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QIAamp Fast DNA Tissue Kit icon_0368_ls_gen_eco_friendly-s
Kat.-Nr. / ID. 51404
Für 50 Präparationen: QIAamp Spin Columns, QIAGEN Proteinase K, RNase A, Gewebe-Aufschluss-Röhrchen, Puffer
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Dieses Produkt enthält Stoffe, die unter REACH (EG 1907/2006 Anhang XIV) geregelt sind. Die Verwendung dieses Produkts in der EU ist im Rahmen einer Ausnahmeregelung zulässig (Artikel 56(3)). Weitere Informationen finden Sie in der REACH-Meldung und im Sicherheitsdatenblatt zu diesem Produkt, die beide im Abschnitt „Ressourcen“ dieser Seite zu finden sind.
QIAamp Fast DNA Tissue Kit ist für molekularbiologische Anwendungen vorgesehen. Dieses Produkt ist nicht für die Diagnose, Prävention oder Behandlung einer Krankheit bestimmt.
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Eigenschaften
- Ausbeutesteigerung um den Faktor 5–10 gegenüber den Standardverfahren
- Reduzierung der Lysezeit von Stunden auf nur 15 Minuten
- DNA mit hoher Integrität, geeignet für PCR- und NGS-Anwendungen
- Vollständige Entfernung von Inhibitoren
- Automatisierte Extraktion auf dem QIAcube
Angaben zum Produkt
Für die Genotypisierung und andere DNA-Analysen mittels PCR oder Sequenzierung der nächsten Generation (NGS) wird eine geeignete Menge an qualitativ hochwertiger genomischer DNA als Ausgangsmaterial benötigt. Der häufigste Engpass bei der Gewinnung qualitativ hochwertiger DNA ist die Gewebelyse. Faserige oder andere schwierig zu lysierende Gewebe erfordern langwierige und aufwendige Protokolle, die häufig zu geringen Ausbeuten führen und die Qualität der DNA beeinträchtigen. Das QIAamp Fast DNA Tissue Kit, das auf bewährten QIAGEN-Technologien basiert, überwindet diesen Engpass durch den Einsatz innovativer Aufschlussröhrchen, die zu erheblich höheren Ausbeuten führen und die insgesamt benötigte Bearbeitungszeit verkürzen. Das Verfahren kann auf dem QIAcube Connect vollständig automatisiert werden.
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Leistung
Das QIAamp Fast DNA Tissue Kit verwendet eine neuartige Kombination aus mechanischer, chemischer und enzymatischer Lyse. Jedes Kit wird mit Aufschlussröhrchen geliefert, die eine spezielle Edelstahlkugel mit einer einzigartigen Form enthalten, die den Gewebeaufschluss gründlicher unterstützt als andere Methoden. Zunächst werden die Gewebeprobe und die Reagenzienmischung in die Röhrchen gegeben und mit einem handelsüblichen Tischvortexer (mit entsprechenden Adaptern) oder in einer Kugelmühle wie dem TissueLyser II oder LT homogenisiert, gefolgt von einer kurzen Lyse im selben Röhrchen. Die DNA wird dann mit der bewährten QIAamp-Technologie aus dem Lysat extrahiert. Durch die Vorbehandlung wird die Gesamtdauer der DNA-Extraktion von mehreren Stunden auf nur 30 Minuten reduziert.
Durch den mechanischen Aufschluss und das gründliche Lyseprotokoll wird nicht nur die Gesamtzeit der DNA-Extraktion verkürzt, sondern auch die DNA-Ausbeute erhöht. Verbesserungen der Ausbeute bei verschiedenen Gewebetypen wurden mit dem QIAxpert und einem fluorometrischen Assay evaluiert. Die Ergebnisse zeigen, dass das QIAamp Fast DNA Tissue Kit in der Lage ist, im Vergleich zu Standardmethoden bis zu zehnmal mehr DNA zu extrahieren, und es gleichzeitig eines der schnellsten Protokolle bietet.
Die meisten NGS-Anwendungen erfordern DNA mit hohem Molekulargewicht (>10 kb), damit größere Abschnitte sequenziert und mit bioinformatischen Tools assembliert werden können. Bei einigen Aufschlussmethoden kann die DNA durch Scherung fragmentiert werden, was die nachfolgende Analyse beeinträchtigen kann. Im Vergleich zu anderen Kits, die eine hohe Fragmentierung bis hinunter zu wenigen kb aufweisen, ermöglicht das QIAamp Fast DNA Tissue Kit die Gewinnung von DNA zwischen 25 und 50 kb und ist daher sehr gut für jede PCR- oder NGS-Anwendung geeignet.
Durch den mechanischen Aufschluss und das gründliche Lyseprotokoll wird nicht nur die Gesamtzeit der DNA-Extraktion verkürzt, sondern auch die DNA-Ausbeute erhöht. Verbesserungen der Ausbeute bei verschiedenen Gewebetypen wurden mit dem QIAxpert und einem fluorometrischen Assay evaluiert. Die Ergebnisse zeigen, dass das QIAamp Fast DNA Tissue Kit in der Lage ist, im Vergleich zu Standardmethoden bis zu zehnmal mehr DNA zu extrahieren, und es gleichzeitig eines der schnellsten Protokolle bietet.
Die meisten NGS-Anwendungen erfordern DNA mit hohem Molekulargewicht (>10 kb), damit größere Abschnitte sequenziert und mit bioinformatischen Tools assembliert werden können. Bei einigen Aufschlussmethoden kann die DNA durch Scherung fragmentiert werden, was die nachfolgende Analyse beeinträchtigen kann. Im Vergleich zu anderen Kits, die eine hohe Fragmentierung bis hinunter zu wenigen kb aufweisen, ermöglicht das QIAamp Fast DNA Tissue Kit die Gewinnung von DNA zwischen 25 und 50 kb und ist daher sehr gut für jede PCR- oder NGS-Anwendung geeignet.
Prinzip
Molekulare Techniken wie PCR und NGS enthüllen bisher unbekannte Detailinformationen aus komplexen experimentellen Proben. Um mit diesen Techniken zuverlässige Ergebnisse zu erzielen, ist es unerlässlich, ausreichende Mengen an qualitativ hochwertiger DNA zu erhalten. Dies kann bei der Arbeit mit faserigem oder hartem Gewebe eine Herausforderung darstellen, da es schwer zu lysieren ist, was sich direkt auf die Menge der freigesetzten DNA auswirkt. Unser neues QIAamp Fast DNA Tissue Kit kombiniert daher mechanische, chemische und enzymatische Gewebelyseverfahren, was die DNA-Ausbeuten im Vergleich zu Standardmethoden um das 5- bis 10-fache erhöht. Die Vorbehandlung reduziert die Gesamtdauer der DNA-Extraktion von mehreren Stunden auf nur 30 Minuten, sodass Sie nicht nur DNA mit hoher Integrität erhalten, die für PCR- und NGS-Anwendungen geeignet ist, sondern auch eine erhebliche Zeitersparnis erzielen.
Verfahren
Das QIAamp Fast DNA Tissue Kit verwendet eine Kombination aus mechanischer, chemischer und enzymatischer Lyse zur Homogenisierung der Proben. Die mitgelieferten Gewebe-Aufschluss-Röhrchen enthalten eine speziell geformte Kugel, die das Gewebe beim Schütteln effektiv aufschließt. Bereits 5 Minuten auf einem Tischvortexer oder 30 Sekunden in einer Hochleistungs-Kugelmühle reichen aus, um das Gewebe zu homogenisieren. Die optimierte Chemie ermöglicht die Homogenisierung des Gewebes und die gleichzeitige Stabilisierung der aus dem aufgeschlossenen Gewebe freigesetzten DNA. Die Aufschluss-Puffermischung enthält auch Proteinase K, die das Probenmaterial in einer kurzen anschließenden Inkubation vollständig auflöst und durch mechanische Homogenisierung nicht beeinträchtigt wird. Die genomische DNA wird anschließend mit der bewährten QIAamp-Technologie aufgereinigt und liefert so reine DNA für alle nachgelagerten Anwendungen wie PCR oder Sequenzierung. Darüber hinaus kann das QIAamp Fast DNA Tissue Kit bequem mit dem QIAcube zur automatisierten Probenvorbereitung verwendet werden.
Anwendungen
Das QIAamp Fast DNA Tissue Kit liefert hohe Ausbeuten an reiner DNA aus jedem Gewebetyp und ist für PCR- und NGS-Anwendungen geeignet.
Ergänzende Daten und Abbildungen
Inhibitoren werden effizient entfernt
Interne Kontrollen wurden in Gegenwart von DNA amplifiziert, die mit dem QIAamp Fast DNA Tissue Kit oder dem QIAamp DNA Mini Kit aus 10 mg Schweineohr-Stanzen isoliert wurde. Bei Zugabe von 1 oder 6 μl Eluat war die Amplifikation der internen Kontrolle unbeeinträchtigt, was zeigt, dass keine Inhibitoren in den Eluaten vorhanden waren. IC: Interne Kontrolle.
Ressourcen
Brochures & Guides (4)
Kit Handbooks & Protocols (2)
Scientific documents (1)
Specialized Protocols (1)
Validation & Technical Documentation (2)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)
FAQ
Can I use blood, cells or bacteria with the QIAamp Fast DNA Tissue Kit?