QIAxcel DNA Kits for Capillary Gel Electrophoresis

Les instruments QIAxcel, utilisés avec les QIAxcel DNA Kits, permettent la séparation par taille et la quantification entièrement automatisées de fragments d’ADN dans 96 échantillons maximum par cycle d’exécution. La technologie QIAxcel, basée sur l’électrophorèse capillaire avec cartouches de gel, offre une résolution, une vitesse et un débit incomparables. Les cartouches de gel QIAxcel sont réutilisables, elles permettent de réaliser jusqu’à 250 cycles d’exécution de 12 échantillons. Les méthodes adaptées à la plupart des applications sont préinstallées. QIAGEN peut aussi créer des méthodes sur mesure pour les utilisateurs.

Le QIAxcel DNA High Sensitivity Kit fonctionne uniquement avec le QIAxcel Connect. Tous les autres QIAxcel DNA Kits fonctionnent avec le QIAxcel Connect ou avec les instruments QIAxcel Advanced. Les accessoires pour ADN QIAxcel sont compatibles avec tous les QIAxcel DNA Kits.

Analyse haute résolution simplifiée

Le génotypage d’organismes, le criblage de banques d’ADNc par PCR et bien d’autres applications de recherche biomédicale et de biologie moléculaire nécessitent la discrimination des fragments d’ADN dont la taille varie d’un petit nombre de paires de bases. Le QIAxcel High Resolution Kit, associé aux instruments QIAxcel, permet d’analyser des fragments d’ADN dont la taille varie entre 15 pb et 5 kb. Les fragments inférieurs à 500 pb peuvent être séparés avec une résolution de 3–5 pb, cela facilite nettement l’interprétation des données par rapport à l’électrophorèse sur gel d’agarose haute résolution classique (voir  Détection sensible d’un oncogène muté). Avec une sensibilité de détection de 0,1 ng/µl d’ADN dans des réactions d’amplification non diluées, les instruments QIAxcel donnent des résultats plus fiables avec un échantillon de départ moins important.

Le QIAxcel DNA Screening Kit est tout à fait adapté à l’évaluation courante de fragments pour la digestion par des endonucléases de restriction, la PCR qualitative simplex ou multiplex et d’autres applications relatives à l’ADN (voir  Analyse haute résolution d’échantillons par PCR multiplex). L’utilisation de cartouches de gel pour le dépistage d’ADN simplifie le flux de travail du laboratoire en limitant le temps d’analyse pour les fragments de 15 pb à 5 kb - 96 échantillons sont traités en 1 heure environ. Vous pouvez obtenir une résolution de 20–50 pb pour les fragments inférieurs à 1 kb. La consommation d’échantillons est inférieure à 0,1 µl, vous réservez ainsi vos échantillons précieux pour un autre usage ultérieur.

Le QIAxcel DNA Fast Analysis Kit est tout à fait adapté à l’évaluation courante de fragments d’ADN dans des applications de PCR qualitative simplex ou multiplex. L’utilisation de cartouches de gel pour le dépistage d’ADN simplifie le flux de travail du laboratoire en limitant le temps d’analyse pour les fragments de 15 pb à 3 kb — 12 échantillons sont traités en seulement 3 minutes et 96 échantillons en 25 minutes environ (voir  Capture d’écran de données d’analyse de fragments par PCR). Vous pouvez obtenir une résolution de 50 pb avec la cartouche de gel QIAxcel DNA Fast Analysis et la consommation d’échantillons est inférieure à 0,1 μl.

Le QIAxcel DNA High Sensitivity Kit vous permet d’analyser l’ADN à des concentrations de l’ordre de 5 pg/μl. Le temps d’analyse de fragments de 15 pb–3 kb est d’environ 9 minutes pour 12 échantillons. Vous pouvez obtenir une résolution de 20–50 pb avec la cartouche de gel QIAxcel DNA High Sensitivity.

Les instruments QIAxcel utilisent l’électrophorèse capillaire sur gel qui permet une séparation rapide basée sur la taille des acides nucléiques (voir  Processus de séparation des échantillons). Contrairement à l’électrophorèse sur gel d’agarose classique, la séparation s’effectue dans un capillaire d’une cartouche de gel prête à l’emploi. Les échantillons sont chargés automatiquement dans un capillaire individuel puis une tension est appliquée. Les molécules d’acides nucléiques chargées négativement migrent à travers le capillaire jusqu’au terminus chargé positivement. Comme pour l’électrophorèse sur gel d’agarose, les molécules de faible poids moléculaire migrent plus vite que les molécules de poids moléculaire élevé. Lorsque les molécules migrent à travers le capillaire, elles passent devant un détecteur qui détecte et mesure le signal de fluorescence. Un photomultiplicateur convertit le signal de fluorescence en données électroniques, qui sont ensuite transférées à l’ordinateur pour être traitées avec le logiciel QIAxcel ScreenGel. Au terme du traitement, les données s’affichent sous forme d’électrophérogramme ou d’image de gel.

Les QIAxcel DNA Kits simplifient la séparation et l’analyse des fragments d’ADN et offrent à l’utilisateur une sécurité accrue. Il suffit de quelques étapes simples : chargez la cartouche de gel, remplissez et chargez le plateau de tampons, chargez les échantillons dans des plaques de 96 puits ou des tubes ou barrettes pour PCR, sélectionnez le profil de traitement et c’est tout. Oubliez la préparation de gel fastidieuse et la formation approfondie de l’utilisateur, le flux de travail est simplifié et le système s’intègre facilement à l’activité quotidienne du laboratoire. Quelques minutes après le lancement d’un cycle d’exécution, les premiers résultats apparaissent en temps réel sur l’écran de l’ordinateur (voir  Temps de fonctionnement réduits).

Des méthodes préprogrammées, associées aux cartouches de gel correspondantes, permettent la séparation et l’analyse de nombreux acides nucléiques, notamment les fragments par PCR simplex ou multiplex, l’ADN digéré par des endonucléases de restriction et des oligonucléotides synthétisés.