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miRCURY LNA Custom PCR Panel (8)
Cat. No. / ID: 339330
8 plaques identiques de 96 ou 384 puits, prêtes à l’emploi ; chaque puits contient suffisamment d’amorces pour une réaction de 10 µl ; pour la détection basée sur le SYBR® Green
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Panel
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Additional Plate
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Features
- Combinez des dosages PCR LNA vérifiés et personnalisés dans des plaques à usage unique, prêtes à l’emploi
- Personnalisation en fonction du type de plaque, de la disposition, de l’instrument PCR et de la taille du lot
- Idéal pour le profilage sensible, spécifique et reproductible des miARN d’un nombre moyen à élevé d’échantillons
- Utilisez notre nouvel outil de conception en ligne facile à utiliser
Product Details
Les miRCURY LNA miRNA Custom Panels sont des plaques de 96 et 384 puits prêtes à l’emploi contenant des miRCURY LNA miRNA PCR Assays individuels en fonction de vos besoins particuliers. Les amorces d’amplification par PCR avant et arrière sont spécifiques aux miARN et sont optimisées avec la technologie LNA, ce qui permet une quantification extrêmement sensible et spécifique des miARN avec le miRCURY LNA miRNA PCR System. Chaque puits contient suffisamment d’amorces pour une réaction de 10 µl.
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Performance
Des performances de pointe en matière de spécificité
Le miRCURY LNA miRNA PCR System est la seule plateforme de quantification des miARN présentant une spécificité absolue (voir l’étude miRQC publiée dans Nature Methods) et ont obtenu de meilleurs résultats qu’une autre plateforme miRNA qPCR à base de sonde lors des tests de spécificité (voir la figure Test de spécificité avec un système concurrent de qPCR de miARN basé sur des sondes). Cela élimine les faux positifs et garantit uniquement des signaux de miARN robustes et fiables.
Le protocole facile à suivre, d’une durée de 3 heures, vous permet d’enregistrer à la fois du temps et des efforts en laboratoire. Il suffit de diluer l’ADNc synthétisé, de le combiner avec le miRCURY LNA SYBR Green Master Mix et de l’aliquoter dans la plaque PCR, qui est alors prête à être exécutée dans votre instrument de real-time PCR. Le nombre d’étapes de pipetage est réduit au minimum, ce qui diminue les écarts techniques. Par conséquent, vous pouvez obtenir une reproductibilité extrêmement élevée d’un jour à l’autre et même d’un site à l’autre (voir les figures Excellente reproductibilité sur une base journalière et Excellente corrélation entre les sites). Une reproductibilité élevée est même possible lors du profilage d’échantillons difficiles, tels que l’ARN purifié à partir de sérum (voir la figure Excellente reproductibilité entre les réactions de RT sur l’ARN total du sérum).
See figures
Principle
Concevez vos propres plaques de 96 ou 384 puits pour la qPCR des miARN à partir d’une disposition complètement flexible et de plusieurs mises en page pratiques et prédéfinies. Placez des miRCURY LNA miRNA PCR Assays prédéfinis ou vos propres Custom miRCURY PCR Assays dans le panel à l’aide d’un configurateur de plaques en ligne intuitif et facile à utiliser. Les panels sont livrés prêts à l’emploi, avec un seul dosage par puits pour un volume de réaction de 10 µl. Il suffit d’ajouter les cDNA et miRCURY LNA SYBR Green Master Mix.
Les Custom miRNA PCR Panels sont accompagnés d’un étalonneur interplaque (IPC) prépositionné en réplicats qui permet un étalonnage optimal et une évaluation du contrôle dans le cadre d’études multiplaques. L’IPC est obligatoire, mais peut être repositionné en fonction de la disposition souhaitée de la plaque. En outre, le panel est affiché avec un ou plusieurs contrôles pré-positionnés UniSp6 RNA Spike-in (CP). Des contrôles d’ajout d’ARN peuvent être utilisés pour surveiller la synthèse de l’ADNc ou la purification de l’ARN. Le dosage UniSp6 CP peut être supprimé et remplacé par un ou des lots d’amorces miARN ou d’autres dosages de contrôle d’ajout d’ARN. Les autres contrôles d’ajout d’ARN comprennent UniSp2, UniSp4, UniSp5 et cel-miR-39-3p.
Champ opérationnel
Les panels PCR de miARN personnalisés sont disponibles en 2 formats différents :- 96 puits, prêt à l’emploi : concevez vos panels à partir de l’une des trois dispositions disponibles. Choisissez parmi notre large choix de lots d’amorces LNA miARN PCR et de lots d’amorces de gènes de référence validés expérimentalement pour la quantification des miARN chez l’homme, la souris et le rat.
- 384 puits, prêt à l’emploi : concevez vos panels à partir de l’une des quatre dispositions disponibles. Choisissez parmi notre large choix de lots d’amorces LNA miARN PCR et de lots d’amorces de gènes de référence validés expérimentalement pour la quantification des miARN chez l’homme, la souris et le rat.
Les Custom miRNA PCR Panels sont accompagnés d’un étalonneur interplaque (IPC) prépositionné en réplicats qui permet un étalonnage optimal et une évaluation du contrôle dans le cadre d’études multiplaques. L’IPC est obligatoire, mais peut être repositionné en fonction de la disposition souhaitée de la plaque. En outre, le panel est affiché avec un ou plusieurs contrôles pré-positionnés UniSp6 RNA Spike-in (CP). Des contrôles d’ajout d’ARN peuvent être utilisés pour surveiller la synthèse de l’ADNc ou la purification de l’ARN. Le dosage UniSp6 CP peut être supprimé et remplacé par un ou des lots d’amorces miARN ou d’autres dosages de contrôle d’ajout d’ARN. Les autres contrôles d’ajout d’ARN comprennent UniSp2, UniSp4, UniSp5 et cel-miR-39-3p.
Ajouter des dosages personnalisés
Il est désormais possible d’ajouter des dosages personnalisés à votre plaque personnalisée. Les dosages personnalisés sont conçus à l’aide de l’un de nos outils de conception de dosages personnalisés. Concevoir des amorces PCR renforcées par LNA pour des séquences non disponibles dans nos dosages prédéfinis, par exemple pour de nouveaux miARN identifiés par séquençage de nouvelle génération.Procedure
Le profilage de l’expression des miARN avec les miRCURY LNA miRNA PCR Panels est simple et robuste. Commencez par préparer l’ADNc à l’aide du miRCURY LNA RT Kit. Ensuite, ajoutez un pré-mélange d’ADNc, de miRCURY LNA SYBR Green PCR Master Mix et d’eau exempte de RNase à un miRCURY miRNA PCR Panel. Enfin, lancez la réaction dans un thermocycleur de real-time PCR.
Applications
Les miRCURY LNA Custom PCR Panels sont utilisés comme un élément du miRCURY LNA miRNA PCR System pour :
- Le profilage des miARN axé sur les voies et les maladies
- La découverte de biomarqueurs
Supporting data and figures
Excellente corrélation entre les sites.
Des aliquotes des mêmes ARN totaux du cœur et du foie ont été soumis à une évaluation d’expression à l’aide des miRCURY LNA miRNA PCR Panels en deux endroits différents (à des jours différents par des opérateurs différents) en utilisant différents instruments de real-time PCR LightCycler 480 de Roche. La corrélation entre les valeurs Cq moyennes (réactions RT en trois exemplaires) de tous les miARN dont les signaux sont inférieurs à 35 valeurs Cq (total de 297 points de données) est indiquée.
Resources
Safety Data Sheets (2)
Quick-Start Protocols (2)
Scientific Posters (1)
Brochures & Guides (2)
Kit Handbooks (2)
Supplementary Protocols (1)
Certificates of Analysis (1)