Anticorps Strep-tag

Pour la détection hautement sensible et spécifique des protéines marquées à la streptavidine

S_1151_8_Strep_tagAntibody

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Strep-tag Antibody (100 μg)

Cat. No. / ID:  34850

Anticorps monoclonal de souris capable de reconnaître l’épitope Strep-tag II ; lyophilisé, pour 1 000 ml de solution préparée
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631,00 €
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Le Anticorps Strep-tag est destiné aux applications de biologie moléculaire. Ce produit n’est pas conçu pour le diagnostic, la prévention ou le traitement des maladies.

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Features

  • Excellents résultats dans les procédures de transfert en point et transfert de western
  • Détection hautement sensible et spécifique

Product Details

Des anticorps monoclonaux de souris Strep-tag sont utilisés pour détecter les protéines recombinantes qui contiennent l’épitope d’étiquette d’affinité Strep-tag court avec une spécificité et une sensibilité élevées. Comme tous les anticorps monoclonaux de souris QIAGEN, ils sont préparés sans sérum, ce qui garantit l’absence de virus, de mycoplasme et d’immunoglobulines contaminantes.

Performance

L’anticorps Strep-tag permet une détection hautement sensible des protéines (voir les illustrations  Détection hautement sensible des protéines contenant un Strep-tag et  Protéine infiniment pure en deux étapes)
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Principle

Le système de purification par affinité en deux étapes, basé sur le 6xHis-tag et le Strep-tag II court éprouvés, permet une purification simple et très performante des protéines infiniment pures dans une procédure rapide et standardisée. Les protéines recombinantes contenant les deux étiquettes sont purifiées à la suite sur des matrices Ni-NTA et Strep-Tactin (voir l’illustration  Protéine infiniment pure en deux étapes). Les deux purifications par affinité simples donnent une protéine de pleine longueur parfaitement active et infiniment pure adaptée à toutes les applications en aval.

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Procedure

Les protéines recombinantes qui contiennent deux petites étiquettes d’affinité (le 6xHis-tag et le Strep-tag II) sont correctement exprimées dans les cellules d’E. coli, des insectes ou des mammifères à l’aide des pQE-TriSystem His Strep Vectors. Après la lyse cellulaire et la clarification du lysat, les protéines sont d’abord purifiées suivant une procédure de chromatographie d’affinité sur ions métalliques immobilisés (IMAC) qui est basée sur l’interaction éprouvée 6xHis-tag-Ni-NTA. Après l’élution à partir de la matrice Ni-NTA avec l’imidazole, les protéines recombinantes (qui contiennent aussi l’épitope Strep-tag II) sont chargées directement sur une matrice Strep-Tactin. Aucun échange de tampon n’est nécessaire. La protéine est éluée à partir de la matrice Strep-Tactin avec de la biotine ou de la desthiobiotine. Cette purification par affinité en deux étapes donne une protéine infiniment pure (> 98 %) (voir l’illustration  Procédure de purification par affinité en deux étapes). L’ordre des purifications peut être inversé (autrement dit purification Strep-Tactin puis Ni-NTA). Les protéines peuvent être détectées avec une spécificité et une sensibilité élevées à l’aide d’anticorps monoclonaux de souris Strep-tag ou anti-His.

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Applications

Le système de purification par affinité en deux étapes, avec l’anticorps Strep-tag pour la détection, est parfaitement adapté aux applications dans lesquelles la grande pureté est rare ou difficile à obtenir. La procédure de purification standardisée accroît également le rendement, car il n’est plus nécessaire de développer et optimiser un protocole de purification propre à la protéine. Pratique et offrant une très grande pureté, le système de purification par affinité en deux étapes est la méthode idéale pour :

  • Analyse des structures et des fonctionnements
  • Expression dans les systèmes eucaryotes

Supporting data and figures

Specifications

FeaturesSpecifications
ApplicationsTransfert de western, transfert en point, ELISA, immunoprécipitation, immunohistochimie
DetectionAnticorps secondaire nécessaire
Sensitivity in Western blots (chemiluminescent detection)1 ng
Substrate for blot detectionSelon l’anticorps secondaire
Substrates for assay procedureSelon l’anticorps secondaire
TagStrep-tag
Epitope detectedSAWSHPQFEK

Resources

Kit Handbooks (1)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)

FAQ

What is the basic technology behind the Strep-tag Protein Purification System?

The basic technology behind the Strep-tag System is a Two-Step Affinity Protein Purification using sequential purification of recombinant proteins carrying two affinity tags. Proteins that carry these two small tags (the 6xHis tag and the 8 amino acid containing Strep-tag) are efficiently expressed in E. coli, insect, or mammalian cells using pQE-TriSystem His·Strep vectors. After cell lysis and clearing of the lysate, proteins are initially purified by a procedure based on the proven 6xHis-tag-Ni-NTA interaction. After elution from the Ni-NTA matrix using imidazole, recombinant proteins (which also carry the Strep-tag epitope) are loaded directly onto a Strep-Tactin matrix (Strep-Tactin SuperFlow or Strep-Tactin Magnetic Beads). Protein is eluted from the Strep-Tactin matrix using either biotin or desthiobiotin. This two-step affinity purification delivers ultrapure (>98% pure) protein. The order of purifications can also be reversed (i.e., Strep-Tactin followed by Ni-NTA purification). Since purification is done under native conditions, the Two-Step Affinity Purification System can be beneficial for highly demanding applications (i.e., crystallization studies).

 

FAQ ID -740
What is the concentration of SureENTRY Transduction Reagent?
The concentration of SureENTRY Transduction Reagent is 10 mg/ml.
FAQ ID - 3708