Strep-tag Antibody

• Resultados excelentes en procedimientos de dot blot y western blot
• Detección extremadamente sensible y específica

El sistema de purificación por afinidad en dos pasos, que se basa en el marcador de eficacia comprobada 6xHis y el marcador corto Strep II, permite una purificación sencilla y muy eficiente de proteínas ultrapuras en un procedimiento rápido y estandarizado. Las proteínas recombinantes portadoras de ambos marcadores se purifican secuencialmente en matrices de Ni-NTA y Strep-Tactin (consulte la figura  Proteína ultrapura en dos pasos). Las dos purificaciones sencillas por afinidad proporcionan proteína ultrapura, totalmente activa, de longitud completa y adecuada para cualquier aplicación posterior.

Las proteínas recombinantes que portan dos etiquetas pequeñas de afinidad (la etiqueta 6xHis y la etiqueta Strep II) se expresan de forma eficiente en E. coli, insectos o células de mamífero utilizando vectores pQE-TriSystem His·Strep. Tras la lisis celular y la limpieza del lisado, las proteínas se purifican inicialmente utilizando un procedimiento de cromatografía por afinidad con metal inmovilizado, que se basa en la interacción de eficacia comprobada de Ni-NTA con la etiqueta 6xHis. Tras la elución de la matriz Ni-NTA con imidazol, las proteínas recombinantes (que también portan el epítopo de la etiqueta Strep II) se cargan directamente en una matriz Strep-Tactin. No se necesita ningún intercambio de tampones. La proteína se eluye desde la matriz Strep-Tactin utilizando biotina o destiobiotina. Esta purificación por afinidad en dos pasos produce proteína ultrapura (>98 % de pureza) (consulte la figura  Procedimiento de purificación por afinidad en dos pasos). El orden de las purificaciones se puede revertir (es decir, la purificación de Strep-Tactin puede realizarse antes de la purificación Ni-NTA). Las proteínas se pueden detectar con alta especificidad y sensibilidad utilizando anticuerpos monoclonales de ratón Strep-tag o Anti·His.

El sistema de purificación por afinidad en dos pasos, que utiliza el Strep-tag Antibody para la detección, es muy adecuado para las aplicaciones en las que la pureza alta es primordial o difícil de alcanzar. El procedimiento de purificación estandarizado también aumenta el rendimiento eliminando la necesidad de desarrollo y optimización de protocolos de purificación específicos de las proteínas. La pureza extremadamente alta y la practicidad proporcionadas por el sistema de purificación por afinidad en dos pasos hacen que sea el método de elección para:

• Análisis estructurales y funcionales
• Expresión en sistemas eucariotas