Digital PCR
数字 PCR

PCR 领域中的全新绝对定量技术 – 数字 PCR

发现 – 数字 PCR (dPCR)

数字 PCR 的威力–大海捞针

数字 PCR (dPCR) 是一种将样本微分化成多个单独的反应，从而让每个反应中存在零个、一个或多个目标分子的技术。这种方法使得在强阴性背景下检测单个阳性样本这种典型的大海捞针问题变得异常容易解决。这种情况需要更低的检测限，因而标准的定量 real-time PCR 方法不再可行。

数字 PCR 的决定性特征是核酸的绝对定量。微分化后，反应经历终点 PCR 扩增，并分析微分区存在荧光信号（阳性反应）还是不存在荧光信号（阴性反应）。根据这一信息，可以计算出样本中存在的分子的绝对数量。与 qPCR 不同，dPCR 不依赖于标准曲线。因此，与 qPCR 相比，dPCR 的检测限更低，精度更高。

研究人员越来越多地将数字 PCR 用于敏感应用，如拷贝数变异分析、基因表达定量和罕见靶标检测。这种方法有助于推动细胞和基因治疗研究、癌症研究、传染病监测、食品检测以及许多其他领域的发展。

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与微滴数字 PCR 相比的优越性

这项基于纳米微孔板的技术与微滴式数字 PCR ( ddPCR) 相比具有更显著的优势。具体包括：

• 固定的反应分区可防止出现大小和聚合性差异
• 纳米微孔板经过密封，可防止孔间交叉污染
• 可同时读取样本的所有反应分区，读板更快
• 像 qPCR 一样具有用户友好性和移液便利性
• 纳米微孔板可适用于前端自动化

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参考文献

Huggett JF et al.(2013).The digital MIQE guidelines: Minimum Information for Publication of Quantitative Digital PCR Experiments.Clin Chem.59(6):892-902.

dMIQE Group, Huggett JF.(2020).The Digital MIQE Guidelines Update: Minimum Information for Publication of Quantitative Digital PCR Experiments for 2020.Clin Chem.66(8):1012-1029.

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