少量サンプルからのゲノムおよびミトコンドリアDNA精製
- 高品質DNAの迅速精製
- 有機溶媒抽出あるいはアルコール沈殿が不要
- 一定した高い収量
- 夾雑物および阻害物質を完全に除去
QIAamp DNA Micro Kit は迅速なスピンカラム操作により、ゲノムあるいはミトコンドリア DNA 精製を容易にします。プロトコールは微量の新鮮あるいは凍結した血液、組織、乾燥血液斑からの精製用に至適化されています。本キットは、シリカメンブレンの選択的な結合能力および20~100 µl の幅広い溶出容量を組み合わせています。QIAamp DNA Micro Kit を用いたDNA 精製はQIAcube上で完全自動化ができます。
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QIAamp DNA Micro Kit (50)
For 50 DNA preps: 50 QIAamp MinElute Columns, Proteinase K, Carrier RNA, Buffers, Collection Tubes (2 ml)
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56304
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QIAamp DNA Micro Kit は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。
QIAamp DNA Micro 操作手順|レーザーマイクロダイセクションPCR|微量サンプルからの効率的なDNA精製|
至適化済みのバッファーはサンプルを溶解、核酸を安定化し、QIAampメンブレンへのDNAの選択的な吸着を増大する。ライセートにアルコールを添加し、QIAamp MinElute Spin Column にアプライする。洗浄バッファーにより不純物を除去し、精製した即使用可能なDNAを水または低塩濃度バッファーで溶出する。|ネズミの腎臓からLMDを用いて採取したサンプルからDNAをQIAamp DNA Micro Kit を用いて精製、あるいは溶解液からの直接PCRプロトコールを用いて記載のようにPCRを行なった。1 µlおよび10 µlの各溶出液を用いてGAPDH のPCRを行なった。M:マーカー、+:ポジティブコントロール、-:ネガティブコントロール。|血液サンプル(1~64 µl)からDNAをQIAamp DNA Micro Kit を用いて血液プロトコールに従って精製した。DNAを 20 µl のBuffer AEで溶出し、各溶出液の2 µl をリアルタイムPCRで増幅した。全ての実験における増幅効率を示した。|
パフォーマンス
結果として生じる精製DNAは、タンパク質、ヌクレアーゼなどの夾雑物を含まないので、リアルタイムPCR (図 “ 微量サンプルからの効率的なDNA精製”)、レーザーマイクロダイセクション(LMD ) PCR (図 “ レーザーマイクロダイセクションPCR”)などの高感度なダウンストリームアプリケーションで使用するのに最適です。さらに、QIAamp DNA Micro Kitで精製したDNAは、ショートタンデムリピート(STR)ジェノタイピング、1塩基多型(SNP)ジェノタイピング、または薬理ゲノミクス研究でも使用することができます。
原理
QIAamp DNA Micro Kitは、シリカゲルメンブレンの選択的な結合能力および20~100 µlの幅広い溶出容量を組み合わせています。DNAはQIAamp MinEluteシリカメンブレンに特異的に結合し、夾雑物は通過します。フェノール/クロロホルム抽出は不要です。2価の陽イオンやタンパク質などのPCR阻害物質は2回の洗浄ステップで完全に除去され、高純度なDNA はキットに同梱の水あるいはバッファーで溶出されます。QIAamp DNA Microテクノロジーにより、微量サンプルからゲノム/ミトコンドリアDNAを高収量で得られ、そのDNAはPCRおよびブロット法にすぐに使用できます。
QIAamp サンプル調製テクノロジーはライセンスにより保証されていますので、QIAamp により精製された核酸はパテントを侵害することなく、どのような分子生物学アッセイあるいは他のダウンストリームアプリケーションにも使用できます。
操作手順
QIAamp DNA Micro Kit は迅速なスピンカラム操作により、微量のサンプルからのDNA精製を容易にします(フローチャート " QIAamp DNA Micro 操作手順"参照)。QIAamp DNA Micro Kit は、少量のサンプル(1~100 µl の全血、直径約3 mmのblood card、尿、10 mg未満の組織、レーザー顕微解剖組織など)からゲノムDNAおよびミトコンドリアDNAを精製するために十分確立された技術を使用しています。新鮮または凍結した血液、組織、および乾燥した血斑から30分で精製し、20~100 µlで溶出することができます。
アプリケーション
QIAamp DNA Micro Kitは以下のような様々なサンプルを用いた調製に最適です。
- 微量血液
- Blood cards
- 尿
- レーザーマイクロダイセクションなどの微量組織サンプル
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Feature
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Specifications
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Applications
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Real-time PCR, STR analysis, LMD-PCR
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Elution volume
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20–100 µl
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Format
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Spin column
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Main sample type
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Whole blood
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Processing
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Manual (centrifugation or vacuum)
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Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein
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Genomic DNA, mitochondrial DNA
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Sample amount
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1–100 µl
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Technology
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Silica technology
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Time per run or per prep
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30 minutes
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Yield
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<3 µg
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FAQ ID -12
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FAQ ID -1188
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FAQ ID -1547
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I received one of the kits in the list below containing the MinElute columns, however they were left out for a while and not stored at 2-8°C upon receipt. Can I still use them? AllPrep DNA/RNA Micro, EpiTect Fast DNA Bisulfite, EpiTect Fast FFPE Bisulfite, EpiTect Fast LyseAll Bisulfite, EpiTect Plus DNA Bisulfite, EpiTect Plus FFPE Bisulfite, EpiTect Plus LyseAll Bisulfite, exoRNeasy Serum/plasma Maxi, exoRNeasy Serum/Plasma Midi, GeneRead DNA FFPE, GeneRead rRNA Depletion, GeneRead Size Selection, MinElute Gel Extraction, MinElute PCR Purification, MinElute Reaction Cleanup, miRNeasy FFPE, miRNeasy Micro, miRNeasy Serum/Plasma, QIAamp DNA FFPE, QIAamp DNA Investigator, QIAamp DNA Micro, QIAamp MinElute Media, QIAamp MinElute Virus Spin, QIAamp MinElute Virus Vacuum, RNeasy FFPE, RNeasy Micro, RNeasy Plus Micro
FAQ ID - 3560
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FAQ ID -473
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FAQ ID -618
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FAQ ID -728
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FAQ ID -730
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FAQ ID -754
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FAQ ID -761
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FAQ ID -908
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FAQ ID -909
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FAQ ID -926
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FAQ ID -305
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For purification of genomic DNA from small volumes of blood, dried blood spots, swabs, forensic case work samples, chewing gum, urine, tissues, laser-microdissected tissues; For cleanup of genomic DNA
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少量の血液、乾燥血液班、尿、組織、LMD採取した組織からのゲノムDNAの精製
ゲノムDNAのクリーンアップ
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画像
QIAamp DNA Micro 操作手順
至適化済みのバッファーはサンプルを溶解、核酸を安定化し、QIAampメンブレンへのDNAの選択的な吸着を増大する。ライセートにアルコールを添加し、QIAamp MinElute Spin Column にアプライする。洗浄バッファーにより不純物を除去し、精製した即使用可能なDNAを水または低塩濃度バッファーで溶出する。
レーザーマイクロダイセクションPCR
ネズミの腎臓からLMDを用いて採取したサンプルからDNAをQIAamp DNA Micro Kit を用いて精製、あるいは溶解液からの直接PCRプロトコールを用いて記載のようにPCRを行なった。1 µlおよび10 µlの各溶出液を用いてGAPDH のPCRを行なった。M:マーカー、+:ポジティブコントロール、-:ネガティブコントロール。
微量サンプルからの効率的なDNA精製
血液サンプル(1~64 µl)からDNAをQIAamp DNA Micro Kit を用いて血液プロトコールに従って精製した。DNAを 20 µl のBuffer AEで溶出し、各溶出液の2 µl をリアルタイムPCRで増幅した。全ての実験における増幅効率を示した。
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