QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit

Überlegene Ausbeuten für beste Sensitivität in nachgelagerten Applikationen
Das verbesserte QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit-Protokoll gewährleistet höchste Ausbeuten aus Stuhlproben in kürzerer Zeit als mit herkömmlichen Methoden. Außerdem werden keine gefährlichen organischen Chemikalien verwendet, was die Sicherheit im Labor und für das Personal erhöht. Typische mit dem QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit erzielte DNA-Ausbeuten liegen bei 5–50 µg, was konsistent höher als die Ausbeuten mit vergleichbaren Aufreinigungs-Kits von alternativen Anbietern ist (siehe Abbildung  Überlegene Ausbeuten im Vergleich zu ähnlichen Aufreinigungs-Kits).
Die mit dem QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit aufgereinigte DNA erzielt in nachgelagerten quantitativen Real-time PCRs hochsensitive Ergebnisse mit konsistent niedrigeren C_T-Werten, als sie mit Lösungen von anderen Anbietern erreicht werden (siehe Abbildung  Höhere Sensitivität in der qPCR).
Effektive Entfernung von Inhibitoren
Stuhlproben sind reich an PCR-Inhibitoren wie komplexen Polysacchariden, Gallensalzen, Lipiden und Urat. Im besten Fall erschweren diese Inhibitoren die Amplifikation der Targets. Im schlimmsten Fall kann ihre Anwesenheit PCR-Signale vollständig unterdrücken. Daher ist eine Methode zur vollständigen Entfernung solcher Inhibitoren für jede Stuhlprobenanalyse von entscheidender Bedeutung. Der neuartige InhibitEx Buffer des QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit entfernt PCR-Inhibitoren effizient aus der Probe und ermöglicht so den zuverlässigen Nachweis von DNA (siehe Abbildung  Effiziente Depletion von PCR-Inhibitoren).

Die DNA bindet spezifisch an die QIAamp Silikagelmembran, während Verunreinigungen durchlaufen. Es ist keine Phenol-Chloroform-Extraktion erforderlich. PCR-Inhibitoren werden durch die speziell formulierte Chemie des InhibitEX Buffer von der DNA abgetrennt. In nur 25 Minuten wird hochreine DNA aufgereinigt, die direkt gebrauchsfertig für nachgelagerte Applikationen ist. Die QIAamp-Probenvorbereitungstechnologie ist vollständig lizenziert.

Das QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit erleichtert die Isolierung von DNA aus Stuhl durch ein schnelles Spin-Säulen-Verfahren (siehe Flussdiagramm  Optimiertes QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit-Verfahren) und optimierte Protokolle, und reduziert die benötigte Gesamtzeit von der Probe zur isolierten DNA auf nur 25 Minuten.
Die einzigartige Formulierung des InhibitEX Buffer trennt auf effiziente Weise PCR-Inhibitoren von der DNA ab und ist durch sein flüssiges Format praktischer in der Anwendung als Tabletten oder Pulver. Die manuelle Probenhandhabung wird optimiert, da eine separate Zugabe von Reagenzien zur Inhibitorentfernung nicht mehr erforderlich ist und Experimente sich einfacher skalieren lassen. Das QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit kann auf Geräten wie dem QIAcube automatisiert werden.
Schnelle Protokolle zur effizienten Isolierung von humaner DNA sowie mikrobieller DNA für den Pathogennachweis werden bereitgestellt. Kurz gesagt wird dabei der Stuhl in InhibitEX Buffer suspendiert, der Inhibitoren von der DNA abtrennt. Nach einer kurzen Lyse bindet die DNA an die QIAamp Silikamembran. Alle verbleibenden Inhibitoren und Verunreinigungen werden durch Waschschritte entfernt, und reine, intakte DNA wird von der Säule eluiert.

Das QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit dient zur Isolierung von genomischer DNA (human und bakteriell) aus frischen oder gefrorenen Stuhlproben.