Qproteome Cell Compartment Kit

Für die Fraktionierung von Proteinen nach ihrer zellulären Lokalisierung

S_1084_5_GEN_disclaimer

✓ 24/7 automatic processing of online orders

✓ Knowledgeable and professional Product & Technical Support

✓ Fast and reliable (re)-ordering

Qproteome Cell Compartment Kit

Cat. No. / ID:  37502

For up to 10 subcellular fractionations*: Extraction buffers, Protease Inhibitor Solution, Benzonase®.
Copy order details
419,00 €
Log in To see your account pricing.
Dieses Produkt enthält Stoffe, die unter REACH (EG 1907/2006 Anhang XIV) geregelt sind. Die Verwendung dieses Produkts in der EU ist im Rahmen einer Ausnahmeregelung zulässig (Artikel 56(3)). Weitere Informationen finden Sie in der REACH-Meldung und im Sicherheitsdatenblatt zu diesem Produkt, die beide im Abschnitt „Ressourcen“ dieser Seite zu finden sind.
Qproteome Cell Compartment Kit ist für molekularbiologische Anwendungen vorgesehen. Dieses Produkt ist nicht für die Diagnose, Prävention oder Behandlung einer Krankheit bestimmt.

✓ 24/7 automatic processing of online orders

✓ Knowledgeable and professional Product & Technical Support

✓ Fast and reliable (re)-ordering

Product Details

Eukaryotische Zellen sind komplexe, streng geordnete und hoch strukturierte Systeme. Das Cell Compartment Kit wurde für die schnelle und einfache subzelluläre Fraktionierung von intakten eukaryotischen Zellen und Geweben entwickelt. Durch sequenzielle Zugabe verschiedener Extraktionspuffer zu einem Zellpellet können Proteine in den verschiedenen Zellkompartimenten selektiv isoliert werden.

Performance

Die Verwendung des Qproteome Cell Compartment Kit ermöglicht die einfache und effektive Zellkompartiment-spezifische Lokalisierung von Markerproteinen aus isolierten Zellen (siehe Abbildung „ Spezifische Trennung von Markerproteinen“ und „ Lokalisierung von Proteinen in Zellen unter verschiedenen Wachstumsbedingungen“) oder aus Gewebeproben (siehe Abbildung „ Lokalisierung von Proteinen in Gewebeproben“).
See figures

Principle

Das Kit enthält 4 Extraktionspuffer, welche die sequenzielle Isolierung von Proteinen, die mit dem Zytosol, den Membranen, dem Zellkern und dem Zytoskelett assoziiert sind, aus Zelllysaten oder Geweben ermöglichen.

Procedure

Die 4 Extraktionspuffer werden nacheinander einem Zellpellet zugesetzt und die entsprechenden Fraktionen werden durch Zentrifugation isoliert (siehe Flussdiagramm).

In einem alternativen Protokoll für Gewebe werden die Proben mit dem TissueRuptor gleichzeitig homogenisiert und aufgeschlossen, bevor sie wie ein Zellpellet verarbeitet werden.

Applications

Die subzelluläre Fraktionierung von Proteinen kann zur Anreicherung von in geringen Mengen vorliegenden Spezies, zur Bestimmung der subzellulären Lokalisierung von Enzymen, regulatorischen und strukturellen Proteinen und zur Überwachung der kompartimentellen Umverteilung von Biomolekülen unter basalen und stimulierten Bedingungen verwendet werden.

Supporting data and figures

Specifications

FeaturesSpecifications
ApplicationsSDS-PAGE, Massenspektrometrie
Fractions isolatedVier Fraktionen
Start materialZelllysat
Sample size~5 x 10e6 Zellen
Binding capacity/yieldVariiert
SpeciesEukaryoten

Resources

Safety Data Sheets (1)
Kit Handbooks (2)
For the subcellular fractionation of proteomic
samples
Quick-Start Protocols (1)
Certificates of Analysis (1)

FAQ

Which Qproteome or Protein Fractionation Kits from QIAGEN are compatible with tissue samples?

The Qproteome Cell Compartment Kit, the Qproteome Nuclear Protein Kit, the Qproteome Mitochondria Isolation Kit, and the PhosphoProtein Purification Kit are compatible with tissue samples. The respective protocol can be found in the respective handbook.

The Qproteome Mammalian Protein Prep Kit is also compatible with tissue, there is the QIAGEN Supplementary Protocol: Purification of protein from animal tissues using the Qproteome Mammalian Protein Prep Kit and the TissueRuptor™ available. For all these protocols the TissueRuptor is used.

 

 

 

FAQ ID -755
Do the Buffers CE1 - CE4 of the Qproteome Cell Compartment Kit contain DTT or any reducing agent?
No, none of the buffers of the Qproteome Cell Compartment Kit contain reducing agents.
FAQ ID -824
Will acetone precipitation recommended in the Qproteome Protocols denature Protein?
Acetone precipitation recommended in the protocols for the Qproteome Protein Fractionation Kits leaves most proteins in a native state. Some proteins may partially denature when precipitating with acetone.
FAQ ID -807
Is it possible to perform immunoprecipitation (IP) directly on protein fractions from the Qproteome Cell Compartment Kit?

We have not tested immunoprecipitation on protein fractions from the Qproteome Cell Compartment Kit. However, since Buffers CE1, CE2 and CE3 are native buffers, we would expect that they would work for this application. It might be a good idea to dilute the fractions 1:1 with a buffer already tested for immunoprecipitation to adjust to IP conditions. Buffer CE4 is strongly denaturing, so the final protein fraction 4 may not be used for immunoprecipitation.

 

FAQ ID -855
How do I perform an Acetone Precipitation for concentrating and desalting protein samples?

The following protocol is suitable for concentrating and desalting protein samples for downstream applications such as 2D-PAGE:

  • Add four volumes of ice-cold 100% acetone to the protein fraction and incubate for 15 minutes on ice
  • Centrifuge for 10 minutes at 12,000 x g in a pre-cooled microcentrifuge at 4°C
  • Discard the supernatant and air dry the pellet
  • Resuspend the pellet in an appropriate sample buffer required for the downstream application

You will find this protocol also in the handbooks for QIAGEN's QProteome Protein Fractionation Kits.

FAQ ID -1035
Which fraction will contain endosomal, microsomal and lysosomal proteins using the Qproteome Cell Compartment Kit?
Endosomal, microsomal and lysosomal proteins will be present in membrane protein fraction 2, as organelles remain intact after addition of Buffer CE1 during the first fractionation step with the Qproteome Cell Compartment Kit.
FAQ ID -808
Which fraction will contain soluble mitochondrial proteins using the Qproteome Cell Compartment Kit?
Soluble mitochondrial proteins will be present in membrane protein fraction 2 when using the Qproteome Cell Compartment Kit.
FAQ ID -839