miRCURY LNA Probe PCR Kits

Pour une PCR de haute performance avec le miRCURY LNA miRNA Probe PCR System

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miRCURY LNA Probe PCR Kit (200)

Cat. No. / ID:  339371

Pour 200 réactions : 2X QuantiNova Probe Master Mix, 10X miRCURY Probe Univ. Primer, Rox Reference Dye, RNase-Free Water
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225,00 €
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Product
miRCURY LNA Probe PCR Kit (200)
miRCURY LNA Probe PCR Kit (800)
miRCURY LNA Probe PCR Kit (4000)

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Features

  • Optimisé et dédié aux miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assays et Panels
  • Les composants PCR courts, spécifiques aux miARN et renforcés par LNA, éliminent l’amplification non spécifique et les dimères d’amorces
  • Performance sensible et spécifique avec les dernières enzymes QuantiNova
  • Grande fiabilité de la réaction pour la configuration et l’automatisation à température ambiante
  • Comprend le miRCURY Probe PCR Universal Reverse Primer

Product Details

Les miRCURY Probe PCR Kits contiennent un mélange principal de PCR haute performance spécialement conçu pour la quantification par sonde des miARN à l’aide des miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assays et Panels. La transcriptase inverse est réalisée à l’aide miRCURY LNA RT Kit. Les miRCURY Probe PCR Kits ont été optimisés pour être utilisés avec n’importe quel thermocycleur en temps réel.

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Performance

Possibilités uniques de conception d’amorces et de sondes

Le miRCURY LNA miRNA Probe PCR System est un système révolutionnaire de détection et de quantification des miARN qui utilise la technologie LNA pour permettre de nouvelles conceptions d’amorces et de sondes qui améliorent considérablement la spécificité et la sensibilité du dosage. D’une part, les amorces et la sonde renforcées par LNA ont un Tm plus élevé, ce qui augmente la rigueur de la réaction et permet de discriminer les miARN qui diffèrent par un seul nucléotide, indépendamment de la teneur en AU. D’autre part, l’amorce directe et la sonde sont spécifiques au miARN et plus courtes que dans d’autres systèmes de détection (voir  miRCURY LNA miRNA Probe PCR System en un coup d’œil). Ainsi, la conception du dosage est plus souple et le placement intelligent des LNA améliore considérablement la spécificité et la sensibilité du dosage. En effet, le système permet de quantifier jusqu’à 1 copie d’un miARN cible sans préamplification. De plus, le flux de travail est rapide et simple, passant de l’ARN aux données en 2 heures, et la fiabilité exceptionnelle du dosage permet une configuration à température ambiante et des procédures différées pour une plus grande flexibilité et une utilisation dans l’automatisation (voir  Stabilité de la réaction et fiabilité de la configuration). Les enzymes QuantiNova garantissent des résultats hautement reproductibles entre les réplicats techniques et biologiques dès la première tentative (voir  Principe du nouveau mécanisme hot-start QuantiNova).

Rapide et facile

Le protocole facile à suivre, d’une durée de 2 heures, permet d’enregistrer des gains de temps et de main-d’œuvre. L’utilisation d’une transcription universelle et de protocoles RT-PCR optimisés simplifie grandement la procédure par rapport à d’autres solutions. De plus, l’ADNc généré lors de l’étape de RT peut être utilisé dans l’ensemble du miRCURY LNA miRNA Probe PCR System, ce qui vous permet de passer en douceur des panels aux dosages en fonction de vos besoins de recherche, et d’enregistrer des échantillons et du temps. Le nombre d’étapes de pipetage est réduit au minimum, ce qui minimise également les variations techniques. Cette procédure simplifiée, associée à une fabrication de dosages conforme aux normes ISO (voir  Grande uniformité d’un lot à l’autre), permet d’obtenir une reproductibilité extrêmement élevée d’un jour à l’autre et d’un site à l’autre.

See figures

Principle

Réactifs de haute performance pour la RT-PCR quantitative en temps réel

Le miRCURY LNA miRNA Probe PCR System permet une quantification et un profilage sensibles et spécifiques des miARN par real-time PCR. La détection est basée sur une sonde d’hydrolyse marquée par un quencher. Le système couvre toutes les étapes de la conversion des miARN en ADNc et de la détection ultérieure des miARN par qPCR. Les miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assays et Panels ont été validés à l’aide du QuantiNova Probe Master Mix ; l’utilisation d’autres réactifs pour la qPCR affectera les résultats.

RNA Spike-In Kit pour RT

Le RNA Spike-In Kit permet de contrôler la qualité des étapes d’isolation de l’ARN, de synthèse de l’ADNc et d’amplification par PCR des expériences miRCURY LNA miRNA Probe PCR. Vous pouvez ainsi identifier les échantillons de mauvaise qualité dès le début du processus et gagner du temps et d’économiser des réactifs. Le kit comprend les UniSp2, UniSp4 et UniSp5 RNA Spike-in Template Mix et le cel-miR-39-3p RNA Spike-in Template.

miRCURY LNA RT Kit

Un kit universel de transcription inverse pour deux systèmes de détection. Le miRCURY LNA RT Kit est utilisé à la fois pour le miRCURY LNA miRNA PCR System, qui utilise le SYBR® Green pour la détection, et pour le miRCURY LNA miRNA Probe PCR System, basé sur des sondes. Le kit comprend deux tampons de réaction spécifiques au système et tous les réactifs nécessaires pour réaliser une polyadénylation et une transcription inverse des miARN rapides et pratiques en une seule étape de réaction.

miRCURY Probe PCR Kit

Ce kit contient le QuantiNova Probe Master Mix à hautes performances et la miRCURY Probe PCR Universal Reverse Primer. Associée à un miRCURY LNA miRNA Probe {CR Assay ou à un miRCURY LNA miRNA Probe PCR Panel, la chimie permet la détection des miARN par real-time PCR quantitative.

miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assays

Ces dosages à base d’amorces et de sondes utilisent des sondes d’hydrolyse spécifiques des miARN et des amorces directes spécifiques des miARN conçues pour détecter les miARN matures en utilisant les informations de séquence les plus récentes de la base de données miRBase. La miRCURY Probe Universal Reverse Primer se trouve dans le miRCURY Probe PCR Kit.

miRCURY LNA miRNA Probe PCR Panels

Plaques de panel PCR à usage unique, prêtes à l’emploi, pour établir rapidement le profil des miARN matures en se concentrant sur le miARNome, des voies spécifiques, certains types d’échantillons comme le sérum/plasma, ou dans le cadre d’un panel personnalisé conçu par l’utilisateur.

GeneGlobe Data Analysis Center

Cet outil d’analyse gratuit et intuitif basé sur le Web vous guide pas à pas, via un assistant facile, dans la normalisation et l’analyse de vos données et génère des figures prêtes pour la publication.

Procedure

La première étape, la réaction de transcription inverse, est une réaction facile à réaliser, en un seul tube. L’ARN total, y compris le miARN, est utilisé comme matériel de départ et l’ADNc résultant est utilisé dans l’amplification par real-time PCR avec la sonde et l’amorce renforcées par LNA pour détecter les miARN matures. Cela permet une quantification et un profilage simples des miARN, accessibles à tout laboratoire disposant d’un thermocycleur à real-time PCR.

Applications

Les miRCURY Probe PCR Kit sont utilisés comme élément du système PCR miRCURY LNA miRNA Probe pour :

  • La détection, le profilage et la quantification de l’expression des miARN
  • Le développement de biomarqueurs de miARN – dépistage et identification
  • La régulation des miARN et l’analyse des voies
  • La détection de miARN dans des types d’échantillons complexes et dans des échantillons présentant de faibles niveaux d’expression de miARN
  • La détection des snoRNA
  • La validation du séquençage des miARN

Supporting data and figures

Resources

Quick-Start Protocols (1)
Kit Handbooks (2)
For highly sensitive, real-time RT-PCR detection of miRNAs using hydrolysis probes
For highly sensitive, ultrafast real-time RT-PCR detection of miRNAs from exosomes, serum/plasma, and other biofluids
Certificates of Analysis (1)