Vapor-Lock
作为PCR的覆盖物
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Vapor-Lock (50 ml)
Cat. No. / ID: 981611
50 ml Vapor-Lock (10–40 µl/reaction)
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Vapor-Lock是Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪的配件。
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Features
- 创新的疏水性、低粘度的PCR封装屏障
- 保证real-time PCR等应用获得高成功率
- 无需使用管帽，加快反应体系构建
Product Details
Vapor-Lock是一种创新的疏水性、低粘度的PCR密封介质。只需10 µl易于吸取的Vapor-Lock就可形成有效的屏障。Vapor-Lock覆盖反应液，可避免蒸发，且无需管盖。与矿物油不同，Vapor-Lock不会污染或抑制PCR反应。
Performance
使用Vapor-Lock覆盖反应液无需管盖。在比较CT值的实验中，有管盖的反应与无管盖使用Vapor-Lock覆盖的反应，得到的结果相同（参见" Vapor-Lock eliminates need for tube caps"）。
小反应体积（如384孔板中的反应体积）通常重复性不好，而且在很多real-time仪器上都很难成功运行。然而，Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪在运行时可持续离心样本，使反应液保持在管底部（参见" Principle of Vapor-Lock"）。处理小反应体积时，避免蒸发非常重要。Vapor-Lock可防止蒸发，已成功用于低至5 µl的反应体系的扩增（参见" Successful amplification using small reaction volumes"）。
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Principle
进行热循环时，反应液可能蒸发，导致反应体积和反应组分浓度的变化。Vapor-Lock可阻止蒸发，在定量real-time PCR和高分辨率熔解（HRM）等精确应用中保证高成功率。Vapor-Lock的外观和性能像水溶缓冲液。它位于水相上层，在水相的上方形成一层（参见" Principle of Vapor-Lock"）。Vapor-Lock低粘度、低比重，允许超过约1 µl体积的液滴轻松穿过Vapor-Lock层，进入下层的水相中。
在联管或多孔孔板中处理众多样本时，需要较长的反应体系构建时间，这增加了样品蒸发的可能性，可能导致实验无法成功。Vapor-Lock完全无需管盖，可加快反应体系构建。Vapor-Lock覆盖样本，防止蒸发，提高结果的可靠性。
与矿物油不同，Vapor-Lock不会污染或抑制PCR反应。Vapor-Lock的背景荧光不超过一个荧光单位（参见" Minimal autofluorescence of Vapor-Lock"）。
Vapor-Lock可与QIAgility仪器完全兼容，用于高精确度、自动化的反应体系构建。Vapor-Lock非常适合与Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪配合使用。
| 特征 | 详细说明 |
|---|---|
| 物理性质 | 不影响PCR；无已知的污染物，包括DNA、RNA、酶、金属、盐或其他微量元素 |
| 纯度 | 合成的高分子聚合物；疏水、无色、无味和无毒 |
| 自发荧光 | 从紫外到红外都未检测到（激发36–680 nm；发射460–712 nm） |
| 粘性 | ≥5 centistoke |
| 水汽压 | <1 mm Hg |
| 沸点 | >120°C |
| 燃点 | <125°C |
| 溶解度 | <100 ppb |
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Procedure
Vapor-Lock可用于手动和自动化反应体系构建。推荐在加入各种反应组分之前向反应管中加入Vapor-Lock。Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪运行时的轻微离心，可使Vapor-Lock和水溶反应组分完全分成两层（如Vapor-Lock在上层，反应混合液在下层）。如果不使用Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪，我们推荐在循环之前对样本稍加离心。
Applications
Vapor-Lock适合于PCR和HRM应用，包括：
- 基因表达分析
- 基因分型
- 突变筛选
Supporting data and figures
Successful amplification using small reaction volumes.
Human genomic DNA was used as template for amplification of the human bcl-2 oncogene. The total reaction volume was 5 µl. Reactions were performed in uncapped 0.1 ml Strip Tubes with (red) and without (blue) a 10 µl overlay of Vapor-Lock. Five replicate reactions were performed. Data was acquired on the green channel. Vapor-Lock overlay was essential for amplification success of the reactions. Only samples using the Vapor-Lock overlay resulted in detectable amplification (mean CT = 26.23, SD = 0.10).
Resources
试剂盒操作手册 (1)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)
Kit Handbooks (1)
FAQ
If Vapor-Lock is used to overlay PCR reactions, which volume should be entered as reaction volume in the Rotor-Gene Q Software?
Can Vapor-Lock be used with samples processed on the QIAgility?