miRNeasy Micro Kit

miRNeasy Micro Kitは少量の組織および細胞サンプルから効率的にRNAを精製します（図“少数細胞からmiRNAの再現性のある高い回収” ）。また、溶解困難な組織を含む様々な組織および細胞からもRNAを精製できます。

miRNeasy Kits を用いて調製した RNA は高純度で、感度の高いダウン ストリームアプリケーションに直ぐに使用できます。miRNeasy法は、続いて行なう分析に悪影響を及ぼす塩やフェノールが混入する可能性を最小限に抑えることができます。miRNeasy Micro Kitは高純度な RNA 精製だけではな く、フェノールによる抽出および沈殿などの他のmiRNA精製法よりも高い収量を実現します。

miRNeasy Micro Kitは、少量の培養細胞（最高1 x 10⁶ 個の細胞）および様々な動物およびヒト組織（最高5 mgの組織）から、 miRNAやその他の小分子RNAを含むトータルRNA精製用にデザインされています。本キットは、フェノール／グアニジンをベースにしたサンプル溶解法とシリカゲルメンブレンによるトータルRNAの精製を組み合わせています。

キットに入っているQIAzol Lysis Reagentはフェノールとグアニジンチオシアネートの混合溶液で、組織の溶解を容易にし、RNaseを阻害し、また有機溶媒抽出によりほとんどの細胞のDNAとタンパク質をライセートから除去するようにデザインされています。QIAzol Lysis Reagentでのサンプルのホモジナイゼーション後、クロロホルムを添加、遠心操作後RNAが上部の水層に含まれます。水層を採取し、RNAをRNeasy MinElute Spin Columnで精製し、夾雑物を洗い流します。RNeasy MinElute Spin Columnのユニークなデザインにより最少溶出容量はわずか10 µlで、RNAを濃縮します。

miRNeasy Micro Kit は約18ヌクレオチド（nt） 以上のRNAを含むトータルRNAの精製を実現します。また、miRNA濃縮画分とトータルRNA（>200 nt） 画分を別々に分離精製することもできます（フローチャート“miRNeasy 操作手順”）。miRNAを含むトータルRNAは、リアルタイムRT-PCRによるmiRNA定量に最適です。別画分でsmall RNAを濃縮することは、mRNAとrRNAがバックグランドの増加につながる可能性がある特定のアプリケーションでは有利といえます。

QIAcube上でmiRNA自動精製

層分離後に水層からmiRNAを含むトータルRNAの完全自動精製がQIAcube上で可能です（図“ 少数細胞からmiRNAの再現性のある高い回収”）​​。革新的なQIAcubeはQIAGENスピンカラムを操作するために高度なテクノロジーを駆使しており、ロースループットサンプルの自動調製を、ラボにおける様々な実験操作ステップでスムーズに取り込むことができます。 QIAcube を用いたサンプル調製はマニュアル操作と同じプロセス （例えば、溶解、結合、洗浄、溶出） で行なわれるため、高品質RNAの精製にお手持ちのmiRNeasy Micro Kit を使用することができます。

miRNeasy Micro Kit は以下のような様々なアプリケーションに使用するmiRNAを含むトータルRNA精製を実現します。

ノーザンブロット解析

リアルタイム定量RT-PCR（例、miScript PCR System使用）

マイクロアレイ解析