Ultrapure 100 Buffer Set

用于配合Ultrapure 500 Resin使用的缓冲液组合

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Ultrapure 100 Buffer Set

Cat. No. / ID:  11910

Buffers P1, P2, P3, QBT, QC, QN, ER, TE, endotoxin-free water, RNase A; for preparation of up to 100 mg plasmid DNA
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Ultrapure 100 Buffer Set 旨在用于分子生物学应用。该产品不能用于疾病诊断、预防和治疗。

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Features

  • 内毒素含量低于0.1 EU/µg

Product Details

Ultrapure 100 Buffer Set是配合Ultrapure 500 Resin使用的缓冲液组合,可轻松高效纯化至多100 mg不含内毒素(<0.1 EU/µg DNA)的质粒DNA。其使用QIAGEN阴离子交换技术,并具有内毒素去除技术,产物DNA纯度很高。

Performance

使用Ultrapure 100 Buffer Set可纯化多至100 mg的不含内毒素的质粒DNA,该系统结合了QIAGEN阴离子交换技术与内毒素去除技术,可用于制备超纯DNA。其卓越的分离性能可确保制备的DNA纯度高,不低于通过连续两轮CsCl梯度离心制备的DNA纯度。

Ultrapure 100 Buffer Set提供的用于交换树脂的缓冲液,经验证其所含内毒素含量均低于10 EU/ml(BioWhittaker Kinetic-QCLTest验证)。

Principle

纯化的质粒DNA中的内毒素污染水平取决于纯化方式。硅胶纯化的DNA表现出极高的内毒素污染水平。使用QIAGEN、QIAfilter和HiSpeed的质粒DNA纯化试剂盒,以及通过两次CsCl超速离心所制备的DNA纯度很高,内毒素污染水平相对较低。QIAGEN Ultrapure 100 system含有内置的内毒素去除步骤,纯化得到的质粒DNA的内毒素含量低于0.1 EU/µg。

内毒素,也被称为脂多糖或LPS,是大肠杆菌等革兰氏阴性菌细胞膜的组成成分之一(参见" Bacterial cell wall")。在质粒纯化的裂解过程中,内毒素释放出来,对于内毒素敏感的细胞系,可严重降低其转染效率。另外内毒素会与DNA竞争转染试剂,影响质粒DNA的摄取量。内毒素还会诱导巨噬细胞和B细胞等免疫细胞发生非特异性免疫活化反应,导致对转染结果的错误解读,包括诱导合成蛋白质和脂质,如IL-1和前列腺素。总的来说,内毒素在转染反应中是不可控变量,影响反应结果及结果的重复性,使结果难以比较和分析。在基因治疗研究中,内毒素会导致内毒素休克综合症和补体级联反应,影响研究结果。

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Procedure

细菌菌体在碱性环境下裂解,并通过离心澄清裂解液(参见" Ultrapure 100 procedure")。使用专用的Endotoxin Removal Buffer除去内毒素,并将裂解液上载到Ultrapure 500 Resin。
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Applications

Ultrapure 100 Buffer Set配合Ultrapure 500 Resin纯化的质粒DNA,其纯度相当于两次CsCl梯度离心所纯化的DNA的纯度。简单的内毒素去除步骤可确保纯化的DNA所含内毒素不超过0.1 EU/µg DNA。纯化的DNA适用于多种敏感的应用,包括:

  • 质粒介导的基因沉默
  • 转染
  • 基因治疗研究

Supporting data and figures

Resources

快速启动实验方案 (1)
试剂盒操作手册 (1)
安全数据表 (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)
Kit Handbooks (1)
Quick-Start Protocols (1)