Blood & Cell Culture DNA Midi Kit

血液および培養細胞から最大100 µgまでの高分子DNAを単離
  • 150 kbまでのDNAを確実に単離
  • フェノール/クロロホルム抽出が不要
  • 多数サンプルの簡便な同時処理

Blood & Cell Culture DNA Kitには、様々な生物サンプルから高純度のゲノムDNAを精製するためのオープンカラム方式の陰イオン交換チップとバッファーが含まれています。精製されるDNAのサイズは、平均50~100 kb、最大150 kbです。

Produto Num Cat. Preço de lista:
Blood & Cell Culture DNA Midi Kit (25)
25 QIAGEN Genomic-tip 100/G, QIAGEN Protease, Buffers
13343
R$3.412,00
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Genomic DNA Buffer Set
Buffers, including specific lysis buffers for yeast, bacteria, cells, blood, and tissue: Y1, B1, B2, C1, G2, QBT, QC, QF; for 75 mini-, 25 midi-, or 10 maxipreps
19060
R$1.309,00
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The Blood & Cell Culture DNA Midi Kit is intended for molecular biology applications. This product is not intended for the diagnosis, prevention, or treatment of a disease.
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QIAGEN Genomic-tip procedure.|Genomic DNA of up to 150 kb.|
Samples are first lysed (tissue samples are mechanically disrupted) and proteins simultaneously denatured in the appropriate lysis buffer. QIAGEN Protease or Proteinase K is then added and after a suitable incubation period, lysates are loaded onto the QIAGEN Genomic-tip. DNA binds to the column while other cell constituents pass through. Following a wash step to remove any remaining contaminants, pure, high-molecular-weight DNA is eluted and precipitated with isopropanol.|Pulse-field gel electrophoresis of DNA (2 µg) purified using QIAGEN Genomic-tips. M: markers.
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Desempenho

QIAGEN Genomic-tipでの調製法は、非常に緩和な条件下で行なわれるので、DNAの断片化はほとんど認められません。QIAGEN Genomic-tipで精製したDNAのサイズは、平均50~100 kb、最大150 kbです(図"150 kbまでのゲノムDNA")。精製されたDNAはRNA、タンパク質、代謝物などの夾雑物をまったく含まず、A260/A280比は1.7~1.9です。

得られるDNAのサイズが極めて大きいため、様々なプラットフォームにおける次世代シークエンシング(NGS)用の高品質ライブラリーの調製に特に適しており、幾つかの中核となる施設によって推奨されています。

Blood & Cell Culture DNA Midi Kitを用いた代表的な収量
サンプル 収量(µg)
全血(ヒト)
5 ml 80~100
培養細胞(HeLa)
2 x 107 80~100

Fundamento

Blood & Cell Culture DNA KitsのQIAGEN Genomic-tipは、様々な生物サンプルからフェノールやクロロホルムを使用せずに高純度の高分子DNAを精製するための、ユニークなQIAGEN陰イオン交換テクノロジーを使用しています。種々のサンプルに対応した溶解バッファーは、ヌクレアーゼ、ヒストンおよびDNA結合タンパク質のみならず、感染性のウイルス粒子さえもすぐに変性可能です。バッファーによって決定されるpH、および塩濃度の条件下では、DNAはカラム中のQIAGENレジンに結合し、タンパク質、炭水化物および代謝物等の細胞構成物は結合せずに流出します。精製したDNAは高塩濃度バッファーで溶出されます。Genomic-tipはオープンカラム方式で、カラム樹脂が乾燥することはないので、操作中に付き添う必要はありません。従って、実際の取り扱い時間は最小限で済み、多数サンプルの同時並行処理に最適な方法です。  

Procedimento

サンプルは、最適な溶解バッファー内で溶解され(組織サンプルは予め機械的に破砕します)、同時にタンパク質も変性されます(フローチャート"QIAGEN Genomic-tip製法")。QIAGEN ProteaseあるいはProteinase Kを添加し、適切なインキュベーション後、ライセートをQIAGEN Genomic-tipにロードします。DNAはカラムに結合し、他の細胞構成物は流出されます。残った夾雑物を除去するための洗浄ステップ後、純粋な高分子DNAを溶出し、イソプロパノールで沈殿させます。全製法中のマニュアルでの作業時間は血液、培養細胞では30分です。

Blood & Cell Culture DNA Kit は、血液および培養細胞からの高分子DNA分離に必要なものが全て入っている、即使用可能なキットです。

Aplicações

Blood & Cell Culture DNA Midi Kitで精製したDNAは、次のようなアプリケーションに最適です。

サンガーおよび次世代シークエンシング
RFLP解析
遺伝子ターゲティング解析
トランスジェニック動物のスクリーニング
DNAフィンガープリント研究
PCR増幅
Característica
Especificações
Applications PCR, RFLP, blotting, screening
Elution volume 0.1–2 ml
Format Genomic tip
Main sample type Blood, cells
Processing Manual
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein DNA
Sample amount 5 ml/2 x 10e7
Technology Anion-exchange technology
Yield 80–100 µg

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Safety Data Sheets
2
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Imagens
QIAGEN Genomic-tip procedure
QIAGEN Genomic-tip procedure.
Samples are first lysed (tissue samples are mechanically disrupted) and proteins simultaneously denatured in the appropriate lysis buffer. QIAGEN Protease or Proteinase K is then added and after a suitable incubation period, lysates are loaded onto the QIAGEN Genomic-tip. DNA binds to the column while other cell constituents pass through. Following a wash step to remove any remaining contaminants, pure, high-molecular-weight DNA is eluted and precipitated with isopropanol.
Genomic DNA of up to 150 kb
Genomic DNA of up to 150 kb.
Pulse-field gel electrophoresis of DNA (2 µg) purified using QIAGEN Genomic-tips. M: markers.