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Farma y biotecnología

Terapia celular

La terapia celular implica la transferencia de células con la función pertinente al paciente. Las células se modifican fuera del cuerpo antes de inyectarse en el paciente, y pueden proceder del paciente (células autógenas) o de un donante (células alógenas). Entre los ejemplos de terapia celular podemos ver las células T con receptores de antígenos quiméricos (Chimeric antigen receptor, CAR): un control de calidad adecuado es esencial para conservar su eficacia y reproducibilidad.

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Células T CAR

Las células T con receptores de antígenos quiméricos (Chimeric antigen receptor, CAR) se perfilan rápidamente como un tratamiento prometedor para cánceres y trastornos inmunitarios. Las células T se modifican genéticamente con CAR que contienen dominios de reconocimiento basados en anticuerpos frente a antígenos de superficie celular en el tipo de célula diana.

Las células T, y más recientemente las células NK, pueden manipularse genéticamente mediante lentivirus y retrovirus. Los vectores virales tienen una gran eficacia de transducción, pero carecen de inmunogenicidad y toxicidad celular.

CAR T cell immunotherapy, chimeric antigen receptor T cell immunotherapy
Pipetting artus cleanroom, manufacturing of an artus mastermix

Desarrollo de las células T CAR

Los esfuerzos de investigación actuales se centran en el uso de la edición mediante CRISPR para la ingeniería de células T CAR para productos de células T CAR reproducibles, seguros y potentes. El actual proceso de elaboración de células T CAR requiere equipos específicos y una gran experiencia técnica, por lo que urge encontrar un enfoque seguro y sencillo para el desarrollo de células T CAR. La reprogramación in vivo de células T CAR mediante nanotecnología para encapsular plásmidos que expresen CAR ofrece un enfoque alternativo. También se han probado los vectores virales, como los lentivirus, para la generación in vivo de células T CAR.

Ofrecemos un intervalo de productos para la cuantificación de títulos virales y vectores virales, detección de ADN de células de anfitrión residuales y soluciones para edición mediada por CRISP para ingeniería de células T CAR.

Producción de lentivirus

Uno de los métodos de transferencia genética más versátil para la terapias de células T emplea vectores lentivirales recombinantes, ya que pueden transducirse tanto en células que se dividen como en células que no se dividen. Las terapias celulares reproducibles y efectivas requieren métodos sensibles y precisos para el control de calidad de la producción de lentivirus. La cuantificación de qPCR tradicional de ácidos nucleicos puede verse afectada por los inhibidores de PCR y, además, requiere un patrón de referencia para la cuantificación. Por otra parte, el QIAcuity Digital PCR System permite una cuantificación rápida, reproducible y absoluta de vectores virales y título viral sin un patrón de referencia, lo que garantiza la calidad y la reproducibilidad en la investigación de la terapia celular. La tecnología también tiene una tolerancia mayor para los inhibidores que la qPCR.

Cignal, lentivirus
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Referencias

Lindsey A. Murphy et al. (2022). Digital polymerase chain reaction strategies for accurate and precise detection of vector copy number in chimeric antigen receptor T-cell products. Cytotherapy.https://doi.org/10.1016/j.jcyt.2022.09.004

Lindsey A. Murphy et al. (2021). Detection of Vector Copy Number in Bicistronic CD19xCD22 CAR T Cell Products with Digital PCR. Blood. 138 (1): 4001.https://doi.org/10.1182/blood-2021-153889