DNeasy mericon Food Kit
생식 또는 가공 식품에서 고품질 DNA를 추출하는 데 사용됩니다
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DNeasy mericon Food Kit (50)
Cat. No. / ID: 69514
QIAquick Spin Columns 50개, Proteinase K, 완충액
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DNeasy mericon Food Kit는 식품, 동물 사료 및 의약품 검사의 분자생물학 응용 분야에 사용하기 위한 것입니다. 이 제품은 질병의 진단, 예방 또는 치료용이 아닙니다.
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Features
- 수정된 CTAB 절차를 통한 더욱 빠른 식품 샘플 처리
- 가공 식품에서 DNA 절편까지 효율적으로 정제
- 복잡한 식품 기질에서 PCR 억제제가 캐리오버되지 않음
- 고가공 식품을 위한 프로토콜
Product Details
DNeasy mericon Food Kit는 다양한 생식품과 가공 식품에서 고품질 핵산을 추출할 수 있도록 설계되었습니다. 이러한 복잡한 식품 기질의 PCR 억제제 캐리오버가 최소화됩니다. 이 키트는 포괄적인 QIAGEN 식품 검사 제품군의 일부를 구성하며, 병원체 및 GMO DNA 검출과 성분 인증에 필요한 분석 기능도 제공합니다. 해당 절차는 QIAcube Connect에서 완전히 자동화할 수 있습니다.
Performance
식품은 생산 과정에서 열, 방사선조사, 고압 및 pH 변화의 영향을 받아 DNA가 분해되고 단편화될 수 있습니다. DNeasy mericon Food Kit는 최적화된 화학 작용을 통해 짧은 DNA 절편(최소 100bp)을 복구하도록 개발되었습니다. 이를 통해 고도로 단편화된 DNA까지 효율적으로 분리하고 이후 PCR 반응에서 이를 증폭할 수 있습니다. 이러한 기능을 갖춘 DNeasy mericon Food Kit를 사용한 추출은 광범위하게 적용 가능한 최초의 추출 방법으로, 식품의 강력한 억제성, 고가공성, 지방, 산성, DNA 함량의 높고 낮음과 관계없이 신뢰할 수 있는 최적의 결과를 생성합니다(그림 '높은 DNA 수율 및 최소한의 억제제 캐리오버' 및 그림 '억제제에 대한 내성 강화' 참조). 또한 더 이상 다양한 식품 기질에 맞는 여러 용해 절차를 마련하지 않아도 됩니다.
Principle
DNeasy mericon Food Kit는 총세포 핵산 세틸트리메틸암모늄 브로마이드(Cetyltrimethylammonium Bromide, CTAB) 추출에 개선된 방법을 사용합니다.
비이온성 세제 CTAB은 광범위한 조직 유형에서 총세포 핵산을 효율적으로 추출하는 데 널리 사용됩니다. CTAB은 염분 조건에 따라 세포 핵산(저염 조건)과 결합하거나 다당류, 단백질, 식물 대사산물(고염 조건, 식품 용해 완충액에서 발견되는 것과 같음)과 같은 세포 억제제와 결합할 수 있습니다.
이 키트는 기존 CTAB 프로토콜보다 줄어든 워크플로우 단계로 2.5시간 내에 최대 30개의 샘플을 처리할 수 있습니다(그림 '효율적이고 신속한 DNA 추출' 참조). 이 키트를 사용한 DNA 회수율은 확실히 높고 효율적입니다.
Procedure
DNeasy mericon Food Kit에 최적화된 프로토콜은 CTAB을 Proteinase K와 함께 사용하여 먼저 치밀한 조직을 분해한 다음 단백질과 기타 세포 및 식품 유래 억제제를 동시에 침전시킵니다.
억제제는 원심분리를 통해 침전되고 추출된 DNA는 용액에 남습니다. 이어지는 클로로포름 추출에서는 침전되지 않고 남은 CTAB-단백질, CTAB-파편 또는 CTAB-다당류 복합체가 유기 클로로포름 상태로 추출되어 다른 친유성 억제제와 함께 제거됩니다. DNA가 포함되고 억제제가 상당히 제거된 수상만 추가로 처리됩니다. 이 상은 (결합 조건 조정을 위해) 결합 완충액과 혼합되고 QIAquick Spin Columns에 적용됩니다. 생성된 DNA는 다운스트림 mericon real-time PCR 분석에 즉시 사용할 수 있습니다.
Applications
DNeasy mericon Food Kit는 다양한 생식품 및 가공 식품 기질에서 DNA를 신속하게(2.5시간 내에 최대 30회 추출) 정제하면서 복잡한 식품 샘플에 내재된 PCR 억제제의 캐리오버를 최소화하도록 설계되었습니다.
Supporting data and figures
높은 수율의 DNA 및 최소한의 억제제 캐리오버.
tnrL 엽록체 tRNA 유전자 한 조각을 증폭하기 위해 DNeasy mericon Food Kit(표준 프로토콜)과 다른 세 공급업체의 제품을 사용하여 땅콩 버터와 초콜릿 샘플을 준비했습니다. (A) 평균 정량값(Cq)은 DNeasy mericon Food Kit로 준비한 샘플이 다른 공급업체에 비해 상당히 낮습니다. (B) 억제제가 없는 DNA를 사용하는 경우 이 분석에서는 샘플을 1:10으로 희석할 때 2.9-3.5 사이의 양성 Cq 변위를 제공합니다. 변위값이 낮으면 억제제가 존재함을 나타냅니다. 샘플 준비 절차에서 캐리오버된 억제제를 검사하기 위해 샘플을 1:10으로 희석하고 동일한 DNA 조각을 증폭했습니다. DNeasy mericon Food Kit를 사용하여 준비한 경우 두 식품 샘플 모두 억제제가 없었습니다. 다른 공급업체의 제품으로 준비한 샘플에서는 억제제 오염이 심한 것으로 나타났습니다.
Resources
Kit Handbooks (1)
Safety Data Sheets (1)
Brochures & Guides (3)
Certificates of Analysis (1)
FAQ
Why is my 260/280 ratio low after using the DNeasy mericon Food Kit?
Does salt concentration in the food matter when using the DNeasy mericon Food Kit?
CAn I use milk or other liquids with the DNeasy mericon Food kit? What volume would I use?
Why does the DNeasy mericon Food Kit use a QIAquick column and Buffer PB rather than a DNeasy column and Buffer AL, which might be expected since the kit isolates genomic DNA?