QIAamp DNA Mini Kit

ゲノム、ミトコンドリア、バクテリア、寄生虫、ウイルスDNAの精製用
  • 高品質で即使用可能なDNAの迅速精製
  • 一定した高い収量
  • 夾雑物および阻害物質を完全に除去

QIAamp DNA Mini Kitはシリカメンブレンにより、組織、スワブ、CSF、血液、体液、尿中の洗浄細胞から核酸を精製します。本キットによる調製法では酵素で溶解するため、機械的なホモジナイズは不要です。簡便なスピンカラム法により、マニュアルでの作業による調製時間はわずか20 分に短縮されています。QIAamp DNA Mini Kitを用いたDNA精製はQIAcubeで自動化可能です。

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QIAamp DNA Mini Kit (50)
For 50 DNA preps: 50 QIAamp Mini Spin Columns, QIAGEN Proteinase K, Reagents, Buffers, Collection Tubes (2 ml)
51304
kr 1 780,00
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QIAamp DNA Mini Kit (250)
For 250 DNA preps: 250 QIAamp Mini Spin Columns, QIAGEN Proteinase K, Reagents, Buffers, Collection Tubes (2 ml)
51306
kr 7 935,00
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The QIAamp DNA Mini Kit is intended for molecular biology applications. This product is not intended for the diagnosis, prevention, or treatment of a disease.
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Purification of up to 50 kb genomic DNA.|The QIAcube.|
Size distribution of DNA prepared with QIAamp Kits from the indicated sources (3 µg per lane).||
Performance

QIAamp DNA Mini Kitで精製したDNAは、様々なダウンストリームアプリケーション、例えば、PCR、リアルタイム定量PCR、サザンブロット、SNPジェノタイピング、STRジェノタイピング、薬理ゲノミクス研究などで使用することができます。

QIAamp DNA Mini Kit で得られるDNAの大きさは、最大50 kb です(図"50 kbまでの精製ゲノムDNA")。このサイズのDNAは完全に変性され、高い増幅効率を示します。核酸またはDNAの収量は、スタートサンプルによって異なります(表参照)。

QIAamp サンプル調製テクノロジーはライセンスにより保証されていますので、QIAamp により精製された核酸はパテントを侵害することなくどのような分子生物学アッセイあるいは他のダウンストリームアプリケーションにも使用できます。

QIAamp DNA Mini Kit での一般的な収量

サンプル

総核酸収量(µg)*

DNA収量
(µg)
血液200 µl4~124~12
バフィコート200 µl25~5025~50
細胞10620~3015~20
肝臓25 mg60~11510~30
25 mg35~6015~30
25 mg25~455~10
心臓25 mg15~405~10
腎臓25 mg40~8515~30
脾臓10 mg25~455~30
* RNase処理なしで得られた核酸
RNase処理で得られた核酸

Principle

QIAamp DNA Mini Kit はヒト・組織サンプルからスピンカラムを用いて、遠心法あるいは吸引法により迅速にDNAを精製できます。フェノール/クロロホルム抽出は不要です。DNAは選択的にQIAampシリカゲルメンブレンに結合し、夾雑物は洗い流されます。2価の陽イオンやタンパク質などのPCR阻害物質は2回の洗浄ステップで完全に除去され、高純度なDNA はキットに同梱の水あるいはバッファーで溶出されます。このQIAamp DNAテクノロジーにより、PCRやブロットに即使用可能なゲノム、ミトコンドリア、バクテリア、寄生虫、ウイルスDNAが組織サンプルから調製できます。

Procedure

至適化済みのバッファーおよび酵素によりサンプル溶解および核酸の安定化を行ないます。またQIAampメンブレンへのDNAの選択的な吸着を促進します。ライセートにアルコールを添加し、QIAamp Spin Column にアプライします。洗浄バッファーにより不純物を除去し、精製した即使用可能なDNAを水または低塩濃度バッファーで溶出します。

組織サンプルを酵素で処理するため、組織の機械的なホモジナイゼーションの必要はなく、簡便なスピンカラム方式を用いて、実際の操作時間はわずか20分で調製できます(溶解時間はサンプルによって異なります)。サンプルはマイクロ遠心分離機を用いて、あるいは血液やその他の体液を処理する場合には、QIAvac 24 Plus あるいは QIAvac 6S 吸引装置を用いて調製可能です。さらに、厳密な溶解操作法を採用したことで、QIAamp DNA Mini Kitは、細菌または寄生虫からゲノムDNAを精製するのに理想的になっています。マニュアルでの作業時間をさらに短縮するために、ゲノムDNA精製を QIAcubeで自動化することができます。

吸引法による操作手順

血液およびその他の体液では、遠心操作の代わりに吸引装置が利用でき、簡便で迅速に血液およびその他の体液から核酸精製が行なえます。QIAamp Mini Spin Column は、VacValves および VacConnectorsを使用するQIAvac 24 Plusマニホールドで使用することができます。サンプルの流速が有意に変化する場合に、VacValveにより一定の流速を維持できます。使い捨てのVacConnectorはコンタミを避けるために使用します。VacConnectorを用いれば、QIAvac Luer Adapterを有するQIAvac 6S(販売終了)上でこれらのQIAampによる調製が実行可能です。

Applications

QIAamp DNA Mini Kitは次のような一般的に使用されているヒト組織サンプルからのDNA精製に最適です;筋肉、肝臓、心臓、脳、骨髄、その他の組織、スワブ(口腔、眼、鼻、咽頭、その他)、CSF、血液、体液、尿由来の洗浄した細胞。最高25 mgの組織、または最高200 µlの液体からDNAを20分で精製して、50~200 µlで溶出することができます。

Feature
Specifications
Applications PCR, Southern blotting
Elution volume 50–200 µl
Format Spin column
Main sample type Whole blood, tissue, cells
Processing Manual (centrifugation or vacuum)
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein Genomic DNA, mitochondrial DNA, bacterial DNA, parasite DNA, viral DNA
Sample amount 200 µl/25 mg/5 x 10e6
Technology Silica technology
Time per run or per prep 20 minutes
Yield 4–30 µg

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FAQs
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Supplementary Protocols
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User-Developed Protocols
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The protocol can be used for fresh or frozen semen samples with equal efficiency. Frozen samples must be thawed thoroughly before use. Please note that lysis time will vary depending on the size and density of the source material.
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These procedures have been used successfully for isolation of genomic DNA from Aspergillus and Candida species, from both fungal cultures and blood.
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This protocol has only been tested with ‘soft’ tissues (e.g., liver, spleen, thymus, heart, kidney, and brain) and may not work with ‘hard’ tissues (e.g., bone, teeth, and skin).
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References
0
Images
Purified Genomic DNA up to 50 kb  Size distribution of DNA prepared with QIAamp Kits from the indicated sources (3 µg per lane)
Purification of up to 50 kb genomic DNA.
Size distribution of DNA prepared with QIAamp Kits from the indicated sources (3 µg per lane).
The QIAcube.