Anti His HRP Conjugate Kits

Pour la détection sensible et directe des protéines marquées à l’histidine

S_1335_PROT_QXP0554

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Penta His HRP Conjugate Kit

Cat. No. / ID:  34460

125 μl de Penta His HRP Conjugate, 5 g de réactif bloquant, 50 ml de tampon de réactif bloquant (concentré 10x)
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556,00 €
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Kit
Penta·His HRP
RGS·His HRP
Les Anti His HRP Conjugate Kits sont destinés aux applications de biologie moléculaire. Ces produits ne sont pas conçus pour le diagnostic, la prévention ou le traitement des maladies.

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Features

  • Détection hautement sensible et très rapide des protéines marquées à l’histidine, et des épitopes RGS·His
  • Pas besoin d’anticorps secondaires
  • Réactif bloquant optimisé fourni

Product Details

Les Anti·His HRP Conjugate Kits, notamment le RGS·His HRP Conjugate Kit (conjugués de marqueurs His-tag) et le Penta·His HRP Conjugate Kit (conjugués de marqueurs 6xHis-tag), sont destinés à la détection sensible des protéines recombinantes présentant des marqueurs His-tag, sans nécessité d’utiliser des anticorps secondaires. Ils contiennent des anticorps anti·His conjugués à de la peroxydase de raifort (PR). Dans les procédures de détection, l’anticorps anti·His se lie au marqueur His-tag d’une protéine puis le complexe est localisé à l’aide de substrats chimiluminescents ou chromogènes qui réagissent avec la PR.

Performance

CaractéristiqueRGS·His HRP Conjugate KitPenta·His HRP Conjugate Kit
DétectionMarqueur N-terminal, C-terminal et His-tag interne (contenant l’épitope RGSHHHH)Marqueur N-terminal, C-terminal et 6xHis-tag interne
Sensibilité dans les transferts en point*10 pg10 pg
Sensibilité dans les transferts de western*50 pg50 pg
Isotype des anticorpsIgG1 de sourisIgG1 de souris
Réactivité croiséeNégligeable avec lysats cellulaires bruts d’E. coli, levure, mammifère ou insecteNégligeable avec lysats cellulaires bruts d’E. coli, levure, mammifère ou insecte
FormeSolution de réserve stabiliséeSolution de réserve stabilisée
Solution prête à l’emploi125–250 ml125–250 ml

Principle

Les Anti·His HRP Conjugate Kits contiennent les QIAexpress Anti·His Antibodies chimiquement couplés à l’enzyme rapporteuse de la peroxydase de raifort (PR). Ils peuvent être utilisés pour la détection directe, hautement spécifique et sensible, de toute protéine recombinante présentant un marqueur His-tag accessible. Plus besoin d’utiliser des anticorps secondaires, vous gagnez du temps avec les procédures d’immunodétection. Les Anti·His HRP Conjugate Kits peuvent être utilisés avec des substrats de détection chimiluminescents ou chromogènes.

Procedure

Le Manuel de détection et de dosage QIAexpress, qui accompagne tous les produits de détection et dosage QIAexpress, contient des exemples détaillés de protocoles et des consignes pour la conception et la réalisation des dosages.

Applications

Les Anti·His HRP Conjugate Kits, notamment le RGS·His HRP Conjugate Kit (conjugué de marqueurs His-tag) et le Penta·His HRP Conjugate Kit (conjugué de marqueurs 6xHis-tag), reconnaissent les mêmes épitopes comme leur anticorps correspondant et peuvent être utilisés pour la détection directe chimiluminescente ou chromogène des protéines marquées à l’histidine pour :

  • Procédures de transfert de western, en point et de colonies
  • Procédures ELISA et autres procédures d’immunodosage

Comparaison du RGS·His HRP Conjugate Kit et du Penta·His HRP Conjugate Kit

Caractéristiques RGS·His HRP Conjugate Kit Penta·His HRP Conjugate Kit
Enzyme conjuguée PR PR
Détection Anticorps secondaires requis Anticorps secondaires requis
Épitope détecté RGSHHHH HHHHH
Substrat pour détection par transfert Biotech ECL 4C1N
Substrats pour procédure de dosage OPD OPD
Marqueur Marqueur His-tag Marqueur His-tag

Les Anti·His HRP Conjugate Kits sont destinés aux applications de biologie moléculaire. Ces produits ne sont pas conçus pour le diagnostic, la prévention ou le traitement d’une maladie.

Resources

Kit Handbooks (1)
For Anti·His Antibodies, Anti·His HRP Conjugates, Penta·His™ Alexa Fluor® Conjugates, Penta·His Biotin Conjugate, Ni-NTA Conjugates, Tag·100™ Antibody, Streptavidin–R-PE, 6xHis Protein Ladder, Ni-NTA HisSorb™ Strips and Plates 
Supplementary Protocols (1)
Certificates of Analysis (1)

FAQ

What epitopes do the Anti-His Conjugates and Anti-His Antibodies recognize?

The table below lists the epitopes recognized by the Anti-His Conjugates and Anti-His Antibodies. 'H' designates a histidine residue, while 'X' designates any amino acid other than histidine. Note that individual 6xHis-tagged proteins are often recognized better by one Anti-His Antibody than by the others, possibly because of subtle differences in the exact conformation of the 6xHis tag and other parts of the protein in the vicinity of the tag. To choose the optimal antibody for your specific 6xHis-tagged protein and application, QIAGEN offers the Anti-His Antibody Selector Kit. The kit includes 3 µg of each of the three antibodies for direct comparison and economical selection of the one that gives the best results.

Epitopes recognized by QIAexpress Anti-His HRP Conjugates and Anti-His Antibodies


Peptide Penta-His Tetra-His RGS-His
XHHHHHHX
+ +
XXHHHHHX
+ +
XHXHHHHX
+
XHHHHXHX
+
XRGSHHHHX
+ +
XRGSHHHHHHX
+ + +
XHXHHXHX

Note that the presence of specific residues N- or C-terminal to the epitope is not required.

FAQ ID -170
Which Anti-His Antibody is the most sensitive for my protein of interest?

Penta-His and Tetra-His Antibody bind to proteins that have 6xHis tags regardless of the surrounding amino-acids, even when the tag is partially hidden. Subtle differences in the antigen recognition sites of these antibodies mean that some 6xHis-tagged proteins are detected with higher sensitivity by one Anti-His Antibody than by the others (see figure below). Therefore, to achieve optimum results, we recommend comparison of these antibodies in parallel for new applications and proteins. QIAGEN offers the Anti-His Antibody Selector Kit for this purpose.


 

Sensitivity of QIAexpress Anti·His Antibodies



 

Note:  RGS His Antibody regonizes the RGS(His)4 epitope that is found on proteins endcoded by most pQE vectors as well as several pRSETan pBlue BacHis -vectors from Invitrogen.

FAQ ID -172
How can I avoid poor immunolocalization morphology with Anti-His Antibodies?
Insufficient fixation of samples leads to poor morphological preservation. If using methanol or acetone try fixation with paraformaldehyde. If 2% paraformaldehyde is insufficient, increase fixative concentration to 4% and increase incubation time. Keep in mind that too harsh fixation can lead to functional alteration of the 6xHis epitope and loss of recognition by the Anti·His Antibodies.immunofluorescence
FAQ ID -200
Can the Blocking Reagent supplied with the Penta-His HRP Conjugate be used with other antibodies?
Yes, the Blocking Reagent supplied with our Penta-His HRP Conjugate can also be used with other antibodies.
FAQ ID -1073