miRNeasy FFPE Kit

ホルマリン固定パラフィン包埋した組織切片からのmicroRNAおよびトータルRNA精製
  • miRNA とトータル RNA の効率的な精製
  • ホルマリンによるクロスリンクを切断する新しい手法
  • RNA分解がなく効率的にRNAを遊離
  • わずか85 分でRNA が得られる能率化されたプロトコール

miRNeasy FFPE Kit は、ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)組織切片から約18 ヌクレオチド(nt)以上のRNA を含むトータルRNA を精製します。本キットはリアルタイム定量RT-PCR のようなアプリケーションに利用できるmiRNA やその他のsmall RNA を含むRNA フラグメントを精製します。

Product Cat. no. List price:
miRNeasy FFPE Kit (50)
50 RNeasy MinElute Spin Columns, Collection Tubes, Proteinase K, RNase-Free DNase I, DNase Booster Buffer, RNase-Free Buffers, RNase-Free Water
217504
533,00 €
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The miRNeasy FFPE Kit is intended for molecular biology applications. This product is not intended for the diagnosis, prevention, or treatment of a disease.
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Performance
miRNeasy FFPE Kitを用いたトータルRNAおよびmiRNAの収量と性能は、フェノール・クロロホルム抽出法や、他社の類似のキットを使用するmiRNA 精製法より優れています(図“効率的なリアルタイム定量RT-PCR”、FFPE組織からの効率的なRNA精製”および“卓越した収量および性能”)。
Principle

ホルマリン固定された組織では、ダウンストリームアプリケーションでRNA の性能を阻害するRNA・RNA およびRNA・タンパク質間のクロスリンキングが生じます。miRNeasy FFPE Kit は、特別な溶解およびインキュベーション条件によりRNA のホルマリンによるクロスリンキングを元に戻します。特別に開発された溶解バッファーは、組織切片からRNA を効率的に遊離し、さらにRNA 分解を防ぎます。最適な結合条件では、約18 ヌクレオチド以上のトータルRNA の精製を実現します。

Procedure
miRNeasy FFPE の全ての操作は、わずか85 分で完了します。至適化された溶解バッファーはRNA 収量を低減することなく、わずか15 分のProteinase K 分解でサンプル溶解が可能です。溶解後、サンプルを80 ℃で15 分間インキュベートし、ホルマリンによるクロスリンキングを元に戻します。その後、 DNase Booster Bufferとの至適化されたDNaseステップでゲノムDNAを迅速に除去し、RNeasy MinElute Spin Column を用いて高濃度なRNA を精製します(フローチャート“miRNeasy FFPE操作手順”)。RNA をわずか14 ~ 30 μl で溶出するため、より少量の反応容量でダウンストリームアプリケーションを行なえます。
Applications

miRNeasy FFPE Kit は、リアルタイム定量RT-PCR のような様々なアプリケーションで使用できるトータルRNA を含むmiRNA を精製します。

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