新鮮血液からの細胞性RNA分離用
  • 高品質で即使用可能なRNAの迅速な精製
  • 有機溶媒抽出あるいはアルコール沈殿が不要
  • 一定した高い収量
  • 夾雑物および酵素阻害物質を完全除去

QIAamp RNA Blood Mini Kitは、クエン酸、ヘパリン、EDTAのような一般的な抗凝固剤で処理した新鮮なヒト全血(最高1.5 ml)からシリカメンブレンをベースにした精製法で細胞RNAを分離します。QIAshredder Spin Columnを用いたホモジナイゼーション後、迅速なスピンカラム法によりRNAを簡単に精製します。精製はQIAcube上で完全自動化が可能です。

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QIAamp RNA Blood Mini Kit (50)
For 50 RNA preps: 50 QIAamp Mini Spin Columns, 50 QIAshredder Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), RNase-free reagents and buffers
52304
¥42,500

QIAamp RNA Blood Mini Kit  は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。


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QIAamp RNA Blood Mini 操作手順|ノーザンブロット解析用の高品質RNA|正確なRT-PCR解析|
|ホルムアルデヒドアガロースゲルとノーザンブロット(GAPDHプローブ)。新鮮なヒト全血(表記の抗凝固剤入り)0.5、1.0、1.5 ml(左から右へ)からトータルRNA をQIAamp RNA Blood Mini Kit を用いて精製した。1レーンあたり溶出液60 µl のうち40 µl を電気泳動した。M:0.24~9.5 kb RNAラダー。|血液から精製したトータルRNAによるRT-PCR。50 µl ヒト全血(表記の抗凝血剤入り)からトータルRNAをQIAamp RNA Blood Mini Kit を用いて精製し、50 µl のRNaseフリーの水で溶出した。各サンプルから5 µlあるいは15 µl の溶出液を用いたRT-PCR反応、およびネガティブコントロール(15 µl 溶出液、RT未添加)を用いたRT-PCR反応を行なった(左から右)。RT-PCR用に、サンプルをRNaseフリーDNaseで処理し、オリゴdTプライマーで逆転写反応を行なった。cDNAの1/10(2.5 µl)をGAPDHプライマーで増幅した。PCR反応液の1/5を電気泳動に用いた。 :溶出液の代わりに蒸留水をテンプレートとして増幅;+ :cDNAフラグメントを用いたポジティブコントロールM:100 bp DNAラダー。|
パフォーマンス

QIAamp調製法は、完全にRNase、夾雑物および酵素阻害物質を除去するので、全てのダウンストリームアプリケーションに最適な高品質RNAが得られます(図 "ノーザンブロット解析用の高品質RNA " および "RT-PCR解析")。

QIAamp RNA Blood Mini Kit を用いれば、DNA のコンタミを最小限に抑えた最高品質のRNAが調製できます。しかしどのようなRNA 精製法を用いても、わずかなDNA コンタミは避けられません。DNA に非常に高感度なRNAアプリケーションの場合には、残存するDNAの完全な除去が必要となります。このような場合には、QIAamp RNA調製中に簡便なカラム上で、サンプルのDNase 処理が行なえるQIAGEN RNase-Free DNase Set のご使用をお薦めします。

原理

QIAamp RNA Blood Mini Kit を使用すれば、シリカメンブレンテクノロジーによって細胞RNAを精製することができます。フェノール/クロロホルム抽出は不要です。RNAは選択的にQIAampシリカゲルメンブレンに結合し、夾雑物は洗い流されます。2価の陽イオンおよびタンパク質などのPCR阻害物質は2回の効率的な洗浄ステップにより完全に除去され、残った高純度のRNAが水あるいはキットに添付のバッファーで溶出されます。

QIAampテクノロジーによって、新鮮血液などのサンプルから細胞性トータルRNAを精製し、RT-PCRおよびブロッティング操作ですぐに使用することができます。QIAampによるサンプル調製テクノロジーは、ライセンス保証されています。

操作手順
QIAamp RNA Blood Mini Kit は迅速なスピンカラム法により、血液からのRNA精製を容易にします(図 "QIAamp RNA Blood Mini 操作手順")。赤血球を選択的に溶解し、白血球を遠心操作で収集します。その後、RNaseを急速に不活化する高度な変性の条件を使用して、白血球を溶解します。QIAshredder Spin Columnによるホモジナイゼーションの後、サンプルをQIAamp Spin Column にアプライします。トータルRNAがQIAampメンブレンに結合し、夾雑物が洗浄除去され、高純度なRNA が、30~100 µlのRNaseフリーの水(本キットに添付)で溶出されて、全てのダウンストリームアプリケーションで即使用可能となります。
アプリケーション

QIAamp RNA Blood Mini Kit は、1.5 ml までのクエン酸塩、ヘパリン、EDTA 等の一般的抗凝血剤入りの新鮮なヒト全血から細胞性RNA を精製するキットです。組織サンプルからは、トータルRNA を本キットで精製することが可能です。

Feature
Specifications
Applications PCR, real-time PCR, microarray
Elution volume 30–100 µl
Format Spin columns
Main sample type Whole blood, tissue
Processing Manual (centrifugation)
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein Cellular RNA
Sample amount 50–1.5 ml
Technology Silica technology
Time per run or per prep <1 hour
Yield 1–5 µg

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サイエンティフィック・ポスター
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安全データシート
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References
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