Blood & Cell Culture DNA Kitには、様々な生物サンプルから高純度のゲノムDNAを精製するためのオープンカラム方式の陰イオン交換チップとバッファーが含まれています。精製されるDNAのサイズは、平均50~100 kb、最大150 kbです。
Blood & Cell Culture DNA Maxi Kit は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。
QIAGEN Genomic-tipでの調製法は、非常に緩和な条件下で行なわれるので、DNAの断片化はほとんど認められません。QIAGEN Genomic-tipで精製したDNAのサイズは、平均50~100 kb、最大150 kbです(図"150 kbまでのゲノムDNA")。このDNAはRNA、タンパク質、代謝物などの夾雑物をまったく含まず、A260/A280比は1.7~1.9です。
得られるDNAのサイズが極めて大きいため、様々なプラットフォームにおける次世代シークエンシング(NGS)用の高品質ライブラリー調製に特に適しており、幾つかの中核となる施設によって推奨されています。
Blood & Cell Culture DNA KitsのQIAGEN Genomic-tipは、様々な生物サンプルからフェノールやクロロホルムを使用せずに高純度の高分子DNAを精製するための、ユニークなQIAGEN陰イオン交換テクノロジーを使用しています。種々のサンプルに対応した溶解バッファーは、ヌクレアーゼ、ヒストンおよびDNA結合タンパク質のみならず、感染性のウイルス粒子さえもすぐに変性可能です。バッファーによって決定されるpH、および塩濃度の条件下では、DNAはカラム中のQIAGEN レジンに結合し、タンパク質、炭水化物および代謝物等の細胞構成物は結合せずに流出します。精製したDNAは高塩濃度バッファーで溶出されます。Genomic-tipはオープンカラム方式で、カラム樹脂が乾燥することはないので、操作中に付き添う必要はありません。従って、実際の取り扱い時間は最小限で済み、多数サンプルの同時並行処理に最適な方法です。
サンプルは、最適な溶解バッファー内で溶解され(組織サンプルは予め機械的に破砕します)、同時にタンパク質も変性されます(フローチャート"QIAGEN Genomic-tip製法")。QIAGEN ProteaseあるいはProteinase Kを添加し、適切なインキュベーション後、ライセートをQIAGEN Genomic-tipにロードします。DNAはカラムに結合し、他の細胞構成物は流出します。残った夾雑物を除去するための洗浄ステップ後、純粋な高分子DNAを溶出し、イソプロパノールで沈殿させます。全操作中のマニュアル作業時間は血液、培養細胞では30分です。
Blood & Cell Culture DNA Kit は、血液および培養細胞からの高分子DNA分離に必要なものが全て入っている、即使用可能なキットです。
Blood & Cell Culture DNA Maxi Kit で精製したDNAは 、次のようなアプリケーションに最適です。
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