QIAsymphony RNA Kit

組織あるいは細胞からのトータルRNAまたはmiRNAを含むトータルRNAの自動精製

  • 画期的な充填済み試薬カートリッジで取り扱いが簡単
  • 標準化されたプロセスにより高い再現性
  • 至適化されたプロトコールで高収量の高純度RNA
  • バーコードにより試薬とサンプルのトラッキングが可能

QIAsymphony RNA Kit は、QIAsymphony SP上で1~96 サンプルからのトータルRNAあるいはmiRNAやその他のsmall RNAを含むトータルRNAの完全自動化精製を実現します。微量のスタートサンプル(細胞100 個以上)から最高1 x 107個の細胞あるいは50 mg の組織を用いて動物細胞、組織、FFPE組織からトータルRNA を精製可能です。至適化済みのプロトコールにより高純度のRNAまたはmiRNAを含むRNAを高収量で得られ、溶出容量が調節可能なので各ダウンストリームに応じて容易にRNA 濃度を至適化できます。充填済み試薬によりセットアップ時間を短縮でき、マニュアルでの作業操作も最小限に抑えることができます。バーコードの読み取りにより試薬の使用履歴のトラッキングが可能です。

Product Cat. no. List price:
QIAsymphony RNA Kit
For as many as 192 preps, depending on protocol: includes 2 reagent cartridges and enzyme racks and accessories
931636
1.089,00 €
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The QIAsymphony RNA Kit is intended for molecular biology applications. This product is not intended for the diagnosis, prevention, or treatment of a disease.
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Reproducible purification of RNA.|Automated purification comparable to manual procedure.|Highly pure intact RNA.|Efficient handling of magnetic particles.|Prefilled, sealed reagent cartridges.|
RNA was purified from Jurkat cells on the QIAsymphony SP using the QIAsymphony RNA Kit. RNA yields from 2 instrument runs using 2 different reagent cartridge lots were compared with manual purification using the RNeasy Mini Kit. Each bar represents the average of 4 samples.|[A] RNA was purified from rat kidney and spleen samples (10 mg each sample) stabilized in RNAlater RNA Stabilization Reagent on the QIAsymphony SP using the QIAsymphony RNA Kit. [B] RNA was purified from rat kidney and spleen samples (10 mg each sample) stabilized in RNAlater RNA Stabilization Reagent manually using the RNeasy Mini Kit. RNA yield with the QIAsymphony RNA Kit is compared to manual isolation using the RNeasy Mini Kit by agarose gel electrophoresis.|RNA purified from Jurkat cells on the QIAsymphony SP had RIN (RNA integrity number) values between 9.9 and 10, and 28S/18S rRNA ratios of 2.0–2.1, indicating that intact RNA was isolated.|The QIAsymphony SP processes a sample containing magnetic particles as follows: A magnetic rod protected by a rod cover enters a well containing the sample and attracts the magnetic particles. The magnetic rod with cover is positioned above another well and releases the magnetic particles. The QIAsymphony SP uses a magnetic head containing an array of 24 magnetic rods, and can therefore process 24 samples simultaneously. Steps 1 and 2 are repeated several times during sample processing.|Reagent cartridges are prefilled with all reagents required for the purification procedure, including accessory enzymes, and are labeled with 2D bar codes. Partially used cartridges can be resealed for later use giving you complete cost control.|
Performance
QIAsymphony SP上でのRNA自動化精製では、培養細胞、組織、FFPE組織から高い再現性で質の高いRNAを高収量で得ることができ、マニュアル精製操作で得られるRNAと同等のRNAを回収できます(図 "再現性のあるRNA精製")。RNA精製用のQIAsymphony protocol では、主としてmRNAを含む200ヌクレオチドより長いRNA分子が多く含まれています(図 "高純度でインタクトなRNA")。QIAsymphony miRNA protocol を使用すれば、miRNAsや他の低分子RNAなどの200ヌクレオチドより短いRNAを含むトータルRNAを精製できます(図 "マニュアル操作と同等の自動精製")。
Principle
QIAsymphony RNA Kitは、proteinase K処理後に200ヌクレオチドより長いトータルRNAやmiRNAおよびその他の低分子RNAを含むトータルRNAを精製するために、シリカベーステクノロジーのスピードと効率と磁性粒子による簡便な操作を組み合わせています(図 "磁性粒子の効率的な操作")。スタートサンプルに、動物の細胞や組織も使用できます。追加の製品を使えば、ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)組織も本キットで処理できます。サンプルを溶解し、カオトロピック塩の存在下で粒子のシリカ表面へ結合させることによりライセートからRNAを1ステップで精製します。マグネットを使用してライセートから粒子を分離させ、DNAはRNaseフリーのDNase処理により取り除きます。磁性粒子を効率的に洗浄し、RNAをRNaseフリー水で溶出します。
Procedure

革新的で即使用可能な試薬カートリッジは、精製工程に必要な全ての試薬(酵素も含む)および磁性粒子が充填済みです。QIAsymphony SPがカートリッジを自動的に開封するため、周囲環境からのコンタミのリスクが最小限に抑えられます(図 "充填済みのプレパックカートリッジ")。ワークテーブルのセットアップが簡単かつ迅速に行なえ、貴重な時間を節約できます。QIAsymphony SPのボックスに最高2種類の試薬カートリッジを入れるだけで準備完了です。同じキットの試薬カートリッジではなく、別々のキットの試薬カートリッジをセットすれば、1回のランで96サンプルから2種類の精製工程が可能です。選択したサンプル数だけの試薬量が使用されるため、経費を完璧にコントロールできます。精製手順は、4段階になっています(溶解、結合、洗浄、溶出)。スタートサンプルおよび必要なRNA量により、多数のQIAsymphony SP用RNA精製プロトコールが使用可能です(表参照)。

QIAsymphony SPによるRNA精製のプロトコール
プロトコール 使用するキット

スタートサンプル
(前処理したサンプルライセート)

サンプル量 (μl)
RNA CT 400 QIAsymphony RNA Kit  (192) ≤3 x 106 個の培養細胞
≤20 mg 溶解しやすい組織
400 μl
RNA CT 800 QIAsymphony RNA Kit (2 x 48) 3 x 106~1 x 107 個の培養細胞
≤50 mg 溶解しやすい組織
800 μl
RNA FT 400* QIAsymphony RNA Kit (192) ≤20 mg 線維性組織 400 μl
miRNA CT 400* QIAsymphony RNA Kit (192) ≤3 x 106 個の培養細胞
≤20 mg 組織
400 μl
RNA FFPE 130 QIAsymphony RNA Kit (2 x 72) 10 μmまでのFFPE切片 1~2 枚
FFPE切片 20 μm1枚
130 μl
* Proteinase K が必要(別途注文可能)
追加の製品が必要(別途注文可能)

Applications

QIAsymphony RNA KitとQIAsymphony SPを用いたトータルRNA自動精製により、どのようなアプリケーションにも最適な高品質RNAが得られます。

Feature
Specifications
Applications RT-PCR; Real-Time PCR; Expression Profiling
Elution volume 50-200 µl
Sample amount 400 µl lysate from <20 mg tissue or 3 x 10e6 cells or 800 µl lysate from <50 mg tissue or 3 x 10e6 cells

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Labware Files and Documents
1
Safety Data Sheets
1
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
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Reproducible purification of RNA
Reproducible purification of RNA.

RNA was purified from Jurkat cells on the QIAsymphony SP using the QIAsymphony RNA Kit. RNA yields from 2 instrument runs using 2 different reagent cartridge lots were compared with manual purification using the RNeasy Mini Kit. Each bar represents the average of 4 samples.

Automated purification comparable to manual procedure
Automated purification comparable to manual procedure.
[A] RNA was purified from rat kidney and spleen samples (10 mg each sample) stabilized in RNAlater RNA Stabilization Reagent on the QIAsymphony SP using the QIAsymphony RNA Kit. [B] RNA was purified from rat kidney and spleen samples (10 mg each sample) stabilized in RNAlater RNA Stabilization Reagent manually using the RNeasy Mini Kit. RNA yield with the QIAsymphony RNA Kit is compared to manual isolation using the RNeasy Mini Kit by agarose gel electrophoresis.
Highly pure, intact RNA
Highly pure intact RNA.

RNA purified from Jurkat cells on the QIAsymphony SP had RIN (RNA integrity number) values between 9.9 and 10, and 28S/18S rRNA ratios of 2.0–2.1, indicating that intact RNA was isolated.

Schematic of the QIAsymphony SP principle
Efficient handling of magnetic particles.

The QIAsymphony SP processes a sample containing magnetic particles as follows: A magnetic rod protected by a rod cover enters a well containing the sample and attracts the magnetic particles. The magnetic rod with cover is positioned above another well and releases the magnetic particles. The QIAsymphony SP uses a magnetic head containing an array of 24 magnetic rods, and can therefore process 24 samples simultaneously. Steps 1 and 2 are repeated several times during sample processing.

Prefilled, sealed reagent cartridges.
Reagent cartridges are prefilled with all reagents required for the purification procedure, including accessory enzymes, and are labeled with 2D bar codes. Partially used cartridges can be resealed for later use giving you complete cost control.