細胞、組織、酵母からの最大100 μgまでのトータルRNA精製用
  • 迅速な操作により短時間で高品質なトータルRNAを実現
  • あらゆるダウンストリームアプリケーションに即使用可能なRNA
  • 少量のスタートサンプルで一定したRNA収量
  • フェノール/クロロホルム抽出、CsCl勾配遠心分離、LiClやエタノール沈殿等全て不要
RNeasy Mini Kitはシリカゲルメンブレンを用いたRNeasy Spin Column(スピンカラム結合容量はRNA 100 µg)で細胞、組織、酵母から高品質RNAを迅速に精製します。組織サンプルはRNAlater RNA Stabilization ReagentまたはAllprotect Tissue Reagentで簡便に安定化され、TissueRuptorあるいはTissueLyserシステムで効率的に破砕されます。RNeasy Mini Kitを用いたRNA精製はQIAcubeで完全自動化が可能です。より少量あるいは多量のサンプルには、RNeasy Micro Kit(スピンカラム結合容量は45 µg RNA)、RNeasy Midi Kit(スピンカラム結合容量は1 mg RNA)、RNeasy Maxi Kit(スピンカラム結合容量は6 mg RNA)をご使用ください。
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RNeasy Mini Kit (50)
50 RNeasy Mini Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), RNase-free Reagents and Buffers
74104
¥34,500
RNeasy Mini Kit (250)
250 RNeasy Mini Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), RNase-free Reagents and Buffers
74106
¥148,000

RNeasy Mini Kit  は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。


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RNeasy Mini操作手順|各種サンプルから得られた高品質RNA|わずか100個の細胞から得られたRNAのRT-PCR|RNeasy Mini Spin Column|
RNeasy Mini Kitを用いて精製したトータルRNAは、高品質であり、多くのダウンストリームアプリケーションに適している。プロトコールは、部分的に精製したRNA、in vitro転写物、酵素反応液から得られたRNAのクリーンアップにも含まれている。酵母サンプルに必要なlyticase、zymolase、ガラスビーズは付属されていない。サンプルから精製されるRNAの量は、サンプルソースの発達段階、種、増殖条件により異なる可能性がある。RNeasyは200塩基以上のRNAのみを精製するので、精製物には5S rRNA、tRNAやその他の低分子RNAを含まない。|RNeasy Maxi Kitで精製したトータルRNAのホルムアルデヒドアガロースゲルおよびノーザンブロット。各種サンプルから分離したトータルRNA 10 µgを各レーンにロードした。全ての組織はマウスから採取した。酵母:Saccharomyces cerevisiae、大腸菌株:HB101。32P標識プローブは、(G)GAPDH、(E)翻訳伸長因子EF-1α、(O)外膜タンパク質Aの配列を認識した(データ提供:EはP. Philippsen, University of Basel, Switzerland、OはU. Henning, Max Planck Institute of Biology, Tübingen, Germany)。B.subtilisは調査しなかった。M:0.24~9.5kb RNAラダー。胎児、Huh7、およびHeLa細胞レーンの7.5 kbバンド(矢印)は核内RNA前駆体。|表記の数のHeLa細胞からRNeasy Mini Kitを用いて精製したトータルRNAのRT-PCR。溶出液10 µl(1/5)は、RNaseフリーDNaseで分解後、オリゴ-dTプライマーを用いて逆転写反応を行なった。このcDNAミックスの2.5 µl(1/20)を50 µlのPCR反応に使用した。GAPDHのA 452 bpフラグメントが増幅された。C-:ネガティブコントロール、C+:ポジティブコントロール、M:100 bpラダー。|RNeasy Mini Kitに添付されているRNeasy Mini Spin Column。|
パフォーマンス

最高30 mgの動物またはヒト組織、100~1 x 107個の動物またはヒト細胞、または酵母から、RNeasy Mini Kitを用いて簡単にトータルRNAを精製できます(表および図"わずか100個の細胞から得られたRNAのRT-PCR"および"各種サンプルから得られた高品質RNA")。

RNeasy Mini Kitを用いて得られたトータルRNA収量
由来スタートサンプル平均収量(µg)

動物細胞
LMH
HeLa
COS-7
リンパ球(未刺激)


1 x 106
1 x 106
1 x 106
1 x 106


12
15
35
0.5

マウス組織
肝臓

脾臓


10 mg
10 mg
10 mg

40
10
35

酵母細胞
S. cerevisiae


1 x 107

25
 

原理

RNeasy Mini Kitは、少量のサンプルに対応し、効率的にトータルRNAを精製します。グアニジンイソチオシアネート溶解と、シリカゲルメンブレンによる迅速な精製を組み合わせたRNeasyテクノロジーにより、トータルRNA精製を簡便に行なうことができます。RNeasy Kitで精製した高品質RNAはほとんどDNAを含みません。

操作手順
RNeasy Mini Kitを用いて、10~1 x 107の動物またはヒト細胞、0.5~30 mgの動物またはヒト組織、<5 x 107の酵母細胞などから、簡単にトータルRNAを精製できます。まずサンプルを溶解し、その後ホモジナイズします。ライセートにエタノールを添加して最適な結合条件にします。その後ライセートをRNeasyシリカゲルメンブレンにアプライします(図"RNeasy Mini Spin Column")。RNA(最高100 µg)はメンブレンに結合し、全ての夾雑物は効率的に洗い流されます。微量のDNAに敏感なアプリケーションを行う場合は、カラム上での簡便なDNase処理によって残存するDNAを除去できます。濃縮された高純度RNAは30~100 µlの水で溶出されます(図"RNeasy Mini操作手順")。各種のアプリケーションプロトコールを揃えています。
アプリケーション

RNeasyテクノロジーで精製したRNAのA260/280比は、1.9~2.1(10 mM Tris·Cl、pH 7.5)で、以下を含む幅広いアプリケーションに最適です。

ノーザン、ドットおよびスロットブロット
エンドポイントRT-PCR
リアルタイム定量RT-PCR
アレイ解析
Poly A+RNA調製
Feature
Specifications
Applications Northern, dot, and slot blotting, end-point RT-PCR, quantitative, real-time RT-PCR, array analysis, next-generation sequencing
Elution volume 30–100 µl
Format Spin column
Main sample type Tissue, cells
Processing Manual (centrifugation)
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein Total RNA
Sample amount 0.5–30 mg
Technology Silica technology
Time per run or per prep 20 minutes
Yield Varies

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FAQ
64
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キットハンドブック
2
RNeasy Mini Kit - For purification of total RNA from animal cells, animal tissues, bacteria, and yeast, and for RNA cleanup; RNeasy Protect Mini Kit - For immediate stabilization of RNA in harvested animal tissues and subsequent total RNA purification; RNeasy Plant Mini Kit - For purification of total RNA from plants and filamentous fungi
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RNeasy Mini Kit - 動物細胞、動物組織、バクテリア、酵母からのトータルRNA精製およびRNAクリーンアップ用
RNeasy Protect Mini Kit - 採取した動物組織からのRNAの迅速な安定化と続くトータルRNA精製
RNeasy Plant Mini Kit - 植物および糸状菌類からのトータルRNA精製用
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Supplementary Protocols
5

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Up to 1 x 109 bacteria are disrupted and homogenized by bead-milling in a guanidine-thiocyanate-containing lysis buffer. After addition of ethanol, the sample is loaded onto an RNeasy Mini spin column. Total RNA binds to the RNeasy silica-membrane, contaminants are efficiently washed away, and high-quality RNA is eluted in RNase-free water.
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マイクロダイセクションにより採取した組織サンプルからRNeasy Mini Kit を用いたRNA 分離
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User-Developed Protocols
1
One milliliter of milk contains approximately 50,000-200,000 leukocytes (with an average of approximately 100,000 leukocytes). In a BVDV-infected animal up to 1-30% of the leukocytes may be infected with the virus. Each infected leukocyte typically contains 10-10,000 BVDV entities.
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安全データシート
3
References
0