QIAamp DNA Blood Mini Kit
For purification of up to 12 µg genomic, mitochondrial, or viral DNA from blood and related body fluids
- Rapid purification of high-quality, ready-to-use DNA
- No organic extraction or alcohol precipitation
- Consistent, high yields
- Complete removal of contaminants and inhibitors for reliable results
The QIAamp DNA Blood Mini Kit provides silica-membrane-based DNA purification. The QIAamp DNA Blood Mini Kit is designed for processing up to 200 μl fresh or frozen human whole blood. QIAamp Mini spin columns can be easily processed in a centrifuge or on vacuum manifolds. Purification of DNA using the QIAamp DNA Blood Mini Kit can be fully automated on the QIAcube Connect.
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QIAamp DNA Blood Mini Kit (50)
For 50 DNA minipreps: 50 QIAamp Mini Spin Columns, QIAGEN Protease, Reagents, Buffers, Collection Tubes (2 ml)
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QIAamp DNA Blood Mini Kit (250)
For 250 DNA minipreps: 250 QIAamp Mini Spin Columns, QIAGEN Protease, Reagents, Buffers, Collection Tubes (2 ml)
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QIAamp DNA Blood Mini Kit は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。
QIAamp Spin Column の操作手順|保存血液のアポトーシスバンド|長いフラグメントのPCR増幅|RFLP分析による父子鑑定|The QIAcube.|
至適化済みのバッファーはサンプルを溶解、核酸を安定化し、QIAampメンブレンへのDNAの選択的な吸着を増大する。ライセートにアルコールを添加し、QIAamp Spin Column にアプライする。洗浄バッファーにより不純物を除去し、精製した即使用可能なDNAを水または低塩濃度バッファーで溶出する。全処理に要する操作時間は、わずか20分である(溶解時間はサンプルによって異なる)。|4 ℃で1週間保存した血液8サンプルからのゲノムDNAの電気泳動。DNAはQIAamp DNA Blood Mini Kitを用いて精製した。血液を4℃で保存した場合、アポトーシスによりDNAは急速に分解される。これらのサンプルにおいてアポトーシスによる典型的なラダーパターンが見られる。M1:ラムダHindIIIマーカー; M2:100 bpラダー|血液から分離したゲノムDNAにおけるヒトALDH1遺伝子の10 kbフラグメントの増幅結果。DNAは従来の調製法(フェノール)またはQIAamp DNA Blood Maxi Kit(QIAamp)で精製した。これらのPCR産物は直接シークエンシングに使用した。M:1 kbラダー|QIAamp DNA Blood Mini Kitを用いて血液から精製したDNAによる3組の父子鑑定。1:母親、2:子、3:断定された父親、4:子 + 断定された父親M:マーカー各レーンに3 µgのDNAをロードした。結果:Aは父親でないが、B と Cは父親であると判断した。(データ提供:J. James, Gene Proof Technologies, Nashville, TN, USA)||
原理
No phenol–chloroform extraction is required. DNA binds specifically to the QIAamp silica-gel membrane while contaminants pass through. PCR inhibitors, such as divalent cations and proteins, are completely removed in two efficient wash steps, leaving pure nucleic acid to be eluted in either water or a buffer provided with the kit. QIAamp DNA Blood technology yields genomic, mitochondrial, or viral DNA from blood and related body fluids ready to use in PCR and blotting procedures.
操作手順
The QIAamp DNA Blood Mini Kit simplifies isolation of DNA from blood and related body fluids with fast spin-column or vacuum procedures (see flowchart "procedure"). Fresh and frozen whole blood with common anticoagulants, such as citrate, EDTA, and heparin, may be processed. The QIAamp DNA Blood Mini Kit processes sample sizes of up to 200 µl, with a preparation time of 20–40 minutes. The typical yield from 200 µl healthy whole blood is 4–12 µg, with an elution volume of 50–200 µl. The QIAamp DNA Blood Mini Kit procedure is automatable (see figure "QIAcube").
QIAamp sample preparation technology is fully licensed.
Vacuum processing
With the QIAamp DNA Blood Mini Kit, blood can be processed by vacuum instead of centrifugation, for greater speed and convenience in DNA purification. QIAamp mini spin columns are accommodated on the QIAvac 24 manifold using VacValves and VacConnectors. VacValves should be used if sample flow rates differ significantly, to ensure consistent vacuum. Disposable VacConnectors are used to avoid any cross-contamination. Use of VacConnectors also allows these QIAamp spin procedures to be performed on QIAvac 6S with QIAvac Luer Adapters.
アプリケーション
The QIAamp DNA Blood Mini Kit provides proven QIAamp technology for purification of DNA from a variety of materials using Mini spin columns with 2.0 ml collection tubes. Sample sources include:
Fresh and frozen whole blood or buffy coat
Plasma or serum
Bone marrow
Lymphocytes
Platelets
Body fluids
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Feature
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Specifications
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Applications
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PCR, long-range PCR, Southern blotting
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Elution volume
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50–200 µl
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Format
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Spin column
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Main sample type
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Whole blood, body fluids
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Processing
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Manual (centrifugation or vacuum)
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Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein
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Genomic DNA, mitochondrial DNA, viral DNA
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Sample amount
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1–200 µl
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Technology
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Silica technology
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Time per run or per prep
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20–40 minutes
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Yield
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4–12 µg
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Second edition — innovative tools
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画像
QIAamp Spin Column の操作手順
至適化済みのバッファーはサンプルを溶解、核酸を安定化し、QIAampメンブレンへのDNAの選択的な吸着を増大する。ライセートにアルコールを添加し、QIAamp Spin Column にアプライする。洗浄バッファーにより不純物を除去し、精製した即使用可能なDNAを水または低塩濃度バッファーで溶出する。全処理に要する操作時間は、わずか20分である(溶解時間はサンプルによって異なる)。
保存血液のアポトーシスバンド
4 ℃で1週間保存した血液8サンプルからのゲノムDNAの電気泳動。DNAはQIAamp DNA Blood Mini Kitを用いて精製した。血液を4℃で保存した場合、アポトーシスによりDNAは急速に分解される。これらのサンプルにおいてアポトーシスによる典型的なラダーパターンが見られる。M1:ラムダHindIIIマーカー; M2:100 bpラダー
長いフラグメントのPCR増幅
血液から分離したゲノムDNAにおけるヒトALDH1遺伝子の10 kbフラグメントの増幅結果。DNAは従来の調製法(フェノール)またはQIAamp DNA Blood Maxi Kit(QIAamp)で精製した。これらのPCR産物は直接シークエンシングに使用した。M:1 kbラダー
RFLP分析による父子鑑定
QIAamp DNA Blood Mini Kitを用いて血液から精製したDNAによる3組の父子鑑定。1:母親、2:子、3:断定された父親、4:子 + 断定された父親M:マーカー各レーンに3 µgのDNAをロードした。結果:Aは父親でないが、B と Cは父親であると判断した。(データ提供:J. James, Gene Proof Technologies, Nashville, TN, USA)
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