用于在最快速度下最方便地纯化多达 10 mg 转染级质粒 DNA
目录编号 / ID. 12943
QIAGEN Plasmid Plus Kits 可超速大规模纯化多达 10 mg 的高纯度质粒 DNA。由于采用真空歧管，可并行纯化多达 24 个样本，减少了手动操作时间。洗脱体积小，可获得高浓度质粒 DNA，无需乙醇沉淀即可直接使用。QIAGEN Plasmid Plus Kits 还配有专用的洗涤缓冲液以减少内毒素。获得的质粒 DNA 非常适合多种应用，包括转染到敏感细胞系中。
为获得最佳效果，建议将本产品与 QIAvac 24 Plus 一起使用。
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QIAGEN Plasmid Plus 技术具有与阴离子交换技术相同的性能和质量。QIAGEN Plasmid Plus 柱独特的结合化学技术可确保每次都能获得纯净的质粒 DNA。QIAGEN Plasmid Plus Kits 附带高产方案和额外的缓冲液量。可获得高达 10 mg (Giga)、
2 mg (Mega)、1 mg (Maxi) 和 250 µg (Midi) 的高纯度质粒 DNA，不含 RNA、蛋白质和基因组 DNA 等污染物（见图“ 使用 QIAGEN Plasmid Plus Kits (QPP) 确保高产量”和“ 分析色谱图”）。
内毒素又称脂多糖或 LPS，是 E. coli 等革兰氏阴性菌的细胞膜成分，在质粒纯化的裂解步骤中释放。内毒素可诱导免疫反应的非特异性激活，因此是转染实验设置中的一个不可控变量，会影响结果的结局和重复性，令其难以比较和解读。
试剂盒中提供的内毒素洗涤缓冲液可将细菌内毒素降至通常低于 1 EU/μg DNA 的水平。（内毒素水平可能因宿主菌株、培养基和细胞密度而异。如果细胞密度很高，内毒素水平可能会略高，范围在 1–3 EU/μg DNA 不等。）这使质粒 DNA 适用于多种应用，包括转染到敏感细胞系中（见图“ 使用 QIAGEN Plasmid Plus Kits 时的内毒素水平”、“ 使用不同分离方法时的内毒素水平”和“ 敏感细胞系中的高效转染”）。
QIAGEN Plasmid Plus Kits 为大规模质粒制备提供了最便捷的方法。QIAGEN Plasmid Plus 柱的设计和独特结合化学技术使得可以基于新颖的化学特性实现简单的结合-洗涤-洗脱程序。该程序使这些试剂盒成为目前最快速的大规模制备试剂盒——20 分钟即可完成大规模和中规模制备。所得质粒 DNA 浓度高，可立即用于后续应用，无需进一步的乙醇沉淀。因此，质粒 DNA 非常适合于只需要少量反应的应用。
试剂盒中还包括 LyseBlue，这是一种可选的颜色指示剂，可直观识别缓冲液的最优混合状态。这样可以避免常见的处理错误，这些错误会导致细胞裂解效率低下以及 SDS、基因组 DNA 和细胞碎片沉淀不完全。通过简单的颜色变化，这种独特的缓冲液添加剂可确保达到最优细胞裂解和中和效果，从而最大限度地提高产量。
功能 | Plasmid Plus Giga Kit | Plasmid Plus Mega Kit | Plasmid Plus Maxi Kit | Plasmid Plus Midi Kit |
|---|---|---|---|---|
| 应用 | 大多数细胞系的转染、克隆、酶限制、 体外翻译/转录、测序 | 大多数细胞系的转染、克隆、酶限制、 体外翻译/转录、测序 | 大多数细胞系的转染、克隆、酶限制、 体外翻译/转录、测序 | 大多数细胞系的转染、克隆、酶限制、 体外翻译/转录、测序 |
| 培养体积/起始材料 | 2500 ml 培养液量 | 500 ml 培养液量 | 50–200 ml 培养液量 | 25–50 ml 培养液量 |
| 最终 DNA 浓度 | ≥1 µg/µl | ≥1 µg/µl | ≥1 µg/µl | ≥1 µg/µl |
| 质粒类型 | 质粒、柯斯质粒 | 质粒、柯斯质粒 | 质粒、柯斯质粒 | 质粒、柯斯质粒 |
| 处理 | 手动（离心和真空）、并行处理 | 手动（离心和真空）、并行处理 | 手动（离心和真空）、并行处理 | 手动（离心和真空）、并行处理 |
| 每次运行的样本数；通量 | 每次运行 1 至 12 个样本 | 每次运行 1 至 12 个样本 | 每次运行 1 至 24 个样本 | 每次运行 1 至 24 个样本 |
| 技术 | 先进的二氧化硅技术（非离液型），减少内毒素 | 先进的二氧化硅技术（非离液型），减少内毒素 | 先进的二氧化硅技术（非离液型），减少内毒素 | 先进的二氧化硅技术（非离液型），减少内毒素 |
| 每次运行的时间 | 50 分钟 | 40 分钟 | 20 分钟 | 20 分钟 |
| 产量 | 最多 10 mg | 最多 2.5 mg | 最多 1 mg | 最多 250 µg |
QIAGEN Plasmid Plus Kits 中提供的 QIAfilter 滤芯可快速澄清裂解物。只需一步即可将澄清裂解物载入柱中，节省了时间。真空歧管（如 QIAvac 24 Plus）用于抽吸澄清裂解物和随后的洗涤缓冲液，使其穿过 QIAGEN Plasmid Plus 柱。膜的洗涤和干燥完成后，通过离心对高浓度 DNA 进行小体积洗脱（见流程图“ QIAGEN Plasmid Plus 程序”）。
QIAGEN Plasmid Plus Kits 提供的转染级质粒 DNA 非常适合所有应用，诸如：
