植物細胞および組織、菌類からトータル細胞性DNA （最大260 µg）を分離
DNeasy Plant Maxi Kit は、シリカをベースにしたスピンカラムフォーマットでDNAを迅速かつ簡単に精製します。サンプルにより収量は異なりますが、一般的には30～260 µgの高品質DNA が得られます。
DNeasy Plant Maxi Kit は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。
DNeasy Plant Maxi Kit は、DNA精製が困難な材料を含む様々な植物種および組織から、高品質のDNAを効率良く、しかも迅速に分離できます（表 “DNeasy Plant Kitで処理した植物種のリスト”）。新鮮、凍結および乾燥サンプルの全てに適応可能です。この最適なDNeasy Plant 操作法では、QIAshredder Maxi Spin Columnを使用します。これは、細胞片を効率的に除去して溶解後のサンプル処理を容易にするユニークなろ過ホモジナイゼーションカラムです。
DNeasy Kitsで処理した植物種のリスト
若い葉あるいは針葉(および表記の組織)を採取後、直ちに凍結した。その後、DNeasy Plant Mini KitでDNA精製を行なった。1ブナの実、2乾燥した葉、3カルス、4成植物由来の葉、5胚乳、6炭水化物豊富な旧葉、7芽。菌類を含む他の種からのDNA分離に関する詳細は、テクニカルサポートにお問い合わせください。
通常、最高1 gの湿重量のサンプル量と、500 µl～2 mlの溶出量で30～260 µgのDNAが得られます。DNA収量はゲノムのサイズ、倍数性、細胞数および植物の発育段階に依存しており、異種間および組織間で変動します。低い範囲値はアラビドプシスに、高い範囲値はコムギにそれぞれ対応します。DNeasyで精製したDNAの吸光スペクトルは260 nmで左右対称のピークを示し（図、“葉／針葉から精製したDNAの純度”と“マツ葉から精製したDNAの純度”）、このDNAが酵素阻害物質のような夾雑物を含まないことを実証しています。精製したDNAは、様々な用途に使用することができます（図"PCR性能"、"PCR分析"、および "RAPD分析"）。
DNeasy Plant Kit は、植物組織や細胞および菌類から高純度の全細胞DNAを分離するために最適なシリカメンブレンテクノロジーと簡便なスピンカラム法を使用しています。DNeasyテクノロジーにより臭化セチルトリメチルアンモニウム（CTAB）、フェノールやクロロホルム抽出のような手間のかかるDNA精製操作の必要はなくなりました。DNeasy調製法を用いればアルコール沈殿なしに精製したDNAをすぐに使用できます。DNeasyサンプル調製法はQIAGENがライセンスを有しています。
サンプルはまず機械的に破砕され、次いで化学的に溶解されます（フローチャート "DNeasy PlantおよびDNeasy 96 Plant操作手順"参照）。RNAは溶解操作の際にRNase分解により除去されます。細胞片、沈殿したタンパク質および多糖類を除去し、QIAshredder Maxi Spin Columnを通過させるために遠心操作をし、サンプルをホモジナイズします。バッファー条件を調整したサンプルをDNeasy Plant Maxi Spin Column にロードします。短い遠心操作により、DNAは選択的にシリカメンブレンに結合し、夾雑物は通過します。残留した夾雑物や酵素阻害物質は1回または2回の洗浄ステップで除去されます。その後、高純度のDNAが水または低塩濃度溶出バッファーで溶出され、即使用可能となります。
DNeasy Plant Maxi Kitは、以下を含む植物組織からDNAを精製することができます。
You are not authorized to download the resource