標準的および特殊なPCR 用
- PCR条件の至適化が最小限で済むQIAGEN PCR Buffer
- 直接ゲルにロード可能なPCR バッファーでより迅速な操作
- GC リッチなテンプレートの増幅を促進するQ-Solution
- 簡便で取り扱いやすいフォーマット
Taq DNA Polymeraseには、PCR条件の至適化が最小限で済む画期的なQIAGEN PCR Bufferと、増幅困難なテンプレート（GC リッチなど）の効率的な増幅を実現する画期的なQ-Solution が含まれています。さらに2 種類のマーカー色素を含むCoralLoad PCR Buffer も同梱されているので、PCR 産物を即座にゲルにアプライできます。
fi-FI
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Product
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Cat. no.
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List price:
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Taq DNA Polymerase (250 U)
250 units Taq DNA Polymerase, 10x PCR Buffer, 10x CoralLoad PCR Buffer, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2
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201203
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Taq DNA Polymerase (1000 U)
4 x 250 units Taq DNA Polymerase, 10x PCR Buffer, 10x CoralLoad PCR Buffer, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2
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201205
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Taq DNA Polymerase (5000 U)
20 x 250 units Taq DNA Polymerase, 10x PCR Buffer, 10x CoralLoad PCR Buffer, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2
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201207
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Taq DNA Polymerase Kit (25000 U)
100 x 250 units Taq DNA Polymerase, 10x PCR Buffer, 10x CoralLoad PCR Buffer, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2
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201209
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The TaqDNA Polymerase is intended for molecular biology applications. This product is not intended for the diagnosis, prevention, or treatment of a disease.
CoralLoad PCR Buffer.|Tolerance to variable magnesium concentration.|Amplification of difficult templates.|Tolerance of different primer Tm values.|Lot-to-lot reproducibility.|Specific amplification of long PCR products.|Increased specificity of primer annealing.|
[A] CoralLoad Concentrate contains two gel-tracking dyes, enabling immediate gel loading of PCR products for [B ] easy visualization of DNA migration.|PCR amplification at the indicated Mg2+ concentrations using QIAGEN PCR Buffer and Taq DNA Polymerase (QIAGEN). The same PCR was performed in parallel using a PCR buffer and Taq polymerase from another supplier (Supplier AII). The single-copy human prion protein gene was amplified successfully in each case using the buffer and enzyme from QIAGEN. M: markers.|Two different primer-template systems were amplified in duplicate using QIAGEN PCR Buffer and Taq DNA Polymerase in the absence (–) or presence (+) of 1x Q-Solution. Q-Solution enables specific amplification of difficult templates. [A] human angiotensin receptor II gene; [B] mouse protein kinase C gene; M: markers.|The human single-copy cystic fibrosis gene was amplified with Taq DNA Polymerase and QIAGEN PCR Buffer using the indicated annealing temperatures. Primers employed were a 22mer with a Tm of 57.5°C (GC content: 54.5%) and a 32mer with a Tm of 85.2°C (GC content: 78%). For analysis, 10% of a 100 µl reaction was loaded. M: markers.|A fragment of the single-copy gene for cystic fibrosis was amplified from 30 ng, 3 ng, and 300 pg human genomic DNA corresponding to 104, 103, and 102 copies of target template, respectively. Three different lots of Taq DNA Polymerase were used and equal volumes of the PCR product were analyzed on a 1% agarose gel. M: markers.|Three different-sized products from human genomic DNA were amplified using either Taq DNA Polymerase and QIAGEN PCR Buffer (QIAGEN), or Taq polymerase and a buffer from another supplier (Supplier AII). For analysis, 10% of each reaction was loaded on the gel. Results from duplicate PCR amplifications are shown. M: markers.|Ammonium and potassium cations in QIAGEN PCR Buffers increase specificity of primer annealing. K+ binds to the phosphate groups (P–) on the DNA backbone, stabilizing the annealing of the primers to the template. NH4+, which exists both as the ammonium ion and as ammonia under thermal-cycling conditions, can interact with the hydrogen bonds between the bases (B), destabilizing the weak hydrogen bonds at mismatched bases. The combined effect of the two cations maintains the high ratio of specific-to-nonspecific primer-template binding over a wide temperature range.|
Performance
Taq DNA Polymeraseは、他メーカーの試験されたキットに比べて優れており、時間のかかる至適化を必要とせずに、様々なPCR条件で確固たるPCR性能を示します（図"Tm 値の異なるプライマーへの適応性" と"長いPCR産物の特異的増幅"）。TaqDNA Polymeraseは、全てのロットで、低コピー数のヒトゲノムDNAをターゲットとした増幅実験により、PCR特異性の厳密さや再現性をチェックするなど、広範囲な品質管理テストを受けています（図 "ロット間での再現性"）。同様にキットに含まれているQIAGEN PCR BufferとCoralLoad PCR Bufferのユニークな組成によって、最小限の至適化に必要な事項と様々なPCR条件で、特異性の高いPCRが可能となります（図"幅広い至適アニーリング温度"と "異なったマグネシウム濃度への適応"）。さらに、CoralLoad PCR Bufferは、PCR産物をアガロースゲルに即座にロードすることを可能にするため、比較的簡単な操作で比較的早く結果が得られます。また、キット付属のPCR 添加物、Q－Solutionを使用すれば、不適切なPCR条件を改善することができます（図 "増幅困難なテンプレートの増幅"）。
Taq DNA Polymeraseの詳細データ
濃縮：5 units/µl
組み換え酵素:はい
基質類似体： dNTP、ddNTP、dUTP、ビオチン-11-dUTP、DIG-11-dUTP、蛍光-dNTP/ddNTP
エクステンション率72℃ で2～4 kb/分
半減期：97℃で10分、94℃で60分
増幅効率：≥105 倍
5'->3' エキソヌクレアーゼ活性：あり
余分なA付加：あり
3'->5' エキソヌクレアーゼ活性：なし
混入しているヌクレアーゼ：なし
混入しているRNase：なし
混入しているプロテアーゼ：なし
自己プライミング活性:なし
Principle
Taq DNA Polymerase は、スタンダードなPCRから特殊なPCRまで適応できる 高品質の組み換え酵素です（図 "Tm 値の異なるプライマーへの適応性" と"長いPCR産物の特異的増幅"）。
QIAGEN PCR Buffer
革新的なQIAGEN PCR Bufferは、PCR至適化の操作を軽減することにより、時間と労力を節約するために開発されました。QIAGEN PCR Bufferは、KCl も (NH4)2SO4 も含んでいます（図"プライマーのアニーリングにおける特異性が増加"）。このユニークなバッファーによって、特異的PCRの産物を増幅しやすくなります。PCR サイクルごとのアニーリングの間、非特異的なプライマー結合に対する特異的な結合の比率が、バッファーによって高く保たれます。このPCRバッファーは、KClと (NH4)2SO4 のユニークな配合比により、従来のPCR バッファーに比べ幅広いアニーリング温度やMg2+濃度の範囲で厳密なプライマーアニーリング条件を実現します。異なるアニーリング温度あるいはMg2+ 濃度を用いて行なうPCRの至適化は、劇的に緩和され、多くの場合、不要となります（図 "幅広い至適アニーリング温度"および"異なったマグネシウム濃度への適応 "）。
CoralLoad PCR Buffer
CoralLoad PCR Bufferは、QIAGEN PCR Bufferの全ての特長を持っています。さらに、PCR反応液をアガロースゲルに直接ロードするために使用することができ、従って、ゲルローディングバッファーを別途加える必要はありません。CoralLoad PCR Bufferは従来のQIAGEN PCR Bufferと同程度の高いPCR特異性を持ち、反応の至適化は最小限に抑えられます。さらに、これに入っている2種類のマーカー色素（オレンジ色の色素と赤色の色素）により、DNAの移動距離の予測とアガロースゲルの泳動時間の至適化を容易に行なえます（図"CoralLoad PCR Buffer"）。本バッファーはピペッティングの目視化を改良し、PCR産物をゲルに直接ロードすることが可能なので、簡便性が増加します。
Q-Solution
Q-Solution は、DNAの溶解挙動を変えることで、GCリッチなテンプレート、または二次構造が複雑なテンプレートを増幅しやすくします。この試薬の添加により、しばしば最適条件ではないPCRが改善されたり、今まで得られなかったPCR産物の増幅が可能になったりします （図 "増幅困難なテンプレートをQ-Solutionにより増幅"）。DMSO や他のPCR添加物と異なり、本溶液はどのようなプライマー／テンプレートシステムでも一定の濃度で作用し、毒性もありません。
Procedure
Taq DNA Polymeraseは、様々なアプリケーションで、PCRパラメータの至適化を最小限に抑えながら、特異性の高いPCRを確実にします。キット付属のプロトコールが簡潔で理解しやすいため、PCRセットアップが簡単です。利便性を加え、取り扱いをさらに容易にするために、CoralLoad PCR Bufferが含まれています。これによりローディング色素を加えずに、PCR産物をゲルに直接ロードすることができます。GCリッチなテンプレートで確実に成功するために、PCRを増進するQ-Solution が同梱されています。
Applications
TaqDNA Polymeraseは以下のようなスタンダードな用途にも特殊な用途にも使用できます。 - スタンダードな PCR
- RT-PCR
- スクリーニング
- PCRによるDNAフィンガープリンティング（VNTR、STR、RAPD）
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Feature
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Specifications
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Applications
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PCR, RT-PCR, DNA fingerprinting
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dNTP's included
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No
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Enzyme activity
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5' -> 3' exonuclease activity
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Mastermix
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No
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Reaction type
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PCR amplification
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Real-time or endpoint
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Endpoint
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Sample/target type
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Genomic DNA and cDNA
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Single or multiplex
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Single
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With/without hotstart
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Without hotstart
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For standard and specialized PCR applications with minimal optimization
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Show details
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Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
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View
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Images
CoralLoad PCR Buffer.
[A] CoralLoad Concentrate contains two gel-tracking dyes, enabling immediate gel loading of PCR products for [B ] easy visualization of DNA migration.
Tolerance to variable magnesium concentration.
PCR amplification at the indicated Mg2+ concentrations using QIAGEN PCR Buffer and Taq DNA Polymerase (QIAGEN). The same PCR was performed in parallel using a PCR buffer and Taq polymerase from another supplier (Supplier AII). The single-copy human prion protein gene was amplified successfully in each case using the buffer and enzyme from QIAGEN. M: markers.
Amplification of difficult templates.
Two different primer-template systems were amplified in duplicate using QIAGEN PCR Buffer and Taq DNA Polymerase in the absence (–) or presence (+) of 1x Q-Solution. Q-Solution enables specific amplification of difficult templates. [A] human angiotensin receptor II gene; [B] mouse protein kinase C gene; M: markers.
Tolerance of different primer Tm values.
The human single-copy cystic fibrosis gene was amplified with Taq DNA Polymerase and QIAGEN PCR Buffer using the indicated annealing temperatures. Primers employed were a 22mer with a Tm of 57.5°C (GC content: 54.5%) and a 32mer with a Tm of 85.2°C (GC content: 78%). For analysis, 10% of a 100 µl reaction was loaded. M: markers.
Lot-to-lot reproducibility.
A fragment of the single-copy gene for cystic fibrosis was amplified from 30 ng, 3 ng, and 300 pg human genomic DNA corresponding to 104, 103, and 102 copies of target template, respectively. Three different lots of Taq DNA Polymerase were used and equal volumes of the PCR product were analyzed on a 1% agarose gel. M: markers.
Specific amplification of long PCR products.
Three different-sized products from human genomic DNA were amplified using either Taq DNA Polymerase and QIAGEN PCR Buffer (QIAGEN), or Taq polymerase and a buffer from another supplier (Supplier AII). For analysis, 10% of each reaction was loaded on the gel. Results from duplicate PCR amplifications are shown. M: markers.
Increased specificity of primer annealing.
Ammonium and potassium cations in QIAGEN PCR Buffers increase specificity of primer annealing. K+ binds to the phosphate groups (P–) on the DNA backbone, stabilizing the annealing of the primers to the template. NH4+, which exists both as the ammonium ion and as ammonia under thermal-cycling conditions, can interact with the hydrogen bonds between the bases (B), destabilizing the weak hydrogen bonds at mismatched bases. The combined effect of the two cations maintains the high ratio of specific-to-nonspecific primer-template binding over a wide temperature range.
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