Anti·His HRP Conjugate Kits

Para la sensibilidad, detección directa de proteínas con marcadores His

S_1335_PROT_QXP0554

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Penta·His HRP Conjugate Kit

Cat. No. / ID:  34460

125 μl Penta·His HRP Conjugate, 5 g de reactivo de bloqueo, 50 ml de tampón de reactivo de bloqueo (concentrado 10x)
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Kit
Penta·His HRP
RGS·His HRP
Anti·His HRP Conjugate Kits están concebidos para su uso en aplicaciones de biología molecular. Estos productos no están concebidos para el diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.

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Features

  • Detección de alta sensibilidad y alta velocidad de proteínas con marcadores His, así como con epítopos RGS·His
  • No es necesario un anticuerpo secundario
  • Se suministra reactivo de bloqueo optimizado

Product Details

Los Anti·His HRP Conjugate Kits, incluido el RGS·His HRP Conjugate Kit (conjugados con marcadores His) y el Penta·His HRP Conjugate Kit (conjugados con marcadores 6xHis), están ideados para detectar de manera sensible proteínas recombinantes que porten marcadores His, sin necesidad de utilizar anticuerpos secundarios. Están compuestos por Anti·His Antibodies conjugados con peroxidasa de rábano (HRP). En procedimientos de detección, el Anti·His Antibody se une a un marcador His de la proteína y el complejo se localiza mediante sustratos de quimioluminiscencia o cromogénicos que reaccionan con HRP.

Performance

CaracterísticaRGS·His HRP Conjugate KitPenta·His HRP Conjugate Kit
DetecciónMarcadores del extremo N, el extremo C y His internos (que contienen el epítopo RGSHHHH)Marcadores del extremo N, el extremo C y 6xHis internos
Sensibilidad en dot blots*10 pg10 pg
Sensibilidad en Western blots*50 pg50 pg
Isotipo de anticuerpoIgG1 de ratónIgG1 de ratón
Reactividad cruzadaInsignificante con lisados celulares sin procesar de E. coli, levaduras, mamíferos o insectosInsignificante con lisados celulares sin procesar de E. coli, levaduras, mamíferos o insectos
FormularioSolución de partida estabilizadaSolución de partida estabilizada
Solución de trabajo125–250 ml125–250 ml

Principle

Los Anti·His HRP Conjugate Kits están compuestos por QIAexpress Anti·His Antibodies químicamente conjugados con la enzima reportera peroxidasa de rábano (HRP). Pueden utilizarse para la detección directa, altamente específica y sensible, de cualquier proteína recombinante que tenga un marcador His accesible. Eliminan la necesidad de anticuerpos secundarios, lo que ahorra tiempo en procedimientos de inmunodetección. Los Anti·His HRP Conjugate Kits se pueden utilizar con sustratos de detección quimioluminiscentes o cromogénicos.

Procedure

El Manual de uso de detección y ensayo de QIAexpress, suministrado con todos los productos de detección y ensayo QIAexpress, contiene directrices y protocolos de ejemplo detallados para diseñar y realizar ensayos.

Applications

Los Anti·His HRP Conjugate Kits, incluido el RGS·His HRP Conjugate Kit (conjugado con marcadores His) y el Penta·His HRP Conjugate Kit (conjugado con marcadores 6xHis), reconocen los mismos epítopos que su anticuerpo correspondiente y pueden utilizarse para la detección quimioluminiscente o cromogénica directa de proteínas con marcadores His en:

  • Procedimientos de Western blot, dot blot y transferencia de colonias
  • ELISA y otros procedimientos de inmunoensayo

Comparación del RGS·His HRP Conjugate Kit y el Penta·His HRP Conjugate Kit

Características RGS·His HRP Conjugate Kit Penta·His HRP Conjugate Kit
Enzima conjugada HRP HRP
Detección Anticuerpo secundario obligatorio Anticuerpo secundario obligatorio
Epítopo detectado RGSHHHH HHHHH
Sustrato para la detección de blots Biotech ECL 4C1N
Sustratos para el procedimiento de ensayo OPD OPD
Etiqueta Etiqueta His Etiqueta His

Los Anti·His HRP Conjugate Kits están concebidos para su uso en aplicaciones de biología molecular. Estos productos no están destinados para el diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.

Resources

Kit Handbooks (1)
For Anti·His Antibodies, Anti·His HRP Conjugates, Penta·His™ Alexa Fluor® Conjugates, Penta·His Biotin Conjugate, Ni-NTA Conjugates, Tag·100™ Antibody, Streptavidin–R-PE, 6xHis Protein Ladder, Ni-NTA HisSorb™ Strips and Plates 
Supplementary Protocols (1)
Certificates of Analysis (1)

FAQ

What epitopes do the Anti-His Conjugates and Anti-His Antibodies recognize?

The table below lists the epitopes recognized by the Anti-His Conjugates and Anti-His Antibodies. 'H' designates a histidine residue, while 'X' designates any amino acid other than histidine. Note that individual 6xHis-tagged proteins are often recognized better by one Anti-His Antibody than by the others, possibly because of subtle differences in the exact conformation of the 6xHis tag and other parts of the protein in the vicinity of the tag. To choose the optimal antibody for your specific 6xHis-tagged protein and application, QIAGEN offers the Anti-His Antibody Selector Kit. The kit includes 3 µg of each of the three antibodies for direct comparison and economical selection of the one that gives the best results.

Epitopes recognized by QIAexpress Anti-His HRP Conjugates and Anti-His Antibodies


Peptide Penta-His Tetra-His RGS-His
XHHHHHHX
+ +
XXHHHHHX
+ +
XHXHHHHX
+
XHHHHXHX
+
XRGSHHHHX
+ +
XRGSHHHHHHX
+ + +
XHXHHXHX

Note that the presence of specific residues N- or C-terminal to the epitope is not required.

FAQ ID -170
Which Anti-His Antibody is the most sensitive for my protein of interest?

Penta-His and Tetra-His Antibody bind to proteins that have 6xHis tags regardless of the surrounding amino-acids, even when the tag is partially hidden. Subtle differences in the antigen recognition sites of these antibodies mean that some 6xHis-tagged proteins are detected with higher sensitivity by one Anti-His Antibody than by the others (see figure below). Therefore, to achieve optimum results, we recommend comparison of these antibodies in parallel for new applications and proteins. QIAGEN offers the Anti-His Antibody Selector Kit for this purpose.


 

Sensitivity of QIAexpress Anti·His Antibodies



 

Note:  RGS His Antibody regonizes the RGS(His)4 epitope that is found on proteins endcoded by most pQE vectors as well as several pRSETan pBlue BacHis -vectors from Invitrogen.

FAQ ID -172
How can I avoid poor immunolocalization morphology with Anti-His Antibodies?
Insufficient fixation of samples leads to poor morphological preservation. If using methanol or acetone try fixation with paraformaldehyde. If 2% paraformaldehyde is insufficient, increase fixative concentration to 4% and increase incubation time. Keep in mind that too harsh fixation can lead to functional alteration of the 6xHis epitope and loss of recognition by the Anti·His Antibodies.immunofluorescence
FAQ ID -200
Can the Blocking Reagent supplied with the Penta-His HRP Conjugate be used with other antibodies?
Yes, the Blocking Reagent supplied with our Penta-His HRP Conjugate can also be used with other antibodies.
FAQ ID -1073