CAR T cell immunotherapy, chimeric antigen receptor T cell immunotherapy, proteins, cell therapy, gene therapy
Pharmaceutique et biotechnologie

Thérapie cellulaire

La thérapie cellulaire implique le transfert dans le corps du patient de cellules ayant la fonction qui convient. Les cellules sont modifiées en dehors du corps du patient avant d’y être injectées, elles peuvent provenir du patient (cellules autologues) ou d’un donneur (cellules homologues). Parmi les exemples de thérapie cellulaire, on peut citer les CAR T – Un contrôle de qualité adéquat est essentiel pour maintenir leur efficacité et leur reproductibilité.

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Thérapie CAR-T

La thérapie par lymphocytes T à récepteur antigénique chimérique (CAR-T) s’impose de plus en plus comme un traitement prometteur des cancers et des troubles immunitaires. Les lymphocytes T sont génétiquement modifiés avec des récepteurs antigéniques chimériques (CAR) qui contiennent des domaines de reconnaissance basés sur l’anticorps contre les antigènes de surface cellulaire sur le type de cellule cible.

Les lymphocytes T, et plus récemment les lymphocytes tueurs naturels, peuvent être génétiquement manipulés avec des lentivirus et des rétrovirus. Les vecteurs viraux présentent une efficacité de transduction élevée, mais ils présentent aussi une immunogénicité et une toxicité cellulaire.

CAR T cell immunotherapy, chimeric antigen receptor T cell immunotherapy
Pipetting artus cleanroom, manufacturing of an artus mastermix

Développement des CAR-T

La recherche actuelle se concentre sur l’édition par CRISPR pour obtenir des produits de lymphocytes T à récepteur antigénique chimérique (CAR-T) reproductibles, sûrs et efficaces. Le processus de fabrication actuel des CAR-T nécessite un équipement dédié et une grande expertise technique, il y a donc urgence à développer une approche sûre, mais simple de développement des CAR T. Une approche alternative pourrait être la reprogrammation in vivo des CAR-T à l’aide de la nanotechnologie pour encapsuler les plasmides d’expression des CAR. Les vecteurs viraux tels que les lentivirus ont également été testés pour la génération in vivo de CAR-T.

Nous proposons des produits destinés à la quantification des titres viraux et des vecteurs viraux, à la détection de l’ADN résiduel de cellule hôte ainsi que des solutions pour l’édition par CRISPR pour la conception des CAR-T.

Production de lentivirus

L’une des méthodes de transfert de gènes les plus polyvalentes pour les thérapies par lymphocytes T utilise des vecteurs lentiviraux recombinants, car ils sont capables de transférer à la fois des cellules divisibles et non divisibles. Les thérapies cellulaires efficaces et reproductibles requièrent des méthodes sensibles et précises de contrôle qualité de la production de lentivirus. La quantification classique d’acides nucléiques par qPCR peut être affectée par les inhibiteurs de PCR et nécessite en plus un étalon de référence pour la quantification. À l’inverse, le QIAcuity Digital PCR System permet une quantification absolue, rapide et reproductible des vecteurs viraux et du titre viral sans étalon de référence, cela garantit la qualité et la reproductibilité de la recherche sur la thérapie cellulaire. Cette technologie présente en outre une tolérance aux inhibiteurs supérieure à la qPCR.

Cignal, lentivirus
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Références

Lindsey A. Murphy et al. (2022). Digital polymerase chain reaction strategies for accurate and precise detection of vector copy number in chimeric antigen receptor T-cell products. Cytotherapy.https://doi.org/10.1016/j.jcyt.2022.09.004

Lindsey A. Murphy et al. (2021). Detection of Vector Copy Number in Bicistronic CD19xCD22 CAR T Cell Products with Digital PCR. Blood. 138 (1): 4001.https://doi.org/10.1182/blood-2021-153889