間を節約します。24個のプラスミドDNAミニプレップを22分未満で調製できます。

操作手順

1種類のバッファーでバクテリア細胞の再懸濁、溶解、DNAの結合を行なえるため、最小限の作業時間で迅速なDNA精製が可能になります。3分間の溶解ステップの後、透明な溶解物をQuickLyse Spin Columnに直接充填します。カラムメンブレンに結合したプラスミドDNAを1回洗浄し、その後溶出します(フローチャート「 QuickLyse操作手順」を参照)。精製したDNAは自動化シークエンシング、PCR、制限酵素解析、クローニングを含む標準的なアプリケーションに直接使用できます。

アプリケーション

QuickLyse Miniprep Kitは、自動化シークエンシングを含む幅広いダウンストリームアプリケーションにも十分なプラスミドDNAの収量を実現します。

裏付けデータと数値

仕様

特徴仕様
Applications自動シークエンシング、PCR、制限分析、クローニングなど
Time per run or prep per run9分
Culture volume/starting material培養液量1.5 ml
Plasmid type高コピー、コスミドDNA
Elution volume50 µl
Samples per run (throughput)ランあたり1~24サンプル
TechnologyQuickLyseテクノロジー
Yield最大15 µg
Processing手動(遠心分離)

リソース

キットハンドブック (2)
安全データシート (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)

よくある質問

Can the bacterial pellet in the QuickLyse Miniprep procedure be resuspended by pipetting up and down or shortening the vortexing time?

No. Vortexing for 30 seconds as described in the QuickLyse Miniprep Handbook is absolutely critical to resuspend and lyse the bacterial cells. Failure to follow this step will result in greatly reduced DNA yields.

 

FAQ-1352
How can I increase the DNA yield from low-copy plasmids using the QuickLyse Miniprep Kit?

When using the QuickLyse Miniprep Kit, the addition of 125 µl isopropanol to the lysate, prior to transferring it to the QuickLyse Spin Column, may increase plasmid DNA yield in some cases.

 

FAQ-1354
Is it possible to elute plasmid DNA obtained with the QuickLyse Miniprep Kit in nuclease-free water?

Yes, nuclease-free water may be used for the elution of plasmid DNA purified with the QuickLyse Miniprep Kit. However, for higher DNA stability and optimal yields, it is recommend to elute using the provided elution buffer (Buffer QLE).

 

FAQ-1355
What is the composition of elution buffer QLE in the QuickLyse Miniprep Kit?

Elution Buffer QLE of the QuickLyse Miniprep Kit contains 10 mM Tris-Cl and 0.1 mM EDTA (pH 8.5). Due to the very low concentration of EDTA, enzymatic downstream reactions such as PCR and cycle sequencing are not inhibited.

 

FAQ-1356
What volume of bacterial culture can be processed using the QuickLyse Miniprep Kit?

Normally, 1.5 ml bacterial culture is used with the QuickLyse Miniprep Kit. Only if the OD600 is < 2.0, up to 3 ml culture may be used. Growth in LB medium is strongly recommended. Growth in nutrient-rich media, such as 2xYT, is not recommended.

 

FAQ-1357
What is the largest plasmid size that can be purified using the QuickLyse Miniprep Kit?

The QuickLyse Miniprep Kit can be used for plasmids up to 9 kb in size. It is not recommended for Large-Construct purifications.

Please find an overview of additional kit options for small-scale Plasmid Purification on the QIAGEN website, or use our ProductFinder to select the right kit for your needs.

 

 

FAQ-1752
3311 - Can QuickLyse miniprep kits be used with QIAVac 24 Plus?
No, this is not possible since the columns do not fit properly on the QIAVac 24 Plus manifold and the vacuum is not strong enough.
FAQ-3311