QIAGEN Genomic-tips for Genomic DNA Extraction

광범위한 샘플에서 최대 20µg, 100µg 또는 500µg의 고분자량 DNA 분리용

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QIAGEN Genomic-tip 20/G

카탈로그 번호 / ID.   10223

컬럼 25개
컬럼 유형
20/G
100/G
500/G
QIAGEN Genomic-tips은/는 분자생물학 분야에 사용하기 위한 것입니다. 이 제품들은 질병의 진단, 예방, 또는 치료 목적으로 사용할 수 없습니다.

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특징

  • 기계적 절단이 거의 발생하지 않아 최대 150kb 크기의 고분자량 DNA를 효율적으로 분리할 수 있습니다.
  • 페놀이나 클로로포름 무사용 추출
  • 여러 샘플을 편리하게 병행 처리

제품 세부 정보

QIAGEN Genomic-tips는 중력류, 음이온 교환 팁으로, 광범위한 생물학적 샘플에서 유전체 DNA를 효율적으로 정제할 수 있습니다. 정제된 DNA의 크기는 최대 150kb이며 평균 크기는 50~100kb입니다

성능

QIAGEN Genomic-tip 절차는 매우 섬세하여 DNA 단편화가 거의 발생하지 않습니다. QIAGEN Genomic-tips로 정제된 DNA는 크기가 최대 150kb이며, 평균 길이는 50~100kb입니다(그림 '최대 150kb의 유전체 DNA' 참조). 이 DNA에는 RNA, 단백질, 대사산물 등 오염 물질이 전혀 없으며 A260 / A280 비율은 1.7~1.9입니다.

QIAGEN Genomic-tips는 그 어떤 준비 요구에도 맞게 다양한 크기로 제공되며 샘플 유형별 유전체 DNA 준비에 대한 상세한 프로토콜이 포함된 포괄적인 핸드북과 함께 제공됩니다. 혈액, 조직, 배양 세포, 효모 및 박테리아에 대한 특정 용해 완충액과 기타 모든 필수 완충액은 유전체 DNA 완충액 세트(별도 구매 가능)로 제공됩니다.

정제된 DNA가 직접 박테리아 유전체 염기서열 분석에 사용되었습니다(그림 ' 박테리아 유전체 DNA의 직접 염기서열 분석' 참조).

QIAGEN Genomic-tip 사양

샘플 출처 수율(µg)
  Genomic-tip 20/G Genomic-tip 100/G Genomic-tip 500/G Genomic-tip 20/G Genomic-tip 100/G Genomic-tip 500/G
전혈(인간) 1ml 5ml 20ml 15~20 80~100 350~400
배양 세포(HeLa) 5 x 106 2 x 107 1 x 108 15~20 80~100 350~450
조직(간) 15mg 80mg 350mg 15~20 80~100 350~450
효모(S. cerevisiae) 1ml 5ml 20ml 18~20 85~95 350~450
그람음성 세균(E. coli) 0.6~1.2ml 3~6ml 15~30ml 16~20 85~95 300~400
그람양성 세균(B. subtilis) 1.2~1.8ml 6~9ml 30~45ml 16~20 85~95 300~400

원리

QIAGEN Genomic-tips는 페놀이나 클로로포름을 사용하지 않고도 다양한 생물학적 샘플에서 고분자량 DNA를 분리하기 위해 독자적인 QIAGEN 음이온 교환 기술을 사용합니다. 용해 완충액은 다양한 샘플 유형에 맞게 최적화되어 있으며, 핵산 분해 효소, 히스톤, DNA 결합 단백질과 같은 단백질은 물론, 감염성이 있는 바이러스 입자도 즉각 변성시킵니다. 완충액의 pH 및 저염 조건 하에서 DNA는 칼럼 내 QIAGEN 레진에 결합하게 됩니다. 동시에 단백질, 탄수화물, 대사산물 등 다른 세포 구성 요소도 통과해 흐릅니다. 정제 DNA는 고염도 완충액에서 용출됩니다. Genomic-tips는 중력류로 작동하며, 방치해도 마르지 않습니다. 따라서 실제 작업에 필요한 시간이 최소화되고 여러 샘플을 동시에 처리하는 데 이상적인 절차입니다.

절차

우선 샘플을 용해하고(조직 샘플을 기계적으로 파쇄) 적절한 용해 완충액에서 단백질을 동시에 변성시킵니다(흐름도 'QIAGEN Genomic-tip 절차' 참조). 그런 후 QIAGEN Protease 또는 Proteinase K를 첨가하고 적절한 배양 기간이 경과한 후 용해물을 QIAGEN Genomic-tip에 로드합니다. DNA는 컬럼에 결합하지만 다른 세포 성분은 컬럼을 통과합니다. 잔류 오염 물질을 제거하기 위한 세척 단계 후에 분자량이 큰 순수 DNA가 용출되어 이소프로판올로 침전됩니다. 전체 절차에 걸리는 수작업 시간은 세균의 경우 20분, 혈액과 배양 세포의 경우 30분, 조직과 효모의 경우 40분입니다.

응용 분야

QIAGEN Genomic-tips으로 정제된 DNA는 다음과 같은 용도에 사용하기에 적합합니다.

  • 차세대 염기서열 분석 및 긴 판독 염기서열 분석
  • RFLP 분석
  • 유전자 표적화 분석
  • 형질전환 동물 스크리닝
  • DNA 지문법 연구
  • 서던 블로팅

지원되는 데이터 및 수치

리소스

사용자 개발 프로토콜 (7)
보충 프로토콜 (1)
This protocol is designed for isolation of up to 200 μg RNA from 150 mg plant tissue or up to 1 mg RNA from 600 mg plant tissue and is for use with QIAGEN-tip 100 or QIAGEN-tip 500, respectively.
키트 안내서 (1)
안전보건자료 (1)
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)

출판물

Similarity and differences in the Lactobacillus acidophilus group identified by polyphasic analysis and comparative genomics.
Berger B; Pridmore RD; Barretto C; Delmas-Julien F; Schreiber K; Arigoni F; Brüssow H;
J Bacteriol; 2006; 189 (4):1311-21 2006 Dec 1 PMID:17142402
A genome-wide map of diversity in Plasmodium falciparum.
Volkman SK; Sabeti PC; DeCaprio D; Neafsey DE; Schaffner SF; Milner DA Jr; Daily JP; Sarr O; Ndiaye D; Ndir O; Mboup S; Duraisingh MT; Lukens A; Derr A; Stange-Thomann N; Waggoner S; Onofrio R; Ziaugra L; Mauceli E; Gnerre S; Jaffe DB; Zainoun J; Wiegand RC; Birren BW; Hartl DL; Galagan JE; Lander ES; Wirth DF;
Nat Genet; 2006; 39 (1):113-9 2006 Dec 10 PMID:17159979
Development and evaluation of a loop-mediated isothermal amplification method for rapid diagnosis of Bordetella pertussis infection.
Kamachi K; Toyoizumi-Ajisaka H; Toda K; Soeung SC; Sarath S; Nareth Y; Horiuchi Y; Kojima K; Takahashi M; Arakawa Y;
J Clin Microbiol; 2006; 44 (5):1899-902 2006 May PMID:16672435
Arsenic detoxification and evolution of trimethylarsine gas by a microbial arsenite S-adenosylmethionine methyltransferase.
Qin J; Rosen BP; Zhang Y; Wang G; Franke S; Rensing C;
Proc Natl Acad Sci U S A; 2006; 103 (7):2075-80 2006 Feb 1 PMID:16452170
Validation of a 21-locus autosomal SNP multiplex for forensic identification purposes.
Dixon LA; Murray CM; Archer EJ; Dobbins AE; Koumi P; Gill P;
Forensic Sci Int; 2005; 154 (1):62-77 2005 Jan 20 PMID:16182950

FAQ

What is the size of genomic DNA that is obtained with QIAGEN Genomic-tips?
Genomic DNA purified using QIAGEN Genomic-tips ranges in size from 20–150 kb, with an average length of 50–100 kb. Vortexing the lysate for about 20 seconds may reduce the size of the genomic DNA slightly to 20–130 kb, but can help to improve flow rates.
FAQ-142
Do you have a protocol for the purification of DNA from fruit flies?

Using Gentra Puregene Cell kit:

 

• Purification of archive-quality DNA from up to 30 Drosophila melanogaster using the Gentra Puregene Cell Kit (PG20)

• Purification of archive-quality DNA from 100 Drosophila melanogaster using the Gentra Puregene Cell Kit (PG21)

• Purification of archive-quality DNA from 300–700 Drosophila melanogaster using the Gentra Puregene Cell Kit (PG22)

 

Using the QIAGEN Genomic tips:

• Isolation of genomic DNA from flies using the QIAGEN Genomic-tip 100/G (QG05)

FAQ-1970
What do you recommend for the cleanup of genomic DNA (gDNA)?

Using QIAGEN Genomic-tips

Protocol for DNA cleanup using Genomic-tips can be found in the 'Special Applications' section of the QIAGEN Genomic DNA Handbook.

 

Using QIAamp DNA Micro kit

Up to 10ug of gDNA can be cleaned using the cleanup protocol in the QIAamp DNA Micro Handbook.

 

Using Gentra Puregene Reagents

Gentra Puregene Handbook has protocols for removal of proteins and RNA from purified gDNA in Appendix C and Appendix D respectively.

FAQ-618
Do you have a protocol for the isolation of genomic DNA from frozen clotted blood?

Yes, we have the following protocols:

  • Isolation of genomic DNA from frozen clotted whole blood using the QIAGEN Genomic-tip 100/G (QG02). TEST

You will need to prepare the required buffers according to the recipes in Appendix A of the QIAGEN Genomic DNA Handbook, or you can purchase the Genomic DNA Buffer Set containing pre-made solutions. Alternatively, the QIAGEN Blood & Cell Culture Midi Kit, containing Genomic-tips 100/G and buffers, can be used.

  • Purification of archive-quality DNA from clotted whole blood using Clotspin Baskets and the Gentra Puregene Blood Kit (PG03).
  • Purification of archive-quality DNA from clotted whole blood using the Gentra Puregene Tissue Kit or Gentra Puregene Mouse Tail Kit (PG04).
  • Purification of DNA from clotted blood using the FlexiGene DNA Kit (FG01).
FAQ-900
Do you have a protocol for isolation of genomic and viral DNA from lymphocytes using QIAGEN Genomic-tips?

Yes, please follow the User-Developed Protocol 'Isolation of genomic and viral DNA from lymphocytes using the QIAGEN Genomic-tip' (QG03). The protocol is for use with the QIAGEN Genomic-tip 20/G.

FAQ-901
Do you have a protocol for isolation of genomic and plasmid DNA from cell cultures using QIAGEN Genomic-tips?

Yes, please follow the User-Developed Protocol 'Isolation of genomic and plasmid DNA from cell cultures using the QIAGEN Genomic-tip' (QG04).

FAQ-902
Do you have a protocol for isolation of genomic DNA from flies using QIAGEN Genomic-tips?

Yes, please follow the User-Developed Protocol 'Isolation of genomic DNA from flies using the QIAGEN Genomic-tip 100/G' (QG05).

FAQ-903
Do you have a protocol for isolation of genomic DNA from insects?

Yes, we have the following protocols:

  • Isolation of genomic DNA from mosquitoes or other insects using the QIAGEN Genomic tip (QG06).
  • Purification of total DNA from insects using the DNeasy Blood & Tissue Kit (DY14).
FAQ-904
Do you have a protocol for isolation of genomic DNA from plants and filamentous fungi using QIAGEN Genomic-tips?

 Yes, please follow the User-Developed Protocol 'Isolation of genomic DNA from plants and filamentous fungi using the QIAGEN Genomic-tip' (QG08).

FAQ-905
Do you have protocols for the isolation of genomic DNA from tissue using QIAGEN-tips 2500 (Mega) and 10000 (Giga)?
Do you have a protocol for the isolation of genomic DNA from fungi?

Yes, we have the following protocols:

  • Isolation of genomic DNA from fungi (culture and blood) using the QIAamp DNA Mini Kit (QA09).
  • Isolation of genomic DNA from plants and filamentous fungi using the QIAGEN Genomic-tip (QG08).
FAQ-911