N.º de cat. / ID. 338300
Los ensayos diseñados por expertos le permiten descubrir todo el potencial de la dPCR para responder mejor a sus preguntas biológicas específicas. Asóciese con QIAGEN para diseñar, ejecutar y, de manera opcional, verificar sus resultados, aprovechando nuestra experiencia en el diseño de ensayos personalizados.
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La dPCR aumenta la sensibilidad en la detección y la cuantificación de eventos y variantes de secuencia poco frecuentes al crear una partición que aumenta la concentración de la diana específica. Por ejemplo, se puede detectar una mutación presente en el 0,1 % en un entorno de ADN genómico nativo mediante dPCR. La amplificación y detección de punto final por encima del ruido, con una calificación del blanco positiva/negativa binaria permite una cuantificación precisa, que es independiente del rendimiento de amplificación (afectado, por ejemplo, por los inhibidores de PCR).
En función de sus necesidades, los Custom dPCR LNA Assays están diseñados para actuar en una configuración simple o múltiple mediante un enfoque basado en una sonda o en EvaGreen y un cebador. La PCR digital proporciona el método más sensible y fiable para detectar eventos poco frecuentes sobre el fondo. Los Custom dPCR LNA Assays usan cebadores y sondas mejorados con LNA, que aumentan la especificidad y la sensibilidad del ensayo, lo que permite detectar, por ejemplo, una mutación presente en el 0,1 % en un entorno de ADN genómico nativo en un solo pocillo de nanoplaca.
Para preparar su experimento de dPCR, añada una alícuota de la muestra de ADN genómico (aislado de las muestras nuevas, congeladas o fijadas) a la mezcla maestra incluida en el QIAcuity Probe PCR Kit o el QIAcuity EG PCR Kit, junto con su Custom dPCR LNA Assay. Cada reacción se analiza en uno o varios pocillos de una QIAcuity Nanoplate.
Tras cargar y sellar la nanoplaca, seleccione el programa de termociclado recomendado en el instrumento QIAcuity. Una vez finalizada la dPCR, se muestra el número de copias/µl de cada una de las secuencias diana en el QIAcuity Software Suite. Puede encontrar más información en el Protocolo de inicio rápido del Custom dPCR LNA Assay.