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Taq PCR Core Kit

スタンダードおよび特殊なPCR用；dNTP Mixを含む
  • PCR条件の至適化が最小限で済むQIAGEN PCR Buffer
  • 直接ゲルにロード可能なPCR バッファーでより迅速な操作
  • GC リッチなテンプレートの増幅を促進するQ-Solution
  • 簡便で取り扱いやすいフォーマット
Taq PCR Core Kitは、Taq DNA Polymerase、至適化の必要性を最小限に抑えるユニークなQIAGEN PCR Buffer、およびdNTP混合物からなる完全なキットの形で提供します。例えば、GCリッチのような”難しい”テンプレートの効率的増幅を実現するQ-Solutionも同梱されています。さらに、2 種類のマーカー色素を含むCoralLoad PCR Buffer が同梱されているので、PCR 産物を即座にゲルにアプライできます。
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製品名 Cat. no. List price:
Taq PCR Core Kit (250 U)
250 units Taq DNA Polymerase, 10x PCR Buffer, 10x CoralLoad PCR Buffer, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2, dNTP Mix
 201223
¥25,500
Taq PCR Core Kit (1000 U)
4 x 250 units Taq DNA Polymerase, 10x PCR Buffer, 10x CoralLoad PCR Buffer, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2, dNTP Mix
 201225
¥88,500
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Taq PCR Core Kit  は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。


  • Main Image Navi
CoralLoad PCR Buffer|異なったマグネシウム濃度への適応|増幅困難なテンプレートを増幅|Tm 値の異なるプライマーへの適応性|ロット間での再現性|長いPCR産物の特異的増幅|プライマーのアニーリングにおける特異性が増加|
CoralLoad PCR Buffer ([A]) は、は2種類のゲルマーカー色素を含んでおり ([B ]) 、PCR産物を即ゲルにアプライでき、DNAの泳動を簡単に可視化できる。|記載のMg2+濃度で、QIAGEN PCR BufferとTaq DNA Polymerase（QIAGEN）を用いてPCR反応を行なった。同じ条件のPCR反応を他社（Supplier AII）のPCRバッファーとTaq DNA ポリメラーゼを用いて行なった。シングルコピーのヒトプリオンタンパク遺伝子が増幅された。M：マーカー。|2種類のプライマー／テンプレートシステムにおいて1x Q-Solutionの非存在下(-)、あるいは存在下(+)でQIAGEN PCR BufferとTaq DNA Polymeraseを用いて増幅した。Q-Solutionを使用すれば、難しいテンプレートを特異的に増幅することができる。[A] ヒトアンジオテンシンレセプターII遺伝子、[B] マウスプロテインキナーゼC遺伝子、M：マーカー。|ヒト嚢胞性線維症のシングルコピー遺伝子を図に示したアニーリング温度でQIAGEN TaqDNA PolymeraseとPCR Bufferを用いて増幅した。使用したプライマーは、Tm が57.5℃ （GC 含有率：54.5％）のとき22 mer、Tm が85.2℃ （GC 含有率：78％）のとき32 merだった。反応液100 μl の10％をアガロースゲルにロードした。M：マーカー。|ターゲットテンプレート、それぞれ104、103、102 コピーに相当するヒトゲノムDNA、30 ng、3 ng、300 pgから嚢胞性繊維症のシングルコピー遺伝子のフラグメントを増幅した。Taq DNA Polymeraseの3つの異なるロットを使用し、それぞれのPCR産物は1 ％アガロースゲルで電気泳動を行なった。M：マーカー。|Taq DNA PolymeraseとQIAGEN PCR Buffer（QIAGEN）、または他社（Supplier AII）の TaqDNA ポリメラーゼとバッファーを用いて、ヒトゲノムDNAから異なる長さの3種類のフラグメントを増幅した。分析のため、各反応液の10％をゲルにロードした。同じPCR増幅の結果を示す。M：マーカー。|QIAGEN PCRバッファー中のアンモニウムイオンとカリウムイオンにより、プライマーのアニーリングにおける特異性が増加。K+ はDNA バックボーンのリン酸基（P-）に結合し、テンプレートへのプライマーアニーリングを安定化する。サーマルサイクリング条件下では、アンモニウムイオンおよびアンモニアの両方として存在するNH4+は、塩基（B）間の水素結合に相互作用するため、ミスマッチの塩基間の水素結合を不安定にする。これら2 種類の陽イオンの組み合わせ効果により、幅広い温度範囲において非特異的なプライマーテンプレート結合に対する特異的な結合の比率が高く保たれる。|
パフォーマンス

Taq PCR Core Kitは、他メーカーの試験されたキットに比べて優れており、時間のかかる至適化を必要とせずに、様々なPCRアプリケーションで確固たるPCR性能を示します。本キットには、スタンダードなPCRから特殊なPCRまで適応できる 高品質の組み換え酵素、Taq DNA Polymeraseが同梱されています（図 "Tm 値の異なるプライマーへの適応性" と"長いPCR産物の特異的増幅"）。TaqDNA Polymeraseは、全てのロットで、低コピー数のヒトゲノムDNAをターゲットとした増幅実験により、PCR特異性の厳密さや再現性をチェックするなど、広範囲な品質管理テストを受けています（図 "ロット間での再現性"）。同様にキットに含まれているQIAGEN PCR BufferとCoralLoad PCR Bufferのユニークな組成によって、最小限の至適化要求事項と様々なPCR条件で、特異性の高いPCRが可能となります（図"幅広い至適アニーリング温度"と "異なったマグネシウム濃度への適応"）。さらに、CoralLoad PCR Bufferは、PCR産物をアガロースゲルに即座にロードすることを可能にするため、比較的簡単な操作で比較的早く結果が得られます。また、キット付属のPCR 添加物、Q - Solutionを使用すれば、不適切なPCR条件を改善することができます（図 "増幅困難なテンプレートの増幅"）。

Taq DNAポリメラーゼの詳細データ

濃縮：5 units/µl
組み換え酵素:はい
基質類似体： dNTP、ddNTP、dUTP、ビオチン-11-dUTP、DIG-11-dUTP、蛍光-dNTP/ddNTP
エクステンション率72℃ で2～4 kb/分
半減期：97℃で10分、94℃で60分
増幅効率：≥105 倍
5'->3' エキソヌクレアーゼ活性：あり
余分なA付加：あり
3'->5' エキソヌクレアーゼ活性：なし
混入しているヌクレアーゼ：なし
混入しているRNase：なし
混入しているプロテアーゼ：なし
自己プライミング活性:なし

原理
Taq PCR Core Kitには、簡便かつ確実なPCRに必要なあらゆるもの、すなわち、Taq DNA Polymerase、QIAGEN PCR Buffer、CoralLoad PCR Buffer、Q-Solution、dNTP Mix、およびMgCl2が同梱されています。
Taq DNAポリメラーゼ

Taq DNAポリメラーゼ は、スタンダードなPCRから特殊なPCRまで適応できる 高品質の組み換え酵素です（図 "Tm 値の異なるプライマーへの適応性" と"長いPCR産物の特異的増幅"）。

QIAGEN PCR Buffer

革新的なQIAGEN PCR Bufferは、PCR至適化の操作を軽減することにより、時間と労力を節約するために開発されました。QIAGEN PCR Bufferは、KCl も (NH4)2SO4 も含んでいます（図"プライマーのアニーリングにおける特異性が増加"）。このユニークなバッファーによって、特異的PCRの産物を増幅しやすくなります。PCR サイクルごとのアニーリングの間、非特異的なプライマー結合に対する特異的な結合の比率が、バッファーによって高く保たれます。このPCRバッファーは、KClと (NH4)2SO4 のユニークな配合比により、従来のPCR バッファーに比べ幅広いアニーリング温度やMg2+濃度の範囲で厳密なプライマーアニーリング条件を実現します。異なるアニーリング温度あるいはMg2+ 濃度を用いて行なうPCRの至適化は、劇的に緩和され、多くの場合、不要となります（図 "幅広い至適アニーリング温度"および"異なったマグネシウム濃度への適応 "）。

CoralLoad PCR Buffer

CoralLoad PCR Bufferは、QIAGEN PCR Bufferの全ての特長を持っています。さらに、PCR反応液をアガロースゲルに直接ロードするために使用することができ、従って、ゲルローディングバッファーを別途加える必要はありません。CoralLoad PCR Bufferは従来のQIAGEN PCR Bufferと同程度の高いPCR特異性を持ち、反応の至適化は最小限に抑えられます。さらに、これに入っている2種類のマーカー色素（オレンジ色の色素と赤色の色素）により、DNAの移動距離の予測とアガロースゲルの泳動時間の至適化を容易に行なえます（図"CoralLoad PCR Buffer"）。本バッファーはピペッティングの目視化を改良し、PCR産物をゲルに直接ロードすることが可能なので、簡便性が増加します。

Q-Solution

Q-Solution は、DNAの溶解挙動を変えることで、GCリッチなテンプレート、または二次構造が複雑なテンプレートを増幅しやすくします。この試薬の添加により、しばしば最適条件ではないPCRが改善されたり、今まで得られなかったPCR産物の増幅が可能になったりします （図 "増幅困難なテンプレートをQ-Solutionにより増幅"）。DMSO や他のPCR添加物と異なり、本溶液はどのようなプライマー／テンプレートシステムでも一定の濃度で作用し、毒性もありません。

操作手順
Taq PCR Core Kitは、PCRのセットアップに必要な全てのコンポーネントを提供し、PCRに基づく多様なアプリケーションに使用することができます。キット付属のプロトコールが至適化されて、理解しやすく、簡潔ですから、PCRは確実に成功します。まだ最適化されていないPCRはキットに同様に添付されているユニークなPCR添加物Q-Solutionで簡便に最適化ができます。
アプリケーション

Taq DNA Polymeraseは以下のようなスタンダードな用途にも特殊な用途にも使用できます。

  • スタンダードな PCR
  • RT-PCR
  • スクリーニング
  • PCRによるDNAフィンガープリンティング（VNTR、STR、RAPD）
Back to order
Feature
Specifications
Applications PCR, RT-PCR, DNA fingerprinting
dNTP's included Yes
Enzyme activity 5' -> 3' exonuclease activity
Mastermix No
Reaction type PCR amplification
Real-time or endpoint Endpoint
Sample/target type Genomic DNA and cDNA
Single or multiplex Single
With/without hotstart Without hotstart

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キットハンドブック
1
Taq PCR Handbook - (EN)
For standard and specialized PCR applications with minimal optimization
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クイックスタートプロトコール
1
Taq DNA Polymerase and Taq PCR Core Kit (EN)

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MSDS
1
Safety Data Sheets
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
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画像
Ready-to-load PCR buffer
CoralLoad PCR Buffer
CoralLoad PCR Buffer ([A]) は、は2種類のゲルマーカー色素を含んでおり ([B ]) 、PCR産物を即ゲルにアプライでき、DNAの泳動を簡単に可視化できる。
A Wide Annealing-Temperature Window
異なったマグネシウム濃度への適応
記載のMg2+濃度で、QIAGEN PCR BufferとTaq DNA Polymerase（QIAGEN）を用いてPCR反応を行なった。同じ条件のPCR反応を他社（Supplier AII）のPCRバッファーとTaq DNA ポリメラーゼを用いて行なった。シングルコピーのヒトプリオンタンパク遺伝子が増幅された。M：マーカー。
Amplification of Difficult Templates with Q-Solution
増幅困難なテンプレートを増幅
2種類のプライマー／テンプレートシステムにおいて1x Q-Solutionの非存在下(-)、あるいは存在下(+)でQIAGEN PCR BufferとTaq DNA Polymeraseを用いて増幅した。Q-Solutionを使用すれば、難しいテンプレートを特異的に増幅することができる。[A] ヒトアンジオテンシンレセプターII遺伝子、[B] マウスプロテインキナーゼC遺伝子、M：マーカー。
Tolerance of Different Primer Tm Values.
Tm 値の異なるプライマーへの適応性
ヒト嚢胞性線維症のシングルコピー遺伝子を図に示したアニーリング温度でQIAGEN TaqDNA PolymeraseとPCR Bufferを用いて増幅した。使用したプライマーは、Tm が57.5℃ （GC 含有率：54.5％）のとき22 mer、Tm が85.2℃ （GC 含有率：78％）のとき32 merだった。反応液100 μl の10％をアガロースゲルにロードした。M：マーカー。
Lot-to-Lot Reproducibility.
ロット間での再現性
ターゲットテンプレート、それぞれ104、103、102 コピーに相当するヒトゲノムDNA、30 ng、3 ng、300 pgから嚢胞性繊維症のシングルコピー遺伝子のフラグメントを増幅した。Taq DNA Polymeraseの3つの異なるロットを使用し、それぞれのPCR産物は1 ％アガロースゲルで電気泳動を行なった。M：マーカー。
Specific Amplification of Long PCR Products.
長いPCR産物の特異的増幅
Taq DNA PolymeraseとQIAGEN PCR Buffer（QIAGEN）、または他社（Supplier AII）の TaqDNA ポリメラーゼとバッファーを用いて、ヒトゲノムDNAから異なる長さの3種類のフラグメントを増幅した。分析のため、各反応液の10％をゲルにロードした。同じPCR増幅の結果を示す。M：マーカー。
NH4+ and K+ cations in QIAGEN PCR buffers increase specific primer annealing
プライマーのアニーリングにおける特異性が増加
QIAGEN PCRバッファー中のアンモニウムイオンとカリウムイオンにより、プライマーのアニーリングにおける特異性が増加。K+ はDNA バックボーンのリン酸基（P-）に結合し、テンプレートへのプライマーアニーリングを安定化する。サーマルサイクリング条件下では、アンモニウムイオンおよびアンモニアの両方として存在するNH4+は、塩基（B）間の水素結合に相互作用するため、ミスマッチの塩基間の水素結合を不安定にする。これら2 種類の陽イオンの組み合わせ効果により、幅広い温度範囲において非特異的なプライマーテンプレート結合に対する特異的な結合の比率が高く保たれる。