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QIAamp Fast DNA Tissue Kit icon_0368_ls_gen_eco_friendly-s
N.º de cat. / ID. 51404
Para 50 preparaciones: QIAamp Spin Columns, QIAGEN Proteinase K, RNase A, Tissue Disruption Tubes y Buffers
Este producto contiene sustancias reguladas por el REACH (CE 1907/2006 Anexo XIV). El uso de este producto en la UE está permitido previa exención (artículo 56 [3]). Para más información, consulte la notificación del REACH y la hoja de datos de seguridad de este producto, que encontrará en la sección “Recursos” de esta página.
El QIAamp Fast DNA Tissue Kit está concebido para su uso en aplicaciones de biología molecular. Este producto no está concebido para el diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.
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Características
- Rendimiento entre 5 y 10 veces mejor en comparación con los métodos estándar
- Reducción del tiempo de lisis de horas a solo 15 minutos
- ADN de alta integridad, idóneo para aplicaciones de PCR y NGS
- Eliminación total de inhibidores
- Extracción automatizada en QIAcube
Detalles del producto
En procesos como el genotipado y otros análisis de ADN con PCR o secuenciación de última generación (NGS), se requiere una cantidad adecuada de ADN genómico de alta calidad como material inicial. El cuello de botella más habitual en los procesos de obtención de ADN de alta calidad es la lisis de los tejidos. En los tejidos fibrosos o difíciles de lisar, se deben aplicar protocolos largos y tediosos que, a menudo, dan lugar a bajos rendimientos de ADN de baja calidad. El QIAamp Fast DNA Tissue Kit, basado en las tecnologías de QIAGEN de probada eficacia, consigue superar este cuello de botella gracias al uso de tubos de disrupción innovadores que mejoran significativamente el rendimiento y reducen el tiempo necesario hasta la obtención del resultado. El procedimiento se puede automatizar por completo en el instrumento QIAcube Connect.
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Rendimiento
El QIAamp Fast DNA Tissue Kit utiliza una novedosa combinación de lisis enzimática, química y mecánica. Cada kit incluye una serie de tubos de disrupción que contienen microesferas especiales de acero inoxidable, diseñadas con una forma exclusiva que ayuda a una disrupción del tejido más exhaustiva en comparación con otros métodos. En primer lugar, la muestra de tejido y la mezcla de reactivo se añaden a los tubos y se homogenizan con un agitador vórtex de mesa normal (con los adaptadores adecuados) o un molinillo con microesferas, como TissueLyser II o LT. A continuación, se aplica una lisis breve en el mismo tubo. Posteriormente, el ADN se extrae del lisado gracias a la tecnología de QIAamp de eficacia demostrada. El tratamiento previo reduce el tiempo de extracción de ADN total de varias horas a solo 30 minutos.
Además de reducir el tiempo total que se necesita para extraer el ADN, el paso de disrupción mecánica y el protocolo de lisis exhaustiva aumentan el rendimiento del ADN. Se han evaluado las mejoras en el rendimiento de distintos tipos de tejido con QIAxpert y un ensayo fluorométrico. Los resultados demuestran que el QIAamp Fast DNA Tissue Kit es capaz de extraer hasta 10 veces más ADN en comparación con los métodos estándar, al mismo tiempo que ofrece uno de los protocolos más rápidos.
La mayoría de las aplicaciones de NGS requieren un ADN de alto peso molecular (>10 kb) para permitir la secuenciación de tramos más largos y el montaje de estos mediante herramientas bioinformáticas. Determinados métodos de disrupción pueden fragmentar el ADN mediante cizallamiento. Esto podría afectar a los análisis anterógrados. En comparación con otros kits que muestran una alta fragmentación hasta un valor bajo de kb, el QIAamp Fast DNA Tissue Kit le permite obtener ADN de entre 25 y 50 kb, por lo que resulta idóneo para las aplicaciones de PCR y NGS.
Además de reducir el tiempo total que se necesita para extraer el ADN, el paso de disrupción mecánica y el protocolo de lisis exhaustiva aumentan el rendimiento del ADN. Se han evaluado las mejoras en el rendimiento de distintos tipos de tejido con QIAxpert y un ensayo fluorométrico. Los resultados demuestran que el QIAamp Fast DNA Tissue Kit es capaz de extraer hasta 10 veces más ADN en comparación con los métodos estándar, al mismo tiempo que ofrece uno de los protocolos más rápidos.
La mayoría de las aplicaciones de NGS requieren un ADN de alto peso molecular (>10 kb) para permitir la secuenciación de tramos más largos y el montaje de estos mediante herramientas bioinformáticas. Determinados métodos de disrupción pueden fragmentar el ADN mediante cizallamiento. Esto podría afectar a los análisis anterógrados. En comparación con otros kits que muestran una alta fragmentación hasta un valor bajo de kb, el QIAamp Fast DNA Tissue Kit le permite obtener ADN de entre 25 y 50 kb, por lo que resulta idóneo para las aplicaciones de PCR y NGS.
Principio
Las técnicas moleculares, como PCR y NGS, han desvelado detalles desconocidos hasta ahora a partir de complejas muestras experimentales. Para conseguir resultados fiables gracias a estas técnicas, es fundamental obtener una cantidad suficiente de ADN de alta calidad. Esto puede resultar complejo cuando se trabaja con tejidos fibrosos o duros, ya que el proceso de lisis es difícil, lo que afecta directamente a la cantidad de ADN que se libera. Para abordar esta dificultad, el nuevo QIAamp Fast DNA Tissue Kit combina la lisis de tejido mecánica, química y enzimática, lo que genera un rendimiento del ADN entre 5 y 10 veces mejor en comparación con los métodos estándar. El tratamiento previo reduce el tiempo de extracción de ADN total de varias horas a solo 30 minutos, por lo que, además de obtener un ADN de alta integridad, idóneo para aplicaciones de PCR y NGS, también reduce significativamente el tiempo de trabajo.
Procedimiento
El QIAamp Fast DNA Tissue Kit utiliza una combinación de lisis enzimática, química y mecánica para homogeneizar las muestras. Los Tissue Disruption Tubes incluidos contienen una microesfera diseñada con una forma especial que consigue una disrupción eficaz del tejido mediante agitación. Para homogeneizar el tejido, bastará con 5 minutos en un agitador vórtex de mesa o 30 segundos en un molinillo de microesferas de alta potencia. La química optimizada permite la homogeneización del tejido y la estabilización simultánea del ADN que se libera del tejido obtenido mediante disrupción. La mezcla de tampón de digestión contiene proteinasa K, lo que permite lisar por completo el material de la muestra mediante una breve incubación e impide que la homogeneización mecánica afecte al proceso. A continuación, el ADN genómico se purifica mediante la tecnología QIAamp de probada eficacia, dando lugar a un ADN puro que puede utilizarse para cualquier aplicación anterógrada, como PCR o secuenciación. Además, el QIAamp Fast DNA Tissue Kit puede utilizarse con QIAcube para la preparación automatizada de las muestras.
Aplicaciones
El QIAamp Fast DNA Tissue Kit proporciona ADN puro de alto rendimiento a partir de cualquier tipo de tejido y es apto para aplicaciones de PCR y NGS.
Datos y cifras de respaldo
Los inhibidores se eliminan de forma eficaz
Los controles internos se amplifican en presencia de ADN aislado de 10 mg de muestras de tejido auricular de cerdo con el QIAamp Fast DNA Tissue Kit o el QIAamp DNA Mini Kit. Cuando se añadieron 1 o 6 μl de eluido, la amplificación del control interno no se vio afectada, lo que demuestra que los eluidos no contenían inhibidores. IC: control interno.
Recursos
Brochures and Guides (4)
Kit Handbooks (1)
Protocols (2)
Scientific Posters (1)
Technical Information (2)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)
Preguntas frecuentes
Can I use blood, cells or bacteria with the QIAamp Fast DNA Tissue Kit?