RNeasy Midi Kit

細胞、組織、酵母からの最大1 mgまでのトータルRNA精製用
  • 迅速な操作により短時間で高品質なトータルRNAを実現
  • あらゆるダウンストリームアプリケーションに即使用可能なRNA
  • 中程度のスタートサンプル量で一定したRNA収量
  • フェノール/クロロホルム抽出不要
  • CsCl 勾配遠心分離、LiCl やエタノール沈殿は不要
RNeasy Midi Kitはシリカゲルメンブレンを用いたRNeasy Spin Column(RNA結合容量は1 mg)で細胞、組織、酵母から高品質RNAを迅速に精製します。組織サンプルはRNAlater RNA Stabilization ReagentまたはAllprotect Tissue Reagentで簡便に安定化され、TissueRuptorあるいはTissueLyserシステムで効率的に破砕されます。より少量あるいは多量のサンプルには、RNeasy Micro Kit(スピンカラム結合容量はRNA最高45 µg)、RNeasy Mini Kit(スピンカラム結合容量はRNA 100 µg)、RNeasy Maxi Kit(スピンカラム結合容量はRNA 6 mg)をご使用ください。
Product Cat. no. List price:
RNeasy Midi Kit (50)
50 RNeasy Midi Spin Columns, Collection Tubes (15 ml), RNase-free Reagents and Buffers
75144
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The RNeasy Midi Kit is intended for molecular biology applications. This product is not intended for the diagnosis, prevention, or treatment of a disease.
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Performance

RNeasy Midi Kitを用いて精製したトータルRNAは高品質で、多くのダウンストリームプリケーションに適しています(図"各種サンプルから得られた高品質RNA")。RNeasy Midi Kitを用いることにより、動物またはヒト細胞、動物またはヒト組織、酵母から簡単にトータルRNAを精製できます(表参照)。

RNeasy Midi Kitを用いて得られたトータルRNA収量
由来 スタートサンプル 平均収量(µg)

動物細胞
LMH
HeLa
COS-7
リンパ球(未刺激)


7 x 107
7 x 107
3 x 107
1 x 108

850
1000
950
50

マウス組織
肝臓

脾臓


200 mg
100 mg
200 mg

700
130
600

酵母細胞
S. cerevisiae


2 x 108

450
 

Principle

RNeasy Midi Kitは、中程度のサンプル量に対応し、効率的にトータルRNAを精製します。グアニジンイソチオシアネート溶解と、シリカゲルメンブレンによる迅速な精製を組み合わせたRNeasyテクノロジーにより、トータルRNA精製を簡便に行なうことができます。RNeasy Kitで精製した高品質のRNAはほとんどDNAを含みません。

Procedure
RNeasy Midi Kitを用いて、5 x 106~1 x 108の動物またはヒト細胞、20~250 mgの動物またはヒト組織、2 x 107~5 x 108の酵母から、簡単にトータルRNAを精製できます。まずサンプルを溶解し、その後ホモジナイズします。ライセートにエタノールを添加して最適な結合条件にします。その後ライセートをRNeasyシリカゲルメンブレンにアプライします(図"RNeasy Midi Spin Column")。RNA(最高1 mg容量)はメンブレンに結合し、全ての夾雑物は効率的に洗い流されます。微量のDNAに敏感なアプリケーションを行なう場合、カラム上での簡便なDNase処理によって残存するDNAを除去できます。濃縮された高純度のRNAは300~500 µlの水で溶出されます(図"RNeasy Midi操作手順")。各種のアプリケーションプロトコールも揃えています。
Applications

RNeasyテクノロジーで精製したRNAのA260/280比は、1.9~2.1(10 mM Tris·Cl、pH 7.5)で、以下を含む幅広いアプリケーションに最適です。

ノーザン、ドットおよびスロットブロット
エンドポイントRT-PCR
リアルタイム定量RT-PCR
アレイ解析
Poly A+RNA調製
Feature
Specifications
Applications PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray
Elution volume 300–500 µl
Format Spin column
Main sample type Tissue, cells
Processing Manual
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein RNA
Sample amount 20–250 mg
Technology Silica technology
Time per run or per prep <1 hour
Yield Varies

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For total RNA isolation from animal cells, animal tissues, bacteria, yeast, whole blood, and for RNA cleanup


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