miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit

• 无需苯酚，从人、小鼠或大鼠血清和血浆样本中分离miRNA
• 简单可靠的自动化处理，可节省时间和成本
• 可直接用于任何下游应用的高质量 miRNA
• 从少量起始样本中实现稳定的 miRNA 产量

miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit 设计用于在 QIAcube HT 上从少量血清和血浆中自动高通量纯化游离总 RNA（主要是 miRNA 和其他小 RNA）。采用成熟可靠的 RNeasy 硅胶膜技术，以便捷的 96 孔规格进行操作，有效去除污染物和抑制剂，从而获得可直接用于下游分析的高质量 RNA。

miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit 是 miRNeasy Serum/Plasma Advanced Kit 的中高通量版本，使用无酚分离技术，提供与手工法试剂盒相当产量和质量的 RNA（见图 使用等体积样本时性能与手工法试剂盒相当， RNA 用量相等时性能与手工法试剂盒相当）。miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit 能从 50 µl 至 200 µl 的人和动物血清及血浆样本中高效分离总 RNA（包括 miRNA）（ 处理不同样本量的血浆）。该试剂盒兼容大多数采血装置（见图 与不同采血管的兼容性）。该无酚方案采用易于自动化操作的 96 孔板离心柱技术，可显著减少手动操作时间。与其他供应商的试剂盒不同，miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit 将易用性与无酚方案相结合，同时不影响 RNA 质量或产量（见图 相当或更高的产量和性能）。

miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit 可使用 QIAcube HT 仪器从 20–200 µl 人或动物血浆中自动纯化游离总 RNA（主要是 miRNA 和其他小 RNA）。硅胶膜的选择性结合特性与高通量 96 孔板相结合，可在 QIAcube HT 仪器上全自动同时处理 24–96 个样本。该试剂盒将基于胍盐的样本裂解、抑制剂去除步骤和基于硅胶膜纯化总 RNA 相结合。

该系统提供两种方案，一种是将蛋白沉淀步骤中的裂解物转移到 RNeasy 96 孔板上的转移方案，另一种是从裂解物中提取包括miRNA 在内的游离总RNA 分离方案。这些程序产生的高质量 RNA 在下游应用中表现出色。

裂解步骤需在含硫氰酸胍的高度变性条件下手动操作，以即时灭活 RNase，并确保纯化完整的 RNA（见图  miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit 程序）。

运行开始后，需向含 RNA 的上清液中加入异丙醇，为大约 18 个核苷酸 (nt) 以上的所有 RNA 分子提供适当的结合条件。然后将样本（手动或自动）转移到 RNeasy 96 孔板的孔中。总 RNA 结合，污染物被高效洗除。然后在无 RNase 水中洗脱高质量 RNA，便可直接用于任何下游应用。

miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit 可从血浆或血清中分离总游离的和外泌体 RNA。下游应用包括：

• 生物标志物发现
• 表达谱分析
• 高通量测序
• 定量，实时定量 RT-PCR
• 微阵列分析