QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit

Le QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit contient un Master Mix à la concentration 4x, prêt à l’emploi et optimisé pour les applications microfluidiques dans les QIAcuity Nanoplates. Ce kit améliore la spécificité et l’efficacité de la PCR numérique à base de sonde pour assurer l’exactitude des analyses simplex à 12-plex. Vous pouvez configurer des réactions 8-plex en utilisant six canaux QIAcuity (un dosage/canal) et deux colorants Long Stokes-Shift (LSS). Pour analyser jusqu’à 12 cibles, vous pouvez effectuer un multiplexage d’amplitude en mélangeant deux dosages différents par canal. 

Le QIAcuity High Multiplex Probe Master Mix est optimisé pour augmenter la spécificité pour une quantification précise de l’ADNg ou de l’ADNc sur les instruments de dPCR QIAcuity.

Ce kit fonctionne conjointement avec le QIAcuity Digital PCR System et les QIAcuity Nanoplates.

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La QIAcuity digital PCR platform surmonte les défis de la PCR hautement multiplexée en partie grâce à la matrice de diaphonie personnalisée du QIAcuity Software 3.0. Cette nouvelle fonction logicielle compense la diaphonie optique, ou le chevauchement des signaux, entre les canaux voisins. Grâce à la chimie spécialisée du QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit, les utilisateurs peuvent détecter des cibles dans huit canaux : six canaux optiques standard et deux canaux hybrides qui utilisent des sondes d’hydrolyse avec des colorants Long Stokes-Shift (LSS) ( figure 1).  

Le QIAcuity Software 3.1 et le QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit permettent aux utilisateurs de détecter jusqu’à 12 cibles dans six canaux ( figure 2 et  figure 3).

Grâce à un nouveau mécanisme hot start médié par anticorps, le QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit permet d’effectuer des analyses simplex ou multiplex d’ADNc ou d’ADNg avec la plus grande spécificité. Aux basses températures, la QuantiNova DNA Polymerase est conservée dans un état inactif par le QuantiNova Antibody et un nouvel additif, le QuantiNova Guard qui stabilise le complexe. Cela améliore la rigueur du hot start et prévient l’élongation de dimères d’amorces et d’amorces hybridées de façon non spécifique. Dans les 2 minutes qui suivent l’augmentation de la température à 95 °C, le QuantiNova Antibody et le QuantiNova Guard sont dénaturés et la QuantiNova DNA Polymerase est activée, permettant l’amplification par PCR.

Vous trouverez ici une description du principe de la réaction de dPCR sur nanoplaques.

Le QIAcuity High Multiplex Probe Kit contient un Master Mix de PCR prêt à l’emploi à la concentration 4x, supprimant la nécessité d’optimiser les conditions de réaction et de thermocyclage. Il vous suffit d’ajouter l’ADN matriciel et le jeu d’amorces et de sondes au Master Mix et de suivre la procédure décrite dans le protocole de démarrage rapide pour obtenir des résultats fiables sur le QIAcuity.

Le système intègre le fractionnement, le thermocyclage et l’imagerie dans un seul instrument entièrement automatisé qui permet aux utilisateurs d’obtenir des résultats en moins de 2 heures. Analysez vos résultats sur la suite logicielle, où vous pouvez trouver la concentration de votre séquence cible en copies par microlitre et obtenir des données sur les échantillons positifs ou NTC à des fins de contrôle de la qualité. Cette analyse peut être effectuée sur des ordinateurs à distance au sein du même réseau local (Local Area Network, LAN) pour plus de commodité.

Associé au QIAcuity Digital PCR System et aux QIAcuity Nanoplates, le QIAcuity High Multiplex Probe PCR Kit permet de faire l’analyse quantitative des cibles d’ADNc et d’ADNg pour une utilisation dans les applications telles que :

• La détection des mutations rares
• L’analyse des variations du nombre de copies
• Recherche microbienne, y compris la surveillance des eaux usées domestiques
• La détection des agents pathogènes
• Le génotypage
• L’analyse de l’expression génique
• La recherche sur les miARN