Anti·His HRP Conjugate Kits

Zum sensitiven Direktnachweis von Proteinen mit His-tag

S_1335_PROT_QXP0554

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Penta·His HRP Conjugate Kit

Cat. No. / ID:  34460

125 μl Penta·His HRP-Konjugat, 5 g Blockierungsreagenz, 50 ml Blockierungsreagenz-Puffer (Konzentrat 10x)
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519,00 €
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Kit
Penta·His HRP
RGS·His HRP
Anti·His HRP Conjugate Kits sind für molekularbiologische Anwendungen vorgesehen. Diese Produkte sind nicht zur Diagnose, Prävention oder Behandlung einer Erkrankung vorgesehen.

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Features

  • Hochsensitiver und schneller Nachweis von Proteinen mit His-tag, auch mit RGS·His-Epitopen
  • Kein sekundärer Antikörper erforderlich
  • Optimiertes Blockierungsreagenz enthalten

Product Details

Anti·His HRP Conjugate Kits, einschließlich des RGS·His HRP Conjugate Kits (His-tag-Konjugate) und des Penta·His HRP Conjugate Kits (6xHis-tag-Konjugate), sind für den sensitiven Nachweis von rekombinanten Proteinen mit His-tag vorgesehen. Sekundäre Antikörper sind dabei nicht erforderlich. Sie bestehen aus Anti·His-Antikörpern, die mit Meerrettichperoxidase (HRP) konjugiert sind. Bei den Nachweisverfahren bindet der Anti·His-Antikörper an den His-tag eines Proteins, und der Komplex wird mit chemilumineszenten oder chromogenen Substraten, die mit HRP reagieren, lokalisiert.

Performance

EigenschaftenRGS·His HRP Conjugate KitPenta·His HRP Conjugate Kit
NachweisN-terminale, C-terminale und interne His-tags (die das Epitop RGSHHHH enthalten)N-terminale, C-terminale und interne 6xHis-tags
Sensitivität bei Dot-Blots*10 pg10 pg
Sensitivität bei Western-Blots*50 pg50 pg
Antikörper-IsotypMaus-IgG1Maus-IgG1
KreuzreaktivitätVernachlässigbar bei E. coli-Rohlysaten, Hefe-, Säuger- oder InsektenzelllysatenVernachlässigbar bei E. coli-Rohlysaten, Hefe-, Säuger- oder Insektenzelllysaten
FormStabilisierte StammlösungStabilisierte Stammlösung
Arbeitslösung125–250 ml125–250 ml

Principle

Anti·His HRP Conjugate Kits bestehen aus QIAexpress Anti·His-Antikörpern, die chemisch an das Reporterenzym Meerrettichperoxidase (HRP) gekoppelt sind. Sie können für den hochspezifischen und hochsensitiven Direktnachweis jedes rekombinanten Proteins mit einem zugänglichen His-tag verwendet werden. Sie machen den Einsatz von Sekundärantikörpern überflüssig und sparen so Zeit bei Immunnachweisverfahren. Anti·His HRP Conjugate Kits können mit chemilumineszenten oder chromogenen Nachweissubstraten verwendet werden.

Procedure

Das QIAexpress Nachweis- und Assayhandbuch, das mit allen QIAexpress Nachweis- und Assayprodukten geliefert wird, enthält detaillierte Beispielprotokolle und Leitfäden für die Entwicklung und Durchführung von Assays.

Applications

Anti·His HRP Conjugate Kits, einschließlich des RGS·His HRP Conjugate Kits (His-tag-Konjugat) und des Penta·His HRP Conjugate Kits (6xHis-tag-Konjugat), erkennen die gleichen Epitope wie die entsprechenden Antikörper und können für den direkten Chemilumineszenz- oder chromogenen Nachweis von Proteinen mit His-tag bei folgenden Verfahren verwendet werden:

  • Western-, Dot- und Kolonie-Blotting-Verfahren
  • ELISA und andere Immunassay-Verfahren

Vergleich des RGS·His HRP Conjugate Kits und Penta·His HRP Conjugate Kits

Eigenschaften RGS·His HRP Conjugate Kit Penta·His HRP Conjugate Kit
Konjugiertes Enzym HRP HRP
Nachweis Sekundärer Antikörper erforderlich Sekundärer Antikörper erforderlich
Epitopnachweis RGSHHHH HHHHH
Substrat für Blot-Nachweis Biotech ECL 4C1N
Substrate für Assayverfahren OPD OPD
Tag His-tag His-tag

Anti·His HRP Conjugate Kits sind für molekularbiologische Anwendungen vorgesehen. Diese Produkte sind nicht zur Diagnose, Prävention oder Behandlung einer Erkrankung vorgesehen.

Resources

Kit Handbooks (1)
For Anti·His Antibodies, Anti·His HRP Conjugates, Penta·His™ Alexa Fluor® Conjugates, Penta·His Biotin Conjugate, Ni-NTA Conjugates, Tag·100™ Antibody, Streptavidin–R-PE, 6xHis Protein Ladder, Ni-NTA HisSorb™ Strips and Plates 
Supplementary Protocols (1)
Certificates of Analysis (1)

FAQ

What epitopes do the Anti-His Conjugates and Anti-His Antibodies recognize?

The table below lists the epitopes recognized by the Anti-His Conjugates and Anti-His Antibodies. 'H' designates a histidine residue, while 'X' designates any amino acid other than histidine. Note that individual 6xHis-tagged proteins are often recognized better by one Anti-His Antibody than by the others, possibly because of subtle differences in the exact conformation of the 6xHis tag and other parts of the protein in the vicinity of the tag. To choose the optimal antibody for your specific 6xHis-tagged protein and application, QIAGEN offers the Anti-His Antibody Selector Kit. The kit includes 3 µg of each of the three antibodies for direct comparison and economical selection of the one that gives the best results.

Epitopes recognized by QIAexpress Anti-His HRP Conjugates and Anti-His Antibodies


Peptide Penta-His Tetra-His RGS-His
XHHHHHHX
+ +
XXHHHHHX
+ +
XHXHHHHX
+
XHHHHXHX
+
XRGSHHHHX
+ +
XRGSHHHHHHX
+ + +
XHXHHXHX

Note that the presence of specific residues N- or C-terminal to the epitope is not required.

FAQ ID -170
Which Anti-His Antibody is the most sensitive for my protein of interest?

Penta-His and Tetra-His Antibody bind to proteins that have 6xHis tags regardless of the surrounding amino-acids, even when the tag is partially hidden. Subtle differences in the antigen recognition sites of these antibodies mean that some 6xHis-tagged proteins are detected with higher sensitivity by one Anti-His Antibody than by the others (see figure below). Therefore, to achieve optimum results, we recommend comparison of these antibodies in parallel for new applications and proteins. QIAGEN offers the Anti-His Antibody Selector Kit for this purpose.


 

Sensitivity of QIAexpress Anti·His Antibodies



 

Note:  RGS His Antibody regonizes the RGS(His)4 epitope that is found on proteins endcoded by most pQE vectors as well as several pRSETan pBlue BacHis -vectors from Invitrogen.

FAQ ID -172
How can I avoid poor immunolocalization morphology with Anti-His Antibodies?
Insufficient fixation of samples leads to poor morphological preservation. If using methanol or acetone try fixation with paraformaldehyde. If 2% paraformaldehyde is insufficient, increase fixative concentration to 4% and increase incubation time. Keep in mind that too harsh fixation can lead to functional alteration of the 6xHis epitope and loss of recognition by the Anti·His Antibodies.immunofluorescence
FAQ ID -200
Can the Blocking Reagent supplied with the Penta-His HRP Conjugate be used with other antibodies?
Yes, the Blocking Reagent supplied with our Penta-His HRP Conjugate can also be used with other antibodies.
FAQ ID -1073