MinElute Reaction Cleanup Kit

酵素反応液から最高5 µgまでのDNA(70 bp~4 kb)クリーンアップ用
  • 最小限の溶出量
  • 迅速な操作と容易な取り扱い
  • 再現性のある高い回収率
  • ゲル解析をより簡便化するGelPilot Loading Dye付き

MinElute Reaction Cleanup Kitは、スピンカラム、バッファー、コレクションチューブにより構成され、シリカメンブレンによりDNA(70 bp~4 kb)を酵素反応液から精製します。スピンカラムは微量(わずか10 µl)で溶出できるようにデザインされているので、高濃度のDNAが高収量で得られます。pH指示薬入りバッファーにより、DNAがスピンカラムに結合する最適なpHを簡単にチェックできます。本キットはQIAcubeで完全自動化が可能です。MinEluteシステムで精製したDNAフラグメントはシークエンシング、マイクロアレイ解析、ライゲーション、トランスフォーメーション、制限酵素解析、標識反応、マイクロインジェクション、PCR、in vitro転写反応のような幅広いアプリケーションに直接使用できます。

製品名 Product no. Cat. no. List price:
 
 
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製品名 Cat. no. List price:
MinElute Reaction Cleanup Kit (50)
50 MinElute Spin Columns, Buffers, Collection Tubes (2&nbsp:ml)
28204
¥16,000
MinElute Reaction Cleanup Kit (250)
250 MinElute Spin Columns, Buffers, Collection Tubes (2 ml)
28206
¥65,000

MinElute Reaction Cleanup Kit  は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。


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MinElute操作手順|GelPilot Loading Dye|MinEluteメンブレン構造|pH 指示薬|Spin Column操作オプション - D|Spin Column操作オプション - E|Spin Column操作オプション - C|Spin Column操作オプション - B|Spin Column操作オプション - A|
この結合―洗浄―溶出の簡単な操作によって、簡便性が確実に高まる。


|GelPilot Loading Dye に入っている3種類のマーカー色素によりDNA電気泳動の至適化が容易。

|ユニークなメンブレン構造を持つMinElute Spin Column断面図(utility model pending)。|溶解および結合バッファー中のpH指示薬により、DNA吸着の至適pH(pH <7.5)かどうかを簡単に確認できる。アガロースゲル電気泳動バッファーを繰り返し使用したり、間違って調製した場合に、結合溶液のpHは至適pHより高くなる。このような場合は、3M 酢酸ナトリウム、pH 5.0 を10 µl 添加してpHを簡単に調整することが可能。|QIAvac 24 Plus|QIAcube
|ルアーコネクター付きマニホールド
|QIAvac 24
|マイクロ遠心機
|
パフォーマンス

MinElute Reaction Cleanup Kitで、酵素反応液から最高5 µg のDNA(70 bp~4 kb)が確実にクリーンアップされますので、様々なアプリケーションに適したDNAが高収量で得られます。本キットは、酵素反応液のクリーンアップに使用するスピンカラムを備えています。マイクロ遠心機または吸引マニホールドを使用すれば、高濃度なDNAフラグメント(70 bp~4 kb)が迅速に得られます(4 kb以上のDNAフラグメントはQIAquick Systemを用いて精製)。

MinElute Reaction Cleanup Kit を用いて除去される酵素例
タンパク質 酵素サブユニットあたりの分子量(kDa)
DNA ポリメラーゼ I 109
クレノウフラグメント 62
仔ウシ腸アルカリ性ホスファターゼ 69
T4 DNAリガーゼ 55
T4ポリヌクレオチドキナーゼ 35
ターミナルトランスフェラーゼ 32
DNase I 31
各種制限酵素 酵素により異なる
原理

MinElute Reaction Cleanup Kitでは、高塩濃度バッファーによりDNAを結合し、低塩濃度バッファーあるいは水によりDNAを溶出するシリカゲルメンブレン を利用しています。この精製法でDNAサンプルからプライマー、ヌクレオチド、酵素、ミネラルオイル、塩、アガロース、臭化エチジウム、およびその他の夾雑物が除去できます。シリカメンブレンテクノロジーにより樹脂漏れ、および懸濁液関連の問題や不便さが解消されます。幅広い用途に応じて至適化された結合バッファーにより、種々のサイズのDNAフラグメントを選択的に吸着します。

Gel Loading Dye

より迅速で簡便なサンプル処理と解析を実現するため、ゲル電気泳動用のローディング色素が付いています。GelPilot Loading Dye は3 種類のマーカー色素(xylene cyanol、bromophenol blueおよびorange G)が入っており、短いDNAフラグメントのゲルからの流出を回避でき、アガロースゲルの泳動時間の至適化が簡単に行なえます(図 "GelPilot Loading Dye")。

操作手順

MinEluteシステムでは結合-洗浄-溶出という簡単な操作だけでDNAのクリーンアップが可能です(フローチャート"MinElute操作手順"参照)。結合バッファーをPCRサンプルあるいは他の酵素反応液に直接添加し、混合液をMinElute Spin Column にアプライします。ゲル切片をpH指示薬を含んだバッファーに溶解させると、DNA 結合の至適pH を容易に決めることができます(図 “pH指示薬”)。DNAは添付のバッファー中の高塩濃度の条件下でシリカゲルメンブレンに吸着します。不純物は洗い流され、純粋なDNAを添付の低塩濃度溶出バッファー、あるいは水で溶出します。得られたDNAは、その後のアプリケーションに即使用可能です。

操作法

MinElute Spin Column は2つの簡便な操作法オプションのためにデザインされました(フローチャート"MinElute操作手順")。スピンカラムは簡便な卓上型マイクロ遠心機あるいはQIAvac 24 Plus や QIAvac 6S のようなルアーコネクター付き吸引装置で使用できます。MinElute Reaction Cleanup Kitは他のQIAGENスピンカラムを利用したキット同様にQIAcubeでの完全自動化が可能で、標準化された再現性の高い結果が得られます(図 "Spin Column操作オプションABCD、およびE")。

アプリケーション

MinEluteシステムで精製したDNAフラグメントは以下のようなアプリケーションに即使用可能です。

シークエンシング
マイクロアレイ解析
ライゲーションやトランスフォーメーション
制限酵素分解
標識反応
Feature
Specifications
Binding capacity 5 µg
Elution volume 10 µl
Format Tube
Fragment size 70 bp – 4 kb
Processing Manual
Recovery: oligonucleotides dsDNA Recovery: oligonucleotides, dsDNA
Removal <10mers 17–40mers dye terminator proteins Removal <40mers
Sample type: applications DNA, oligonucleotides: Enzymatic reactions
Technology Silica technology

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FAQ
8
FAQ ID -148
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FAQ ID -205
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FAQ ID - 3560
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FAQ ID -581
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FAQ ID -759
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FAQ ID -786
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FAQ ID -199
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FAQ ID -2460
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キットハンドブック
2
MinElute PCR Purification Kit
低溶出量でのPCR産物(70 bp~ 4 kb)精製用

MinElute Gel Extraction Kit
低溶出量でのDNAフラグメント(70 bp~ 4 kb)のゲル抽出

MinElute Reaction Cleanup Kit
酵素反応液からのDNA(70 bp~ 4 kb)クリーンアップ用
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クイックスタートプロトコール
1
References
0
画像
MinElute Procedure
MinElute操作手順

この結合―洗浄―溶出の簡単な操作によって、簡便性が確実に高まる。


GelPilot Loading Buffer
GelPilot Loading Dye
GelPilot Loading Dye に入っている3種類のマーカー色素によりDNA電気泳動の至適化が容易。

MinElute Membrane Assembly
MinEluteメンブレン構造
ユニークなメンブレン構造を持つMinElute Spin Column断面図(utility model pending)。
ILLU_0104_MinElute
pH 指示薬
溶解および結合バッファー中のpH指示薬により、DNA吸着の至適pH(pH <7.5)かどうかを簡単に確認できる。アガロースゲル電気泳動バッファーを繰り返し使用したり、間違って調製した場合に、結合溶液のpHは至適pHより高くなる。このような場合は、3M 酢酸ナトリウム、pH 5.0 を10 µl 添加してpHを簡単に調整することが可能。
Spin Column操作オプション - D
QIAvac 24 Plus
Spin Column操作オプション - E
QIAcube
QIAprep Spin Column handling options
Spin Column操作オプション - C
ルアーコネクター付きマニホールド
QIAprep Spin Column handling options
Spin Column操作オプション - B
QIAvac 24
QIAprep Spin Column handling options
Spin Column操作オプション - A
マイクロ遠心機