Strep-Tactin Superflow Plus

用于对 Strep 标签蛋白进行批量、重力流或 FPLC 纯化

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Strep-Tactin Superflow Plus (10 ml)

Cat. No. / ID:  30004

用于纯化 Strep 标签蛋白:10 ml 含 0.02% 叠氮化钠的 Strep-Tactin 结合 Superflow Plus 悬浮液 (50%)(最大压力:140 psi)
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SuspensionCartridge
Superflow Plus
Superflow Plus Cartridge
Strep-Tactin Superflow Plus 旨在用于分子生物学应用。该产品不能用于疾病诊断、预防和治疗。

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Features

  • 结合能力提高三倍(高达 9 mg/ml)
  • 从原核和真核系统中进行纯化的理想选择
  • 可在任何液相色谱系统上进行自动纯化
  • 对蛋白结构、功能和免疫原性的影响极小

Product Details

小型 Strep-tag II (WSHPQFEK) 可用于在 Strep-Tactin 树脂上对活性原生构象蛋白进行高纯度纯化。此外,它还可以与 His 标签结合使用,进行标准化的两步纯化程序。Strep-Tactin 可作为 Superflow 色谱树脂用于更大规模的纯化(高达 9 mg/ml 树脂)。此外,Strep-Tactin 树脂还提供预装试剂盒形式,用于在液相色谱系统上进行自动纯化。

Performance

Strep-Tactin Superflow Plus 可以高效纯化蛋白(见图: 使用 Strep-Tactin Superflow Plus 高效纯化 Strep 标签 GFP 在任何表达系统中高度特异性地检测 Strep 标签蛋白)。

同时,pQE TriSystem His Strep TriSystem Vectors 可用于表达带有 His 和 Strep 双标签的蛋白,这些蛋白是通过两步亲和程序纯化的。Ni-NTA 和 Strep-Tactin 顺序纯化步骤为标准化步骤,速度很快,可产出超纯蛋白。

See figures

Principle

Strep 标签蛋白以高亲和力和特异性结合 Strep-Tactin,后者是链霉亲和素的一种工程形式(见表“Strep-Tactin 基质的蛋白结合能力”)。洗涤后,使用低浓度的生物素(链霉亲和素的天然配体)或去硫生物素(一种稳定、可逆结合的生物素类似物,见图  Strep 标签蛋白与 Strep-Tactin 的结合和使用脱硫生物素的洗脱)洗脱蛋白。用小型 Strep-tag II 标签蛋白,可以高效、标准化地纯化在原核和真核系统中表达的重组蛋白,并产出高纯度蛋白。此外,在其他标记可能不适用的情况下,如 EDTA 等缓冲添加剂可能会剥离 IMAC 柱时,Strep-tag II 是首选系统。

基质 蛋白结合能力
Strep-Tactin Superflow Plus 最多 9 mg/ml
See figures

Procedure

Strep 标签蛋白使用 pQE TriSystem Vector  表达,并按照 Strep-Tactin Superflow Plus 亲和纯化程序从细胞裂解物中以很高的纯度获取。Strep 标签蛋白可采用批量或重力流方法进行纯化,也可在 FPLC 兼容柱中填充 Strep-Tactin Superflow Plus,然后在液相色谱系统上进行纯化。Strep-Tactin Superflow Plus 有 5 ml 试剂盒形式可选,用于在 FPLC、ÄkTA 和 BioLogic 系统等液相色谱系统上进行自动纯化,或使用注射器进行手动纯化。有关与 Strep-Tactin 树脂兼容的试剂,见表“与 Strep-tag Strep-Tactin 相互作用兼容的试剂”。

Strep-tag Strep-Tactin 相互作用兼容的试剂。
非离子洗涤剂 离子和齐聚物洗涤剂 还原剂 其他 
2% Triton X-100 2% 十二烷基肌氨酸钠 50 mM DTT 25% 甘油  5 M 氯化钠
2% 吐温 20 0.1% SDS     2 M 氯化铵
2% N-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷
 
1.3% N-辛基-2-羟基乙基亚砜      1 M 氯化钙 
0.2% N-壬基-β-D-吡喃葡萄糖苷 0.3% CHAPS       
2% Igepol CA-630 (Nonidet P40) 0.1% N-十二烷基-N,N-二甲胺-N-氧化物 1 M 胍    
0.12% C10E5;癸基五氧乙烯 0.034% DDAO;N-癸基-N,N-二甲胺-N-氧化物 1 mM 苯甲基磺酰氟 (PMSF)    
0.03% C10 E6   10% 乙醇    
0.005% C12 E8        
0.023% C12E9;十二烷基壬氧乙烯 (Thesit)        
0.35% DM;癸基-β-D-麦芽糖苷        
 0.007% LM;N-十二烷基-β-D-麦芽糖苷        

C 端的标签位置可确保只纯化全长蛋白。 纯化过程可重现性高,可确保每次都能制备出同样优质的蛋白。单克隆 Strep-tag 抗体用于在免疫检测程序中以高灵敏度和特异性检测 Strep 标签蛋白。

Applications

Strep-Tactin Superflow Plus 可用于以可重现的方式高效纯化 Strep 标签蛋白,效率高达每 ml 树脂可纯化 9 mg Strep 标签蛋白。纯化的蛋白可用于:

  • 功能或相互作用研究
  • 结晶筛选
  • 结构分析
  • 生成抗体

Supporting data and figures

Specifications

FeaturesSpecifications
Applications蛋白质组学
Binding capacity最多 9 mg/ml
ScaleStrep-Tactin Superflow Plus:大规模;Strep-Tactin Superflow Plus Cartridge:中等规模
TagStrep-tag
Support/matrixSuperflow Plus
Yield最多 9 mg/ml
Processing手动/自动
Start material细胞裂解物
N- or C-terminal tag两者皆可

Resources

试剂盒操作手册 (1)
安全数据表 (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
Certificates of Analysis (1)
Kit Handbooks (1)

FAQ

How often can the Strep-Tactin Superflow Plus resin be reused?
The Strep-Tactin Superflow Plus resin can be reused up to 5 times.
FAQ ID -2169
Are there any changes in the procedure using the Strep-Tactin Superflow Plus resin with the higher capacity over the standard matrix?

No, the protocols are unchanged. The higher binding capacity of Strep-Tactin Superflow Plus resin results in elution fractions with higher protein concentration, compared to standard Strep-Tactin Superflow.

 

 

 

FAQ ID -2168