QIAquick PCR Purification Kit

QIAquick Kitでは、高塩濃度バッファーによりDNAを結合し、低塩濃度バッファーあるいは水によりDNAを溶出するシリカゲルメンブレンを利用しています。この精製法でDNAサンプルからプライマー、ヌクレオチド、酵素、ミネラルオイル、塩、アガロース、臭化エチジウム、およびその他の夾雑物が除去できます（図 “PCR反応液からのプライマーの完全な除去”）。シリカメンブレンテクノロジーにより樹脂漏れ、および懸濁液関連の問題や不便さは解消されます。それぞれの用途に応じて至適化された結合バッファーにより、種々の大きさのDNAフラグメントを選択的に吸着します。

Gel Loading Dye

より迅速で簡便なサンプル処理と解析を実現するため、ゲル電気泳動用のローディング色素が付いています。GelPilot Loading Dye は3 種類のマーカー色素（xylene cyanol、bromophenol blueおよびorange G）が入っており、短いDNAフラグメントのゲルからの流出を回避でき、アガロースゲルの泳動時間の至適化が簡単に行なえます（図 "GelPilot Loading Dye"）。

QIAquickシステムでは結合─洗浄─溶出という簡単な操作だけでDNAのクリーンアップが可能です（フローチャート"QIAquickおよびMinEluteの操作手順"参照）。結合バッファーをPCRサンプルあるいは他の酵素反応液に直接添加し、混合液をQIAquick Spin Column にアプライします。ゲル切片をpH指示薬を含んだバッファーに溶解させると、DNA 結合の至適pH を容易に決めることができます（図 “pH指示薬”）。DNAは添付のバッファー中の高塩濃度の条件下でシリカゲルメンブレンに吸着します。不純物は洗い流され、純粋なDNAを添付の低塩濃度溶出バッファー、あるいは水で溶出します。 得られたDNAは、幅広いアプリケーションに即使用可能です。

操作法

QIAquick Spin Column は2つの簡便な操作法オプションのためにデザインされました。スピンカラムは簡便な卓上型マイクロ遠心機あるいはQIAvac 24 Plus のようなルアーコネクター付き吸引装置で使用できます。QIAquick PCR Purification Kitは他のQIAGENスピンカラムを利用したキット同様にQIAcubeでの完全自動化が可能で、標準化された再現性の高い結果が得られます（図 "Spin Column操作オプションA、 B、 C、D、およびE"）。

QIAquickシステムで精製したDNAフラグメントは、シークエンシング、マイクロアレイ解析、ライゲーション、トランスフォーメーション、制限酵素解析、標識反応、マイクロインジェクション、PCR、in vitro転写反応などのアプリケーションに即使用可能です。