QIAquick 96 PCR Purification Kits

最高10 μgのPCR産物(100 bp~10 kb)96個の精製用

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QIAquick 96 PCR Purification Kit (4)

Cat. No. / ID:  28181

For purification of 4 x 96 PCR reactions: 4 QIAquick 96 Plates, Buffers, Collection Microtubes (1.2 ml), Caps
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¥143,000
Kit
QIAquick 96 PCR Purification Kit
QIAquick 96 PCR BioRobot Kit
Preparations
4
24

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Features

  • 即使用可能なDNAの回収率が最高95%
  • 迅速で簡便な操作
  • 簡単な3ステップで最大10 kbまでのDNAをクリーンアップ

Product Details

QIAquick 96 PCR Kitsは96ウェルプレート、バッファー、コレクションチューブで構成され、シリカメンブレンによりPCR 産物(100 bp以上)のハイスループット精製を実現します。10 kbまでのDNAを簡便で迅速な結合-洗浄-溶出ステップおよび60~80 μlの溶出液により精製できます(得られるDNA溶出液は40~60 μl)。本クリーンアップ操作はQIAquick 96 PCR BioRobot Kitを用いてBioRobotワークステーションで完全自動化が可能です。

Performance

QIAquick 96 PCR Kitsは、最高90%の回収率でPCRサンプルをハイスループットに精製する迅速かつ簡便な方法です。本キットはQIAquick 96操作によって、様々なダウンストリームアプリケーションに適する高純度なDNAが得られます(図" 正確なシークエンシング")。QIAvac 96を使用することにより、100 bp~10 kbのDNAフラグメントが、 1~4 x 96 個のサンプルから精製できます。
See figures

Principle

QIAquick 96 Kitsでは、高塩濃度バッファーによりDNAを結合し、低塩濃度バッファーあるいは水によりDNAを溶出するシリカメンブレンを利用しています。この精製法でDNAサンプルからプライマー、ヌクレオチド、酵素、ミネラルオイル、塩、アガロース、臭化エチジウム、およびその他の夾雑物が除去できます。シリカメンブレンテクノロジーにより樹脂漏れ、および懸濁液関連の問題や不便さは解消されます。それぞれの用途に応じて至適化された結合バッファーにより、種々の大きさのDNAフラグメントを選択的に吸着します。

QIAquick 96操作法は、96個までのPCRサンプルをQIAvac 96を用いた吸引法で効率的に精製します 。

また、QIAquick 96 PCR BioRobot Kit は、BioRobot 9600(販売終了)、BioRobot 3000(販売終了)およびBioRobot 8000での使用に最適化された特別なキットフォーマットです。本キットは、96個までのPCRサンプルの自動化ハイスループット・クリーンアップのために必要なすべてのバッファーとプラスチック容器が含まれたQIAquick 96モジュールとなっています。

Procedure

QIAquickシステムでは結合-洗浄-溶出という簡単な操作だけでDNAのクリーンアップが可能です(フローチャート" QIAquick 96操作手順"参照)。結合バッファーをPCRサンプルあるいは他の酵素反応液に直接添加し、混合液を96ウェルプレートにアプライします。DNAは添付のバッファー中の高塩濃度の条件下でシリカゲルメンブレンに吸着します。不純物は洗い流され、純粋なDNAを添付の低塩濃度溶出バッファー、あるいは水で溶出します。 得られたDNAは、様々なアプリケーションに即使用可能です。

操作法

QIAquickマルチウェルモジュール では、QIAvac装置を用いた吸引操作で精製を行なえます。QIAquick 96 PCR Purification Kits では、QIAvac 96吸引マニホールド(Cat. no. 9014579)を使用する必要があります。本クリーンアップ操作はQIAquick 96 PCR BioRobot Kitを用いてBioRobotワークステーションで完全自動化が可能です。

See figures

Applications

MinEluteまたはQIAquickシステムで精製したDNAフラグメントは、シークエンシング、マイクロアレイ解析、ライゲーション、トランスフォーメーション、制限酵素解析、標識反応、マイクロインジェクション、PCR、in vitro転写反応などのアプリケーションに即使用可能です。

Supporting data and figures

Resources

クイックスタートプロトコール (1)
Technical Information and Important Notes (1)
キットハンドブック (1)
For rapid purification of multiple PCR products 
MSDS (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
Certificates of Analysis (1)
Kit Handbooks (1)
For rapid purification of multiple PCR products 
Quick-Start Protocols (1)

Publications

Temporal and differential gene expression of Singapore grouper iridovirus.
Chen LM; Wang F; Song W; Hew CL;
J Gen Virol; 2006; 87 (Pt 10):2907-2915 2006 Oct PMID:16963749
Comparative genomics of host-specific virulence in Pseudomonas syringae.
Sarkar SF; Gordon JS; Martin GB; Guttman DS;
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cDNA microarrays as a tool for identification of biomineralization proteins in the coccolithophorid Emiliania huxleyi (Haptophyta).
Quinn P; Bowers RM; Zhang X; Wahlund TM; Fanelli MA; Olszova D; Read BA;
Appl Environ Microbiol; 2006; 72 (8):5512-26 2006 Aug PMID:16885305
Characterization of the vernalization response in Lolium perenne by a cDNA microarray approach.
Ciannamea S; Busscher-Lange J; de Folter S; Angenent GC; Immink RG;
Plant Cell Physiol; 2006; 47 (4):481-92 2006 Jan 31 PMID:16449231
Anti-inflammatory activity in vitro and in vivo of the protein farnesyltransferase inhibitor tipifarnib.
Xue X; Lai KT; Huang JF; Gu Y; Karlsson L; Fourie A;
J Pharmacol Exp Ther; 2005; 317 (1):53-60 2005 Dec 13 PMID:16352705

FAQ

I bound an 11 kb DNA fragment to a QIAquick column; is it completely lost?

Larger DNA fragments bind more tightly to the QIAquick columns. It is difficult to predict whether a DNA fragment larger than 10 kb can be efficiently recovered, because this depends on base composition as well as fragment size. If the fragment is only a few kb larger than the 10 kb limit, it can be helpful to heat the elution buffer EB to 60°C and let it incubate on the column for a few minutes before centrifuging. However, please note that it will become less likely to recover your sample the larger the fragment size is. As we cannot guarantee recovery of fragments larger than the maximum cutoff size, we do not recommend to purify such fragments using QIAquick Kits.

The QIAEX II Kit can be used to extract DNA fragments up to 50 kb from agarose or polyacrylamide gels.

 

FAQ ID -756
How can I improve recoveries when using the QIAquick Kits?

Buffer PE did not contain ethanol

Ethanol must be added to Buffer PE (concentrate) before use. Repeat procedure with correctly prepared Buffer PE.

Inappropriate elution buffer

DNA will only be eluted efficiently in the presence of low-salt buffer (e.g., Buffer EB: 10 mM Tris·Cl, pH 8.5) or water. Elution efficiency is strongly dependent on the salt concentration and pH of the elution buffer. Contrary to adsorption, elution is most efficient under basic conditions and low salt concentrations. DNA is eluted with 50 or 30 µl of the provided Buffer EB (10 mM Tris·Cl, pH 8.5), or water. The maximum elution efficiency is achieved between pH 7.0 and 8.5. When using water to elute, make sure that the pH is within this range. In addition, DNA must be stored at –20°C when eluted with water since DNA may degrade in the absence of a buffering agent. Elution with TE (10 mM Tris·Cl, 1 mM EDTA, pH 8.0) is possible, but not recommended because EDTA may inhibit subsequent enzymatic reactions.

Elution buffer incorrectly dispensed

Add elution buffer to the center of the QIAquick membrane to ensure that the buffer completely covers the membrane. This is particularly important when using small elution volumes (30 µl).

FAQ ID -180
Can I use a centrifuge instead of vacuum when using the QIAquick 96 PCR Purification Kit?
Yes, you can use a QIAGEN Centrifuge with the QIAquick 96 PCR Purification Kit. Follow the Supplementary Protocol 'Spin procedure for purifying 2 x 96 PCR samples using the Plate Rotor 2 x 96, a special centrifuge, and the QIAquick 96 PCR Purification Kit.' Here's the link to the protocol.
FAQ ID -293
Do you have a protocol for purifying 2x96 PCR samples simultaneously with the QIAquick 96 PCR Purification Kit?

Yes, please follow the Supplementary Protocol 'Spin procedure for purifying the 2x96 PCR samples using the Plate Rotor 2x96, a special centrifuge and the QIAquick 96 PCR Purification Kit' (QQ01).  Please contact your local QIAGEN Technical Service for this protocol.

The protocol is for use with QIAGEN Centrifuges and the Plate Rotor 2 x 96.

FAQ ID -935
Do I have to remove the oil from my PCR reaction before using the QIAquick or MinElute PCR Purification Kit?
No - mineral oil will not affect the clean-up procedure with the QIAquick or MinElute PCR Purification Kit.
FAQ ID -575
Do you have protocols for multiple extractions of DNA fragments from agarose gels?

Yes, please follow the Supplementary Protocols 'High-throughput gel extractions using the QIAquick 96 PCR Purification Kit' (QQ03).  Please contact your local QIAGEN Technical Service for this protocol.

FAQ ID -944
Why does my DNA sample float out of the slot when loading it onto an agarose gel?

DNA fragments purified with the QIAGEN DNA Cleanup Systems, i.e., the QIAquick PCR Purification Kit, the MinElute Reaction Cleanup Kit, the QIAEX II Gel Extraction Kit etc. may float out of the loading wells of agarose gels due to residual ethanol carried over from the wash step with Buffer PE (despite the addtition of glycerol-containing loading buffer).

Use either of the following options to remove residual ethanol from the eluate:

  • re-purify the sample using a QIAquick-, or MinElute column, or QIAEX II resin
  • incubate the eluate at 56°C for 10 min to evaporate the ethanol
  • dry down the sample in a vacuum centrifuge, and resuspend the pellet in a small volume of sterile water
FAQ ID -205