N-Terminus pQE Vector Set
Pour l’expression de haut niveau des protéines marquées à l’histidine sur l’extrémité N-terminale
Pour l’expression de haut niveau des protéines marquées à l’histidine sur l’extrémité N-terminale
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Cat. No. / ID: 32915
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Ce kit contient 5 vecteurs (pQE-9, pQE-30, pQE-31, pQE-32 et pQE-40) pour l’expression des protéines marquées à l’histidine sur l’extrémité N-terminale. pQE-30, pQE-31 et pQE-32 présentent le site de clonage multiple (MCS) dans les trois cadres de lecture tandis que pQE-9 présente un autre site de clonage multiple, plus court. pQE-40 est conçu pour l’expression des protéines de fusion DHFR, il est recommandé pour l’expression des protéines faiblement exprimées ou des peptides courts, qui sont souvent sujets à la protéolyse, car la DHFR améliore à la fois la stabilité et l’antigénicité. Dans la mesure où la DHFR ne présente en soi que peu d’immunogénicité chez la souris et le rat, les protéines de fusion DHFR sont idéales pour le criblage des épitopes.
Élément | Description |
Élément promoteur/opérateur optimisé | Comprend le promoteur du phage T5 et deux séquences d’opérateurs lac, qui accroissent la probabilité d’une liaison du répresseur lac et assurent une répression performante du promoteur T5 fort |
Site de liaison du ribosome synthétique RBSII | Pour une traduction performante |
Séquence codante du marqueur 6xHis-tag | 5' ou 3' vers le site de clonage multiple |
Codons stop de traduction | Dans tous les cadres de lecture pour une préparation pratique des constructions d’expression |
Deux terminateurs de transcription forts | t0 à partir du phage lambda, et T1 à partir de l’opéron rrnB d’E. coli, pour empêcher la transcription ininterrompue et garantir la stabilité de la construction de l’expression |
Origine de la réplication ColE1 | À partir de pBR322 |
Gène de la bêta-lactamase (bla) | Confère une résistance à l’ampicilline |
Les inserts codant les protéines d’intérêt sont clonés dans des constructions appropriées (pour des informations détaillées, consultez le Manuel QIAexpressionist) puis transformés en une souche d’E. coli adaptée à l’expression. L’expression est induite par ajout d’IPTG. Les constructions Vector pQE-TriSystem peuvent être transformées en E. coli, utilisées comme vecteur navette pour l’expression de protéines recombinantes dans des cellules d’insecte ou transfectées dans des cellules de mammifère.
Le QIAexpress Expression System permet une expression de haut niveau des protéines adaptée à de
nombreuses applications, notamment :
Features | Specifications |
---|---|
Expression | In vivo |
Tag | Marqueur 6xHis-tag |
N- or C-terminal tag | Marqueur N-terminal |
Expression species | E. coli |
Tag removal sequence | Non |
In-frame cloning necessary | Oui |
All three reading frames provided | Oui |