QIAamp DNA Blood Kits – Genomic DNA Extraction

Para la purificación de ADN genómico, mitocondrial o vírico a partir de sangre y otros líquidos corporales

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QIAamp DNA Blood Mini Kit (50)

N.º de cat. / ID. 51104

Para 50 minipreparaciones de ADN: 50 QIAamp Mini Spin Columns, QIAGEN Protease, Reagents, Buffers y Collection Tubes (2 ml)

KitAccesorios

QIAamp DNA Blood Kit

QIAamp DNA Blood Mini Accessory Set

Tipo de columnaTipo de placa

Mini

Mini QIAcube

Midi

Maxi

96 well

Preparaciones

250

Consultar al respecto

QIAamp DNA Blood Kits están concebidos para su uso en aplicaciones de biología molecular. Estos productos no están concebidos para el diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.

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Características

Purificación rápida de ADN de gran calidad listo para usar
Sin extracción orgánica ni precipitación con alcohol
Rendimiento alto y constante
Eliminación completa de contaminantes e inhibidores para resultados fiables
Formatos de kit para opciones de bajo y alto rendimiento, para la automatización de cualquier kit

Detalles del producto

Los QIAamp DNA Blood Kits proporcionan un sistema de purificación de ADN basado en membranas de gel de sílice a partir de sangre total, plasma, suero y otros líquidos corporales. Estos kits están diseñados para muestras de entre 200 μl y 10 ml de sangre total humana fresca o congelada. Las QIAamp Spin Columns pueden procesarse de forma sencilla en una centrifugadora o en un colector de vacío. El cómodo formato de 96 pocillos con centrifugación utiliza la purificación del ADN para laboratorios que necesitan una purificación de ADN de alto rendimiento a partir de sangre, capa leucoplaquetaria, plasma, suero, médula ósea, linfocitos y líquidos corporales. También está disponible un kit específico para la purificación automatizada de entre 1 y 12 muestras en QIAcube Connect.

Rendimiento

Los QIAamp DNA Blood Kits obtienen ADN de tamaños entre 200 pb y 50 kb, en función del tiempo y el almacenamiento de las muestras (consulte la figura “Bandeo apoptótico en sangre almacenada”). El ADN purificado es apto para la amplificación de PCR de largo alcance (consulte la figura “ PCR de largo alcance”) y el análisis de polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción (restriction fragment length polymorphism, RFLP) que se utiliza, por ejemplo, en las pruebas de paternidad (consulte la figura “ Pruebas de paternidad mediante análisis RFLP”).

El QIAamp DNA Blood Midi Kit proporciona un rendimiento de hasta el 94,5 % de recuperación de ADN; el QIAamp DNA Blood Maxi Kit proporciona un rendimiento de hasta el 95,8 % de recuperación de ADN, en función de la densidad celular inicial (consulte la tabla “Rendimientos de ADN a partir de sangre total humana en función de la densidad celular”).

Rendimientos de ADN a partir de sangre total humana en función de la densidad celular
Leucocitos por ml	Rendimiento de ADN (µg)		Recuperación de ADN (%)
	QIAamp Midi	QIAamp Maxi	QIAamp Midi	QIAamp Maxi
2,5 × 10⁵	3,0	15,8	92,3	95,8
1,0 × 10⁶	11,0	60,4	91,7	91,5
5,0 × 10⁶	62,4	312,0	94,5	94,5
1,0 × 10⁷	116,3	624,6	88,1	94,6

El ADN genómico se purificó a partir de 2 ml (QIAamp Midi) o 10 ml (QIAamp Maxi) de sangre total humana y se eluyó en 300 µl (Midi) o 1 ml (Maxi) de tampón de elución. La primera elución se cargó de nuevo en la columna y se volvió a centrifugar (es decir, se reeluyó). El porcentaje de recuperación de ADN se calculó asumiendo que un leucocito contiene 6,6 pg de ADN.

El QIAamp 96 DNA Blood Kit procesa muestras de hasta 200 µl con un tiempo de preparación de entre 2 y 3 horas para 192 muestras, y obtiene un rendimiento de ADN puro en menos de 1 minuto por preparación. Se puede obtener un rendimiento superior si se escalona el procedimiento. Las placas QIAamp 96 proporcionan pureza y uniformidad entre pocillos en la recuperación de ADN (consulte las figuras “ Reproducibilidad de las muestras” y “ Reproducibilidad de rendimiento y pureza”). El rendimiento típico es de 6 µg por 200 µl de sangre total humana, con un volumen de elución de 50-200 µl.

El QIAamp DNA Blood Mini QIAcube Kit permite el aislamiento de ADN automatizado a partir de muestras de sangre y el aislamiento de ADN a partir de líquidos corporales en QIAcube Connect. El kit incluye adaptadores de rotor precargados con tubos de elución y columnas de centrifugación de QIAamp, lo que proporciona un procedimiento más práctico y que permite ahorrar tiempo (consulte la figura “ Ahorro de tiempo significativo”). Además, el kit es más fácil de utilizar, lo que minimiza los errores por parte del usuario. También se reduce la cantidad de residuos, porque el contenido del kit está diseñado para la purificación en QIAcube Connect y los tubos adicionales que se necesitan para el procedimiento manual no están incluidos.

Si se utiliza el QIAamp DNA Blood Mini Kit automatizable en QIAcube Connect, QIAamp DNA Blood Mini Accessory Set A y QIAamp DNA Blood Mini Accessory Set B proporcionan los tampones y reactivos adicionales para la preparación automatizada de las muestras.

Principio

No se requiere extracción con fenol/cloroformo. El ADN se une de forma específica a la membrana de gel de sílice QIAamp mientras los contaminantes la atraviesan. Los inhibidores de la PCR, como los cationes divalentes y las proteínas, se eliminan por completo en dos eficientes pasos de lavado, dejando el ácido nucleico puro para su elución en agua o en un tampón incluido en el kit. La tecnología de QIAamp DNA Blood obtiene ADN genómico. mitocondrial o vírico a partir de sangre y líquidos corporales relacionados listos para su uso en procedimientos de PCR y blotting. La tecnología de preparación de las muestras de QIAamp cuenta con licencia completa.

Procedimiento

Los QIAamp DNA Blood Kits simplifican al purificación de ADN de la sangre y de líquidos corporales con columnas de centrifugación rápidas, sistemas de vacío, centrifugadoras u otros procesos automatizados (consulte la figura “ Procedimiento con la QIAamp Spin Column”). Se puede procesar sangre total fresca y congelada con anticoagulantes comunes, como citrato, ácido edético (EDTA) y heparina. Si se están procesando las QIAamp Midi Spin Columns o Maxi Spin Columns en colectores de vacío, se requiere un Buffer AW1 (número de catálogo 19081) y un Buffer AW2 (número de catálogo 19072) adicionales para su uso con los colectores de vacío.

Procesamiento de vacío con el QIAamp DNA Blood Mini Kit

Con el QIAamp DNA Blood Mini Kit, se puede procesar la sangre mediante métodos de vacío en lugar de centrifugación, lo que permite una mayor velocidad y practicidad en la purificación de ADN. Las QIAamp Mini Spin Columns se colocan en el colector QIAvac 24 con la ayuda de VacValves y VacConnectors. Las VacValves deben utilizarse si el flujo de las muestras difiere significativamente para conseguir un vacío uniforme. Se utilizan VacConnectors desechables para evitar cualquier posible contaminación cruzada. El uso de VacConnectors también permite que estos procedimientos de centrifugación de QIAamp puedan llevarse a cabo en QIAvac 6S con QIAvac Luer Adapters.

Procesamiento automatizado en QIAcube Connect

El galardonado instrumento QIAcube Connect utiliza la tecnología avanzada para procesar las columnas de centrifugación de QIAGEN, lo que permite una integración perfecta de la preparación automatizada de muestras de bajo volumen en el flujo de trabajo del laboratorio. Todos los pasos del procedimiento de purificación están totalmente automatizados (se pueden procesar hasta 12 muestras por serie). Cuando se utiliza QIAcube Connect en combinación con el QIAamp DNA Mini QIAcube Kit, proporciona una combinación óptima para una purificación de ADN rápida, práctica y sencilla.

Procesamiento de alto rendimiento en formato de 96 pocillos

Para aplicar el procedimiento de centrifugación de QIAamp 96, se deben colocar las placas del QIAamp 96 en los huecos profundos del rotor del QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System, en bloques de 96 pocillos. Se puede utilizar sangre total fresca o congelada tratada con anticoagulantes comunes, como citrato, ácido edético (EDTA) y heparina. Se puede procesar sangre total seca con un equipo adicional y aplicando un protocolo especial que puede solicitarse al servicio técnico de QIAGEN o a su distribuidor local.

Aplicaciones

Los QIAamp DNA Blood Kits ofrecen la tecnología QIAamp de demostrada eficacia para la purificación de ADN a partir de una amplia gama de muestras de distintos materiales. Pueden utilizarse muestras procedentes de:

Sangre total fresca y congelada, o capa leucoplaquetaria
Plasma o suero
Médula ósea
Linfocitos
Plaquetas
Líquidos corporales
Células cultivadas
Exudados y frotis de células bucales

Comparación de los QIAamp DNA Blood Kits
Características	QIAamp DNA Blood Mini Kit	QIAamp DNA Blood Midi Kit	QIAamp DNA Blood Maxi Kit	QIAamp 96 DNA Blood Kit
Aplicaciones	PCR, PCR de largo alcance, Southern blotting	PCR, Southern blotting	PCR, blotting	Southern blotting, mapeo de genomas
Volumen de elución	50-200 µl	100-400 µl	500-2000 µl	50-200 µl
Formato	Columna de centrifugación	Columna de centrifugación	Columna de centrifugación	Placa de 96 pocillos
Tipo de muestra principal	Sangre total, líquidos corporales	Sangre total, líquidos corporales	Sangre total, líquidos corporales	Sangre total, líquidos corporales
Procesamiento	Manual (centrifugación o vacío)	Manual (centrifugación o vacío)	Manual (centrifugación o vacío)	Manual (centrifugación o vacío)
Purificación de ARN total, miARN, ARNm poli A+, ADN o proteína	ADN genómico, ADN mitocondrial, ADN vírico	ADN genómico, ADN mitocondrial, ADN vírico	ADN genómico, ADN mitocondrial, ADN vírico	ADN genómico, ADN mitocondrial, ADN vírico
Cantidad de muestra	1-200 µl	0,3-2 ml	3-10 ml	<200 µl
Tecnología	Tecnología de sílice	Tecnología de sílice	Tecnología de sílice	Tecnología de sílice
Tiempo por serie o por preparación	20-40 minutos	55 minutos	55 minutos	2-3 horas (192 muestras)
Rendimiento	4-12 µg	20-60 µg	300-600 µg	6 µg

Datos y cifras de respaldo

Ejemplo de distribución de tamaño con el QIAamp DNA Blood Mini Kit (sangre)

Ejemplo de distribución de tamaño de ADN a partir de sangre con el QIAamp DNA Blood Mini Kit. Se analizaron muestras con el Femto Pulse System y se normalizaron las señales hasta el pico máximo.

Pruebas de paternidad mediante análisis de RFLP.

Reproducibilidad de rendimiento y pureza.

Ahorro de tiempo significativo con QIAcube Kits.

Procedimiento con la QIAamp Spin Column.

Recursos

For large-scale genomic and viral DNA purification from whole blood, plasma, serum, body fluids, lymphocytes

全血、血漿、血清、体液、リンパ球からのゲノムおよびウイルスDNA大量精製用

As starting material, 5 g soil was mixed with different amounts of Bacillus subtilis cells. Sensitivity was 5 x 10³ cells/5g soil.

Second edition — innovative tools

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July 2024

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Publicaciones

A multiplex ligase detection reaction-fluorescent microsphere assay for simultaneous detection of single nucleotide polymorphisms associated with Plasmodium falciparum drug resistance.

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The association of sequence variants in DNA repair and cell cycle genes with cancers of the upper aerodigestive tract.

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Individual-based assessment of population structure and admixture in Austrian, Croatian and German draught horses.

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Quantification of genital human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) DNA in specimens from women with low plasma HIV-1 RNA levels typical of HIV-1 nontransmitters.

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Preguntas frecuentes

For DNA isolation using the QIAamp DNA Mini, or the DNeasy Blood & Tissue Kit, we recommend using carrier DNA when expected yields are below 10 ng. If possible, carrier DNAs such as poly-dA, poly-dT or poly-dA:dT should be used. Other carrier DNAs such as herring sperm DNA may interfere with subsequent PCR by binding primers nonspecifically.

Please note that poly-dA may interfere with oligo-dT primers, and, in this case, a different carrier DNA should be used. The concentration of carrier DNA should be at least 10 µg/ml. Optimal amounts need to be determined empirically for each application. The size distribution of carrier DNAs is typically in the range of 100 bp to 10 kb.

FAQ-100

Yes, please follow the Supplementary Protocol 'Purification of DNA from whole blood using the QIAamp DNA Blood Midi or Maxi Kit and vacuum processing on the QIAvac 24 Plus' (QA33). Please contact Technical Service for this protocol.

FAQ-1011

Always dispose of potentially biohazardous solutions according to your institution’s waste-disposal guidelines. Although the lysis and binding buffers in QIAamp, DNeasy, and RNeasy kits contain chaotropic agents that can inactivate some biohazardous material, local regulations dictate the proper way to dispose of biohazards. DO NOT add bleach or acidic solutions directly to the sample-preparation waste. Guanidine hydrochloride in the sample-preparation waste can form highly reactive compounds when combined with bleach.
Please access our Material Safety Data Sheets (MSDS) online for detailed information on the reagents for each respective kit.

FAQ-12

Yes. We have used the QIAamp DNA Blood Mini Kit to purify DNA fragments as small as 168 base pairs. Our product profile for this kit shows a picture of the apoptotic banding pattern obtained after storage of blood samples at 4°C for extended periods of time prior to isolating DNA.

FAQ-149

Dedicated QIAcube kits are the RNeasy Mini QIAcube Kit, QIAamp DNA Mini QIAcube Kit , the QIAamp DNA Blood Mini QIAcube Kit, and the QIAamp Viral RNA Mini QIAcube Kit. In addition to these kits are the QIAamp PowerFecal Pro DNA QIAcube Kit, the DNeasy PowerSoil Pro QIAcube Kit using Power technology, and the DNeasy Blood & Tissue QIAcube Kit.

FAQ-2337

One milliliter of healthy human blood consists of cell types in approximately the following numbers:

Leucocytes (function: immune response) 4–7 x 106 cells
Thrombocytes (function: wound closing) 3–4 x 108 cells
Erythrocytes (function O2 and CO2 transport) 5 x 109 cells

FAQ-2951

Alcohol precipitation is commonly used for concentrating, desalting, and recovering nucleic acids. Since less alcohol is required for isopropanol precipitation, this is the preferred method for precipitation of DNA from large volumes. In addition, isopropanol precipitation can be performed at room temperature, which minimizes co-precipitation of salt that interferes with downstream applications.

Procedure

Adjust the salt concentration, for example, with sodium acetate (0.3 M, pH 5.2, final concentration) or ammonium acetate (2.0–2.5 M, final concentration).
Add 0.6–0.7 volumes of room-temperature isopropanol to the DNA solution and mix well.
Centrifuge the sample immediately at 10,000–15,000 x g for 15–30 min at 4°C
Carefully decant the supernatant without disturbing the pellet.
Wash the DNA pellet by adding 1–10 ml (depending on the size of the preparation) of room-temperature 70% ethanol. This removes co-precipitated salt and replaces the isopropanol with the more volatile ethanol, making the DNA easier to redissolve.
Centrifuge at 10,000–15,000 x g for 5–15 min at 4°C.
Carefully decant the supernatant without disturbing the pellet.
Air-dry the pellet for 5–20 min (depending on the size of the pellet).
Redissolve the DNA in a suitable buffer.

Tip: Use a buffer with a pH of 7.5–8.0, as DNA does not dissolve easily in acidic buffers. Often distilled water can have an acidic pH. The addition of EDTA protects the DNA from DNase digestion.

Tip: High-molecular-weight DNA, such as genomic DNA, should be redissolved very gently to avoid shearing. If the DNA pellet does not dissolve easily, heat at 55°C for 1–2 h with gentle shaking.

FAQ-2953

Add 1/10 volume of 3 M Na-Acetate pH 5.2, and 2 to 2.5 volumes of ice-cold 100% ethanol to the DNA sample
Mix, and store at –20°C for at least 1 h to precipitate the DNA
Recover the precipitated DNA by centrifugation at full speed in a microcentrifuge for 15–20 min
Pour off the ethanol and wash the pellet twice with room-temperature 70% ethanol
Allow the DNA pellet to air-dry
resuspend the DNA in a suitable volume of sterile TE buffer or distilled water

FAQ-305

QIAGEN Protease is inactivated by incubation at 70°C for 15 minutes.

To our knowledge, Proteinase K cannot be completely heat-inactivated. Even when incubating at 95°C for 10 minutes, some enzymatic activity remains. This will not negatively affect the QIAamp Procedure, since the enzyme will be efficiently removed by the wash steps in the protocols.

FAQ-315

There is no latex in either the product or the packaging of the QIAamp 96 DNA Blood Kit.

FAQ-318

In QIAGEN labs, we have isolated DNA from a minimum of 1000 cells or 1 ul of whole blood sample. The expected yield from 1 ul of whole blood with 4000-7000 leukocytes is 30 ng of genomic DNA. The expected yield of genomic DNA from a single eukaryotic cell is 6 pg. However, please bear in mind that for these small quantities, we would recommend the QIAamp DNA Micro kit instead.

FAQ-3516

The size of DNA obtained with QIAamp DNA Mini and QIAamp Blood Mini kit ranges between 100 bp and 50 kb, with 30 kb fragments predominating. The 30 kb fragments are a good starting point for most of the library preparations. Furthermore, the purified DNA is free of protein, nucleases, and other contaminants and inhibitors, and therefore is suitable for NGS.

FAQ-3518

Yes. We have shown that DNA purified with the QIAamp DNA Blood Mini Kit is stable for at least 10 years at either 2–8ºC or –20ºC. However, our data indicates that DNA stability is dependent upon elution buffer used for storage. For detailed information on this stability study see the QIAGEN News Article for the first part of the study and then the continuing study data at the 10 year mark.

FAQ-518

Yes. Please follow the Blood and Body Fluid Spin Protocol in the QIAamp DNA Mini and QIAamp DNA Blood Mini Kit Handbook. No more than 5 x 10⁶ cells should be used. When using the Midi or Maxi format, please follow the protocol for Isolation of DNA using the QIAamp DNA Blood Midi or Maxi Kit in the QIAamp Blood Midi and QIAamp Blood Maxi Handbook. The maximum number of cells to use is 2 x 10⁷and 1 x 10⁸, respectively.

FAQ-563

Tissue is more difficult to lyse than cells in a blood sample. Therefore an additional incubation step in buffer ATL containing Proteinase K is included in the Tissue Protocol to achieve complete sample lysis. Blood cells will directly lyse by incubation in Buffer AL containing QIAGEN Protease. Buffer AL is required in both protocols to ensure appropriate conditions for DNA binding to the silica membrane. For further details on the protocols, please refer to the QIAamp DNA Mini and QIAamp DNA Blood Mini Kit Handbook.

FAQ-633

According to an Interview with Professor Dennis Lo published in QIAGEN News Molecular Diagnostics, Issue No. 5, 2002, healthy individuals have about 500-1000 genome equivalents (DNA) per ml serum/plasma.

For free-circulating DNA in plasma, the concentration can range from 1–100 ng/ml in healthy individuals.

FAQ-635

Small amounts of RNA and DNA may be difficult to measure spectrophotometrically. Fluorometric measurements, or quantitative RT-PCR and PCR are more sensitive and accurate methods to quantify low amounts of RNA or DNA.

Fluorometric measurements are carried out using nucleic acid binding dyes, such as RiboGreen® RNA Quantitation Reagent for RNA, and PicoGreen® DNA Quantitation Reagent for DNA (Molecular Probes, Inc.).

FAQ-728

The composition of Buffer AE is:

10 mM Tris-Cl
0.5 mM EDTA; pH 9.0.

FAQ-730

EDTA chelates divalent cations which are required for nuclease activity. While the genomic DNA (gDNA) extracted using QIAGEN products, should not have any nuclease activity, it is possible to introduce nucleases during repeated long-term access of the DNA. EDTA helps to prevent any nuclease activity introduced after the genomic DNA extraction procedures.

However, if the gDNA is stored frozen at -20oC or -80oC, nuclease activity is much reduced. It may be possible to leave EDTA out of the storage buffer without negative consequences when samples are kept under these conditions, and when repeated freeze-thaw cycles are avoided.

We do recommend however that gDNA be stored in a neutral to a slightly basic buffered solution (e.g. 10 mM Tris-Cl pH 8.5 to 9.0) to prevent DNA degradation by acid hydrolysis. Note that deionized water mostly has an acidic pH.

FAQ-754

QIAGEN Proteinase K is a subtilisin-type protease, which cleaves at the carboxyl side of hydrophobic, aliphatic and aromatic amino acids. It is particularly suitable for short digestion times. It possesses a high specific activity over a wide range of temperatures and pH values with substantially increased activity at higher temperature. Soluble calcium is not essential for enzymatic activity. This means that EDTA, which is used to inhibit Mg2+-dependent enzymes such as nucleases, will not inhibit Proteinase K activity.

QIAGEN Protease is a broad-specificity Serine protease with high activity, cleaving preferentially at neutral and acidic residues. It is an economical alternative to Proteinase K for isolation of native DNA and RNA from a variety of samples.

FAQ-761

Yes, please follow the User-Developed Protocol 'Streptokinase treatment of clotted blood' (QA12). The protocol is for use with the QIAamp DNA Blood Mini Kit .

FAQ-912

Yes, please follow the User-Developed Protocol 'Detection of HBV DNA by PCR' (QA15). The procedure is for use with the QIAamp DNA Blood Mini Kit. Please contact Technical Service for this protocol.

FAQ-915

Yes, we have the following protocols:

Isolation of genomic DNA from saliva and mouthwash using the QIAamp DNA Mini Kit; vacuum procedure (QA19v)
Isolation of genomic DNA from saliva and mouthwash using the QIAamp DNA Mini Kit; spin procedure (QA19s)
Isolation of genomic DNA from saliva using the DNeasy Blood & Tissue Kit; spin procedure (DY07)

FAQ-917

Yes, we please follow the Supplementary Protocol 'Isolation of genomic DNA from dried blood spots using the QIAamp 96 DNA Blood Kit' (QA22). Please contact Technical Service for this protocol.

FAQ-919

Yes, please follow the User-Developed Protocol 'Isolation of bacterial DNA from soil using the QIAamp DNA Stool Mini Kit and QIAamp DNA Blood Midi Kit' (QA28).

FAQ-923

TB Management

Transplant

Infectious Disease

Oncology

Sexual & Reproductive Health

Sample Processing

Solutions for Laboratory-Developed Tests